痰涂片熒光金胺O法檢查抗酸桿菌的檢驗價值探討

黃承輝，何偉霞，吳寶玉

（惠陽三和醫(yī)院（有限合伙），廣東 惠州 516211）

結(jié)核病是由結(jié)核桿菌（呈抗酸性菌）感染引起的慢性傳染病，具有難治愈、死亡率高的特點，早期診斷并及時治療，是提升療效、改善預(yù)后的基本前提[1]。鑒于此，為了進(jìn)一步探討痰涂片熒光金胺O法檢查抗酸桿菌的檢驗價值，現(xiàn)就本院62例患者的病歷資料進(jìn)行回顧性分析，匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年10月～2019年10月診治的62例結(jié)核病患者，所有患者均經(jīng)影像學(xué)檢查、病理檢查、痰聚合酶鏈反應(yīng)檢查等證實，滿足臨床診斷規(guī)定，均出現(xiàn)不同程度的咳嗽、咳痰、乏力、盜汗、低熱等癥狀，部分患者伴有氣急、胸悶、胸痛等表現(xiàn)?；颊咧?，男39例，女23例；年齡20～65歲，平均（36.51±3.56）歲；病程3個月～10年，平均（6.5±1.1）年。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本制備

清晨采集痰液標(biāo)本，采集前讓患者用雙氧水漱口，以確保口腔清潔。患者用力進(jìn)行深部咳嗽后，第二次提取深部痰液，以無菌器皿收集、裝載并送檢。以竹簽挑取標(biāo)本的膿血樣或干酪樣部分約0.05 mL，置于玻片上均勻涂成10 mm×20 mm的橢圓形痰膜，火焰加固，制成痰液標(biāo)本。

1.2.2 熒光金胺O法檢測

痰液標(biāo)本滴加染色劑（金胺O），染色15 min，流水從玻片一側(cè)慢慢沖洗，沖去染色液后去除玻片上的水；在痰膜上滴入鹽酸酒精溶液，脫色1～2 min或至無色，水洗；加高錳酸鉀復(fù)染液2～4 min，水洗，自然干燥后鏡檢。運用含有紫藍(lán)光激發(fā)濾板（波長：350～490 nm）的熒光顯微鏡，10倍目鏡、20倍物鏡下觀察，背景偶有殘留物且為淡黃色；抗酸桿菌為明顯的橘黃色，經(jīng)40倍物鏡二次觀察，呈桿狀或短棒狀。

1.2.3 抗酸染色冷染法檢測

痰液標(biāo)本于痰膜上蓋滿石炭酸復(fù)紅染液，染色10 min，洗掉染色液，瀝去剩余的水，滴入鹽酸酒精溶液脫色1～2 min或至無色，水洗，滴入亞甲藍(lán)復(fù)染30～60 s，水洗，自然干燥后鏡檢。運用普通光學(xué)顯微鏡，10倍目鏡、100倍油鏡下觀察，抗酸桿菌為紅色，其他細(xì)菌及細(xì)胞均為藍(lán)色。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）對比熒光金胺O法與抗酸染色冷染法的檢測結(jié)果，包括陰性（-）、陽性（+、1+、2+、3+、4+）；（2）以臨床病理診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，計算并對比熒光金胺O法與抗酸染色冷染法的檢驗價值，包括準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度。準(zhǔn)確度=（真陽性+真陰性）/（真陽性+假陽性+真陰性+假陰性）；靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）；特異度=真陰性/（假陽性+真陰性）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0系統(tǒng)，計數(shù)數(shù)據(jù)以%表示，行x2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 熒光金胺O法與抗酸染色冷染法的檢測結(jié)果對比

熒光金胺O法的陽性率高于抗酸染色冷染法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 熒光金胺O法與抗酸染色冷染法的檢驗價值對比

病理診斷檢出陽性57例，陰性5例，以病理診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)計算，熒光金胺O法檢驗的準(zhǔn)確度、敏感度、特異度分別為66.1%、66.7%、60.0%，抗酸染色冷染法分別為56.5%、56.1%、40.0%，熒光金胺O法檢驗的準(zhǔn)確度、敏感度、特異度均高于抗酸染色冷染法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2、3。

表2 熒光金胺O法、抗酸染色冷染法檢驗結(jié)果與病理診斷結(jié)果的比較（n）

表3 熒光金胺O法與抗酸染色冷染法的檢驗價值對比[n（%）]

3 討 論

抗酸染色冷染法是抗酸桿菌檢驗的常用手段，因敏感度與特異度較差，臨床診斷時易出現(xiàn)漏診、誤診，導(dǎo)致其應(yīng)用受限[4]。熒光金胺O法具有操作簡易、染色明顯的特點，在一定程度上提高了結(jié)核病患者病灶組織中抗酸桿菌的檢出率，尤其對于病變活動性輕、排菌量少的結(jié)核病，其診斷優(yōu)勢更為明顯[5]。

本研究結(jié)果顯示，熒光金胺O法的陽性率高于抗酸染色冷染法，且準(zhǔn)確度、敏感度、特異度均高于抗酸染色冷染法，提示熒光金胺O法的檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確率高于抗酸染色冷染法。

綜上所述，痰涂片熒光金胺O法檢查抗酸桿菌的檢驗價值高，可明顯提高臨床診斷準(zhǔn)確率，與抗酸染色冷染法相比具有更高的敏感度與特異度，值得推行。