軟顆粒飼料對擬穴青蟹成活、生長和肌肉氨基酸組分的影響

黃偉卿 ，林小金，鐘傳明，陳云月，張藝，王永貴，臧蔓，施蕾，周振平

（1.寧德市鼎誠水產有限公司，福建 寧德 352100；2.寧德師范學院生命科學學院，福建 寧德 352100；3.福建省閩東水產研究所，福建寧德 352100；4.福建省水產技術推廣總站，福建 福州 350000；5.寧德市水產技術推廣站，福建 寧德 352100）

青蟹肉味鮮美，營養(yǎng)價值高,適應性強、個體大、生長速度快，已成為許多國家人工養(yǎng)殖的主要海洋蟹類[1]。隨著人工繁育、苗種培育和養(yǎng)成技術[2-4]及養(yǎng)殖設施設備的不斷改進優(yōu)化[5-7]，青蟹養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，產量不斷提高。據統(tǒng)計，2018 年全國青蟹面積23 129 hm2，產量達15.8 萬t，福建省青蟹養(yǎng)殖面積4 159 hm2、位居全國第三，產量36 320 t、位居全國第二。隨著青蟹產業(yè)蓬勃的發(fā)展，艾春香等[8-11]、莫兆莉等[12]、蘇以鵬[13]和董蘭芳等[14]已研出幼蟹、成蟹、親蟹系列配合飼料，為青蟹人工配合飼料的研發(fā)提供了理論基礎。

軟顆粒飼料采用冰鮮雜魚與具有特定營養(yǎng)成分或功能的粉料制成，綜合了鮮雜魚等生物餌料和膨化飼料等硬飼料的長處，適口性好,易于吞食消化，還可根據營養(yǎng)需求進行調整，提高飼料效率，減少殘餌對海區(qū)水質的污染和各種疾病的發(fā)生，目前已在魚類[15-17]中廣泛應用。何爾榮等[18]在三疣梭子蟹Portunus trituberculatus 中也開展了相關研究，認為軟顆粒飼料有助于提高養(yǎng)殖成活率和生長速度，降低成本；黃偉卿等[19]在培育鋸緣青蟹Scylla serrata“紅膏蟹”時開展過探索，發(fā)現(xiàn)能有效提高成活率和生長速度（P＜0.05），可顯著加快了育成膏蟹所需時間（P＜0.05），且投喂后肌肉中蛋白質含量提高高，氨基酸種類齊全而均衡。

擬穴青蟹Scylla paramamosain 是我國青蟹屬中最為常見、產量最高的種。本研究在寧德市鼎誠水產有限公司養(yǎng)殖基地室內循環(huán)水工廠擬穴青蟹育肥養(yǎng)殖中應用軟顆粒飼料，通過分析擬穴青蟹育養(yǎng)殖過程中的成活率、生長速度和肌肉營養(yǎng)成分，以期為開展陸基集約化養(yǎng)殖擬穴青蟹技術提供參考。

1 材料與方法

1.1 軟顆粒飼料配方及制備

軟顆粒飼料原料由37%鳀、37%魚粉、10%水、7%復合多維、5%脫殼素和4%石花粉及余下的鹽、鈣、磷等組成。配置時，先將鳀攪成魚糜后按比例加入其他原材料，攪拌均勻后，擠壓成軟顆粒飼料，再經100℃水蒸汽蒸煮15 min，放置-20 ℃冰箱中冷凍保存、備用。制成后的軟顆粒飼料的營養(yǎng)成分由福建省農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測研究所檢測，成分詳見表1。

表1 實驗用軟顆粒飼料的營養(yǎng)成分（濕物質基礎）Tab.1 Approximate nutritional composition of soft pelleted diet used in the experiment（wet material basis）

1.2 擬穴青蟹來源及試驗設計

從三都灣海域采購，挑選體表完整、活力強的海捕野生擬穴青蟹180 只。試驗組與對照組各90只，試驗組平均體質量（34.9±15.50）g、殼長（5.32±0.94）cm，對照組平均體質量（38.65±16.31）g、殼長（6.01±1.24）cm。

試驗在寧德市鼎誠水產有限公司養(yǎng)殖基地青蟹循環(huán)水養(yǎng)殖車間進行；采用“蟹公寓”進行一蟹一盒養(yǎng)殖，每組設3 個平行，每組30 只。試驗組投喂軟顆粒飼料，對照組投喂縊蟶縊蟶Sinonovacula constricta，日投喂量為青蟹體質量的2%～5%，具體投喂量視青蟹攝食調整。

1.3 養(yǎng)殖管理

水溫控制在24～28 ℃之間，日變化量不超過2℃，氨氮控制在0.2 mg/L 以下，溶解氧在4 mg/L 以上，鹽度在18～23 之間，日變化量不超過5，pH 維持在7.9～8.2 范圍內。

每天清除殘餌、糞便和死亡擬穴青蟹，日換水量為總水體的10%左右。

1.4 數據采集和分析

養(yǎng)殖70 d 后，統(tǒng)計每組擬穴青蟹成活數量，將蟹體表的水分擦干，用電子天平（上海上天精密儀器有限公司生產，型號YP6102，精確度0.1 g）逐一稱重，用直尺（精確度0.1 cm）測量甲殼長。

數量性狀測量結束后，每組解剖擬穴青蟹肌肉200 g，委托福建省農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測研究所采用國標GB/T 5009.5-2010、GB/T 5009.6-2003、GB/T 5009.3-2010、GB/T 5009.4-2003 和GB/T 5009.124-2003，檢測粗蛋白、脂肪、水分、灰分和氨基酸含量。

各數量性狀的計算公式如下：

SR=N/n×100%。

式中，SR 為成活率，%；N 為試驗終擬穴青蟹存活數；n 為試驗初擬穴青蟹數量。

SGR=[（LnWf-LnWi）/t]×100%。

式中：SGR 為特定增長率，%/d；Wf為試驗終擬穴青蟹的體質量（g）和甲殼長（cm）；Wi為試驗初擬穴青蟹的體質量（g）和甲殼長（cm）；t 為試驗天數（d）。

根據氨基酸的分類，統(tǒng)計相關氨基酸組份的含量。

根據聯(lián)合國糧農組織/ 世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）建議的氨基酸評分標準模式[20]和中國預防醫(yī)學科學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所提出的全雞蛋蛋白質的氨基酸模式[21]：以氨基酸評分（AAS）、化學評分（CS）和必需氨基酸指數（EAAI）來評定擬穴青蟹肌肉蛋白質的氨基酸營養(yǎng)價值，其計算公式如下：

式（3）中：n 為比較必需氨基酸數；t 為待測樣品蛋白質必需氨基酸的含量；s 為全雞蛋蛋白質的必需氨基酸含量；Lys 為賴氨酸，Val 為纈氨酸。

1.5 數據處理

試驗數據用（平均值±標準差）表示，采用SPSS 17.0 軟件處理，用獨立樣本T 檢驗對結果進行顯著性水平檢驗。

2 結果與分析

2.1 軟顆粒飼料對擬穴青蟹成活率和生長的影響

投喂軟顆粒飼料的試驗組中，擬穴青蟹成活率為（82.4±6.72）%，極顯著高于對照組（73.9±2.57）%（P＜0.01）；甲殼長和體質量的特定增長率顯著大于對照組（P＜0.05）；脫殼間隔時間為（28.5±6.36）d，顯著低于對照組（33.0±7.07）d（P＜0.05）（表2）。

2.2 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉氨基酸組分的影響

擬穴青蟹攝食軟顆粒飼料時，肌肉中氨基酸總量（13.06±5.23）%，極顯著高于對照組（9.95±3.45）%（P＜0.01）；必需氨基酸（4.33±1.64）%和呈味氨基酸（5.35±2.02）%的含量顯著高于對照組（3.36±1.06）%和（3.99±1.25）%（P＜0.05）（表3）。

2.3 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉營養(yǎng)評價的影響

投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹肌肉中蛋白質和脂肪顯著高于對照組（P＜0.05），而水分和灰分則低于對照組（表4）。

擬穴青蟹肌肉必需氨基酸含量，以及AAS、CS和EAAI 指數見表4。根據AAS 評價模式，投喂軟顆粒飼料與對照組的擬穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，不存在限制性氨基酸；根據CS 評價模式，投喂軟顆粒飼料與投喂對照餌料的擬穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，亮氨酸、甲硫氨酸＋半胱氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸＋酪氨酸為限制性氨基酸。對比發(fā)現(xiàn)，投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹肌肉必需氨基酸指數（EAAI）為70.44，小于對照組（表5）。

表2 軟顆粒飼料對擬穴青蟹養(yǎng)殖成活率和特定增長率的影響Tab.2 Effect of soft pellet feed on survival rate and specific growth rate of crab culture

表3 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉氨基酸含量的影響Tab.3 Effect of soft pelleted diet on amino acid content in muscle of mud crab

3 討論

3.1 用軟顆粒飼料養(yǎng)殖擬穴青蟹采的可行性

為了解決擬穴青蟹脫殼中互相殘殺導致低成活率等問題，目前擬穴青蟹養(yǎng)殖正逐步形成“一蟹一盒”的陸基工廠化立體養(yǎng)殖模式[7]。該養(yǎng)殖模式的興起，除了考慮養(yǎng)殖盒的設計參數，還應解決養(yǎng)殖中投喂鮮雜魚、縊蟶等魚貝類帶來殘餌清除不便利，污染養(yǎng)殖水體及影響擬穴青蟹攝食效果等問題。王興春等[15]、林建斌[22]和林旋[23]的研究結果證實，投喂軟顆粒飼料的殘餌較鮮雜魚少，排放的總氮、總磷和化學需氧量（COD）等對環(huán)境污染物也顯著小于投喂鮮雜魚，起到了保護水產養(yǎng)殖環(huán)境的作用。黃明堅[16]、全漢鋒等[24]和林建斌等[25]用軟顆粒飼料養(yǎng)殖軍曹魚Rachycentron canadum、大黃魚Pseudosciaena crocea 和點帶石斑魚Epinephelus coioides，提高了魚類的生長和成活率。也有研究證實，軟顆粒飼料在應對病蟲害的感染時，能取到緩解的作用[26]。用軟顆粒飼料培育三疣梭子蟹[18]和鋸緣青蟹“紅膏蟹”[19]，驗證了軟顆粒飼料同樣適用于甲殼類養(yǎng)殖中，具有促進生長和提高成活率和經濟效益的作用。本研究中，用軟顆粒飼料在室內循環(huán)水中育肥擬穴青蟹，成活率和生長速度均高于投喂生物餌料；肌肉營養(yǎng)評價也比對照組佳。該結果為工廠化擬穴青蟹養(yǎng)殖投喂軟顆粒飼料的可行性提供了實踐依據。

表4 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉基礎成分的影響Tab.4 Effect of soft pelleted diet on proximate components in muscle of mud crab

表5 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉AAS、CS 和EAAI 評價的影響Tab.5 Evaluation of AAS,CS and EAAI in muscle of mud crab fed soft pelleted diet

3.2 軟顆粒飼料對擬穴青蟹存活和生長的影響分析

擬穴青蟹養(yǎng)殖過程中，餌料不新鮮或用量不當，容易造成水質惡化，為相應的病原菌的滋生提供環(huán)境，引起包括弧菌病、絲狀細菌病、甲殼潰瘍病和霉菌病等細菌和霉菌性疾病的發(fā)生，造成擬穴青蟹的大面積死亡[27,28]。本試驗投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹的成活率為（82.4±6.72）%，極顯著高于對照組的（73.9±2.57）%（P＜0.01），主要是軟顆粒飼料制備工藝中，增加了100℃水蒸汽蒸熟，一定程度上抑制了病原菌的攜帶；軟顆粒飼料的殘留物粒徑小，容易隨糞便一同被排出，對水環(huán)境的污染小。

蛻殼不遂病是擬穴青蟹養(yǎng)成期中危害最嚴重的病害之一，在養(yǎng)殖后期嚴重影響?zhàn)B殖的成活率和生長速度。該病的原因至今尚未完全弄清楚，但其中缺乏鈣質、甲殼素、蛻殼素等擬穴青蟹蛻殼所必需的物質是導致久不蛻殼、蛻不了殼的主要原因之一[29]。本次試驗的軟顆粒飼料中鈣質達3.16%，可有效加快擬穴青蟹脫殼周期，促進擬穴青蟹的生長發(fā)育，提高了擬穴青蟹的成活率。

3.3 軟顆粒飼料對擬穴青蟹肌肉蛋白質和氨基酸組分的影響

有研究表明，配合飼料中蛋白質含量為38.0%～45.9%能滿足成蟹的蛋白質需求[8,9]。本次制備的軟顆粒飼料（濕物質基礎）中蛋白質的含量為26.6%比較低，這也導致投喂后擬穴青蟹肌肉中蛋白質的含量為（14.05±4.31）%，低于黃偉卿等[19]（19.9%～20.2%）、王雪鋒等[30]的15.57%～17.42%和檀東飛等[31]的結果（15.33%）。但投喂后，仍極顯著高于投喂生物餌料的擬穴青蟹肌肉蛋白質含量（11.11±3.10）%（P＜0.05）。這一現(xiàn)象與黃偉卿等[19]研究發(fā)現(xiàn)投喂軟顆粒飼料可以提高擬穴青蟹肌肉中粗蛋白質的含量一致。

食物蛋白質的營養(yǎng)價值高低主要取決于其所含必需氨基酸的種類、數量和組成比例；呈味氨基酸的高低，也直接決定了食物的鮮美程度和被消費者的接受程度[32]。本研究發(fā)現(xiàn)，投喂軟顆粒飼料組肌肉EAA 的含量為（4.33±1.64）%，顯著高于對照組（P＜0.05），必需氨基酸的種類除Met 外均顯著高于對照組（P＜0.05），且肌肉呈味氨基酸的含量為（5.35±2.02）%，顯著高于對照組（P＜0.05）。認為，產生這一結果的主要原因是軟顆粒飼料適口性好，飼料中的營養(yǎng)物質被擬穴青蟹所吸收、利用和轉化的效果較好。