片段/虛擬分子印跡聚合物的應(yīng)用新進(jìn)展

王藝曉, 李金花*, 王莉燕, 齊 驥, 陳令新

(1. 中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所,中國(guó)科學(xué)院海岸帶環(huán)境過(guò)程與生態(tài)修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東省海岸帶環(huán)境過(guò)程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海岸帶環(huán)境工程技術(shù)研究與發(fā)展中心,山東 煙臺(tái) 264003; 2. 中國(guó)科學(xué)院大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,北京 100049)

分子印跡聚合物(MIPs)是通過(guò)模擬酶與底物或抗原抗體特異性結(jié)合原理制備的高分子聚合物,因其識(shí)別特異性、結(jié)構(gòu)預(yù)定性、易制備、耐受性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用[1]。目前已發(fā)展多種印跡策略用于MIPs制備,提高了選擇吸附性能,擴(kuò)展了應(yīng)用。其中,片段分子印跡聚合物(FMIPs)策略是通過(guò)選取目標(biāo)物的一段特異性識(shí)別序列作為模板用于合成MIPs,克服了某些目標(biāo)物不易獲得或體積較大不適合作為模板的問(wèn)題,尤其對(duì)于易失活的生物大分子及微生物的印跡意義重大;虛擬模板分子印跡聚合物(DMIPs)策略是選用與目標(biāo)物的特異性結(jié)構(gòu)相似或相同的其他物質(zhì),替代目標(biāo)物作為模板制備MIPs,可在很大程度上解決模板不易獲得或較昂貴等問(wèn)題,以及避免識(shí)別吸附過(guò)程中模板可能泄漏,降低對(duì)分析造成的影響。本文主要綜述了片段模板MIPs在生物醫(yī)藥領(lǐng)域、虛擬模板MIPs在樣品前處理和傳感分析領(lǐng)域的最新研究動(dòng)態(tài)和典型應(yīng)用。

1 片段印跡策略

片段印跡策略是在MIPs制備過(guò)程中,用目標(biāo)化合物的一部分代替整個(gè)目標(biāo)化合物作為模板。某些目標(biāo)化合物尤其是生物大分子或細(xì)菌、病毒等微生物,具有不易獲得、性質(zhì)不穩(wěn)定或毒性強(qiáng)等特點(diǎn),因此無(wú)法用完整的靶分子作為模板制備MIPs。使用靶分子中的一段特異性片段代替靶分子作為模板制備出FMIPs的片段印跡策略可很大程度上解決上述問(wèn)題,并可簡(jiǎn)化制備步驟,提高聚合物性能。片段印跡多應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域,尤其是蛋白質(zhì)和微生物檢測(cè)方面,對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞印跡的研究也有進(jìn)展,此外,FMIPs在食品分析領(lǐng)域也有應(yīng)用。

1.1 生物醫(yī)藥

片段印跡策略為整體印跡有困難、易失活或不易保存的目標(biāo)物的印跡提供了可行的方法。近年來(lái),片段印跡策略的研究工作集中在與大分子密切相關(guān)的生物醫(yī)藥領(lǐng)域,主要包括蛋白質(zhì)印跡、微生物印跡和哺乳動(dòng)物細(xì)胞印跡。

1.1.1蛋白質(zhì)印跡

蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，對(duì)外界條件變化敏感，較易失活，不易溶于有機(jī)溶劑，不易與MIPs識(shí)別結(jié)合,這些都增加了制備蛋白質(zhì)MIPs的難度。片段印跡策略的使用,很大程度降低了蛋白質(zhì)MIPs制備過(guò)程的難度,提高了MIPs對(duì)大分子印跡的能力。在蛋白質(zhì)MIPs制備過(guò)程中,片段印跡策略通常是指將蛋白質(zhì)的一段特異性氨基酸序列作為整個(gè)蛋白質(zhì)識(shí)別的模板,這些特異性部分又稱作抗原決定簇或表位,因此也稱作表位印跡策略[2]。

圖 1 FMIPs的合成路線及裝載DOX的FMIPs在腫瘤治療上的應(yīng)用[2]Fig. 1 Synthesis route of FMIPs and the application of DOX-loaded FMIPs on tumor treatment[2] FMIPs: fragment molecularly imprinted polymers; DOX: doxorubicin; TFE: trifluoroethanol; NPs: nanoparticles; MPS: 3-mercapto-1-propanesulfonic acid sodium salt; EPR: enhanced permeability and retention effect.

研究人員[2,3]開(kāi)展了系列表位印跡策略制備蛋白質(zhì)MIPs的研究。例如,以P32膜蛋白(4T1癌細(xì)胞表面過(guò)表達(dá)的膜蛋白)N端表位為主要模板、阿霉素(DOX)為次要模板,采用沉淀聚合反應(yīng)制備了FMIPs納米顆粒[2]。該FMIPs的DOX印跡腔可穩(wěn)定攜帶藥物,保持藥物活性,表位印跡腔可使FMIPs特異性識(shí)別P32膜蛋白。如圖1所示,該實(shí)驗(yàn)選取一段α-螺旋蛋白作為表位模板,制備的熒光FMIPs可以搭載藥物并可特異性識(shí)別表面具有α-螺旋蛋白的癌細(xì)胞,即4T1癌細(xì)胞,可通過(guò)熒光成像對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行定位。對(duì)荷瘤小鼠的治療中,該FMIPs@DOX的治療效果遠(yuǎn)高于普通藥物的治療效果,具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。隨后,他們又以人血清白蛋白(HSA)的C端肽和轉(zhuǎn)鐵蛋白(Trf)的C端肽為表位模板制備了一種熱敏感的雙模板表位FMIPs,能夠同時(shí)識(shí)別HSA和Trf[3]。采用金屬螯合印跡和蒸餾沉淀的方法,以丙烯酸鋅和異丙基丙烯酰胺為功能單體,制備了FMIPs。該方法制備時(shí)間短,僅需30 min。FMIPs對(duì)樣品中的HSA和Trf均有良好的識(shí)別吸附能力,最大吸附量分別為103.67 mg/g和68.48 mg/g,印跡因子分別為2.57和2.17,且具有熱敏性能,能夠?qū)崿F(xiàn)溫控吸附和釋放靶蛋白。

1.1.2微生物印跡

以細(xì)菌為模板制備MIPs通常是將整個(gè)細(xì)菌作為模板制備全細(xì)胞受體檢測(cè)聚合物;然而,大部分細(xì)菌雖有細(xì)胞壁的支撐但仍具有形變特點(diǎn),無(wú)法滿足印跡腔單一的剛性結(jié)構(gòu)要求,在制備及后續(xù)識(shí)別吸附上有困難,且如果操作不當(dāng)容易被感染。片段印跡策略利用細(xì)菌的特異性片段(如糖蛋白、聚糖等)作為模板進(jìn)行印跡,可創(chuàng)造更多的結(jié)合位點(diǎn),降低制備難度,優(yōu)化制備工藝,并且安全可靠。

對(duì)微生物片段印跡策略的應(yīng)用多是針對(duì)其特有的蛋白質(zhì)表位進(jìn)行的。Gupta等[4]構(gòu)建了一種檢測(cè)腦膜炎患者血樣中奈瑟菌的電化學(xué)石英晶體微天平(EQCM)傳感器。以存在于腦膜炎奈瑟菌中的鐵結(jié)合蛋白(ftp A)為模板,在EQCM的鍍金表面通過(guò)自組裝反應(yīng)制備了單層膜,利用硫醇鍵將模板蛋白錨定到單層膜上,形成分子印跡膜。該分子印跡膜用于腦膜炎患者實(shí)際血樣檢測(cè)時(shí),對(duì)ftp A蛋白的檢出限為1.39 ng/mL,印跡因子為12.27,表明對(duì)模板分子具有優(yōu)異的識(shí)別和結(jié)合能力。相比于全細(xì)胞受體聚合物的識(shí)別檢測(cè),該方法為快速檢測(cè)腦膜炎提供了一種可靠、簡(jiǎn)便、成本低的診斷工具,臨床應(yīng)用潛力巨大。Kushwaha等[5]發(fā)展了一種EQCM傳感器用于檢測(cè)麻風(fēng)分歧桿菌。利用麻風(fēng)分歧桿菌表面蛋白的表位序列作為模板,3-甲基丙烯酸磺丙酯鉀鹽、甲基丙烯酸芐酯和4-氨基苯硫酚作為功能單體,合成的FMIPs能夠與感染患者血樣中帶有表位序列的麻風(fēng)分歧桿菌特異性結(jié)合,而不結(jié)合其他血漿蛋白。該FMIPs傳感器對(duì)實(shí)際樣品中麻風(fēng)分歧桿菌的檢出限和定量限分別低至0.161 nmol/L和0.536 nmol/L,為早期預(yù)防及快速診斷麻風(fēng)病提供了有效手段。

病毒感染性強(qiáng),對(duì)生命健康危害較大。以病毒為模板的MIPs快速檢測(cè)方法,在疾病預(yù)防和診療方面有很大的應(yīng)用潛力。但對(duì)于病毒MIPs材料的制備存在很多問(wèn)題,比如病毒在外界環(huán)境下較脆弱、易失活,實(shí)驗(yàn)人員操作不當(dāng)有感染風(fēng)險(xiǎn)等。通過(guò)片段印跡策略,選取病毒表面能夠代表整個(gè)病毒的一段特異性序列作為模板,可以很大程度上解決上述問(wèn)題。Chou等[6]從人類免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶中選取螺旋表位肽作為模板,并將肽模板與水、三氟乙醇和乙腈按一定比例混合,以擴(kuò)大溶液中的螺旋構(gòu)象,在石英晶體微天平芯片上制備螺旋表位介導(dǎo)的MIPs。該MIPs對(duì)HIV蛋白酶有很高的親和力,所構(gòu)建的傳感器對(duì)HIV蛋白酶的檢出限為0.1 ng/mL,提供了一種臨床檢測(cè)病毒的可行方法,這項(xiàng)技術(shù)有望結(jié)合HIV抑制劑對(duì)HIV病毒進(jìn)行靶向治療,前景廣闊。

1.1.3哺乳動(dòng)物細(xì)胞印跡

相比于細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞壁支撐作用,哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞膜較脆弱,因此傳統(tǒng)的整體印跡方法,直接印跡動(dòng)物細(xì)胞需要更溫和的條件,甚至需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一定的前處理。相較于對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的整體印跡技術(shù),片段印跡策略是利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜上有豐富的受體,包括糖蛋白、糖脂等物質(zhì)。不同的細(xì)胞類型表達(dá)不同的蛋白質(zhì)、糖類等,以這些物質(zhì)為模板制備FMIPs,需要注意的是用于細(xì)胞的MIPs要具有較好的生物相容性,另外,片段印跡策略制備的FMIPs大小應(yīng)與體內(nèi)大分子相近,以保證其在血管、淋巴系統(tǒng)等組織中的擴(kuò)散和循環(huán)。

癌細(xì)胞表面會(huì)表達(dá)大量的特異性糖蛋白、糖脂及其他化合物,因此片段印跡策略在癌細(xì)胞的靶向定位及成像上有著豐富的應(yīng)用。除上文提到的以蛋白質(zhì)表位作為模板制備的FMIPs可以作為遞藥系統(tǒng)對(duì)癌細(xì)胞定位、治療、成像外,多糖以及酸類物質(zhì)也是重要的片段印跡策略的模板。Liu等[7]以唾液酸為模板,設(shè)計(jì)合成了一種苯基硼酸基團(tuán)修飾改性的熒光FMIPs。使用該聚合物分別對(duì)表面過(guò)度表達(dá)唾液酸的DU145癌細(xì)胞,以及表面未過(guò)度表達(dá)唾液酸的HeLa細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,FMIPs對(duì)DU145癌細(xì)胞表現(xiàn)出選擇性染色,且熒光強(qiáng)度良好,但即使在長(zhǎng)時(shí)間的孵育后,FMIPs也沒(méi)有進(jìn)入HeLa細(xì)胞。這種方法特異性高,其熒光特性可以準(zhǔn)確地對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行定位。普通的血型鑒別通常是基于抗體與血細(xì)胞表面的抗原識(shí)別結(jié)合產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理,通過(guò)FMIPs特異性識(shí)別結(jié)合血細(xì)胞表面的抗原區(qū)分不同血型的方法,更加簡(jiǎn)便快捷,且避免了抗體作為一種蛋白質(zhì)活性易受外界環(huán)境因素影響的缺點(diǎn)?？乖瓫Q定簇A和B是存在于人類紅細(xì)胞膜上的兩種最重要的抗原,且他們均由寡糖分子決定類型。Piletsky等[8]以半乳糖、巖藻糖和半乳糖組成的B型三糖作為模板制備了磁性分子印跡納米顆粒。具有順磁性的FMIPs會(huì)將已特異性識(shí)別結(jié)合的血細(xì)胞吸引到磁鐵上,導(dǎo)致樣本褪色,從而進(jìn)行鑒別。這項(xiàng)研究證明了FMIPs在鑒別血型上的可行性,但同時(shí)鑒別4種血型還存在一定困難。

1.2 食品分析

片段印跡策略除在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有大量應(yīng)用外,在食品分析領(lǐng)域也有應(yīng)用,但在其他領(lǐng)域的最新應(yīng)用鮮有報(bào)道。如以D-葡萄糖為片段模板選擇性提取大豆中的三種黃酮苷[9],以沒(méi)食子酸為片段模板從茶葉中萃取酯基兒茶素[10],以鄰苯二酚為片段模板萃取茶葉和果汁樣品中的多酚類物質(zhì)[11]。Hou等[11]以多酚類物質(zhì)兒茶素、綠原酸和咖啡酸中的共有結(jié)構(gòu)鄰苯二酚為片段模板,2-苯胺為自聚合印跡涂層,利用硼酸親和印跡技術(shù)制備了中空多孔結(jié)構(gòu)的FMIPs。中空結(jié)構(gòu)有利于模板分子的去除,并能有效與靶分子結(jié)合,2-苯胺自聚合形成的涂層含有豐富的羥基,利于后續(xù)材料表面修飾及親水性提高。該FMIPs作為固相萃取填料高效地選擇性識(shí)別吸附了茶葉和果汁樣品中的上述3種多酚類物質(zhì)。

2 虛擬模板印跡策略

虛擬模板印跡策略是采用在結(jié)構(gòu)、形狀和大小及功能上與目標(biāo)化合物相似的化合物作為模板進(jìn)行印跡,制備出的聚合物通常稱為DMIPs。當(dāng)原有的模板不易獲得,且造價(jià)昂貴或有毒時(shí),除用上述的片段印跡策略外,也常用虛擬模板印跡策略,其可以有效避免模板泄漏造成的污染或?qū)δ繕?biāo)化合物分析結(jié)果造成影響等問(wèn)題[12]。相比于片段印跡策略多用于生物分析,虛擬模板印跡策略適于各類目標(biāo)物,在樣品前處理和傳感分析領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

2.1 樣品前處理

MIPs在樣品前處理中,主要作為SPE的吸附劑,即分子印跡固相萃取(MI-SPE),用于選擇性萃取、富集、分離樣品中的目標(biāo)分析物。MI-SPE主要包括常規(guī)SPE(裝柱SPE)、分散固相萃取(DSPE)、磁固相萃取(MSPE)和基質(zhì)固相分散萃取(MSPD)。Zhang等[13]以棉糖代替氨基糖苷類抗生素作為模板分子,甲基丙烯酸為功能單體,三甲基丙烷三丙烯酸酯為交聯(lián)劑,采用沉淀聚合法制備了新型氨基糖苷類抗生素DMIPs。將此材料作為SPE填料并結(jié)合親水相互作用-高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HILIC-HPLC-MS/MS)技術(shù),成功測(cè)定了環(huán)境水樣中6種痕量氨基糖苷類抗生素(硫酸鏈霉素、硫酸卡那霉素、硫酸安普霉素、硫酸慶大霉素、妥布霉素和硫酸帕洛莫霉素),富有應(yīng)用潛力。Chen等[14]選擇與吡蟲啉和啶蟲脒具有一段相同結(jié)構(gòu)的煙酰胺作為模板,以聚乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑、偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,采用表面印跡技術(shù)制備了DMIPs,用作SPE填料,高效富集了茶多酚中的痕量吡蟲啉和啶蟲脒。他們也分別合成了吡蟲啉和啶蟲脒作為模板的MIPs,發(fā)現(xiàn)DMIPs對(duì)這兩種農(nóng)藥分子具有良好的吸附能力和選擇性。相比于傳統(tǒng)填料,MIPs填料以其高選擇性極大增強(qiáng)了SPE的富集效率,進(jìn)而提高了后續(xù)分析的準(zhǔn)確度。

近來(lái),DMIPs在MSPE[15,16]和MSPD[17]中的應(yīng)用持續(xù)增加。Zhang等[17]采用Pickering乳液聚合法以α-(2,4-二氯苯基)-1H-咪唑-1-乙醇(DCE)為模板合成了DMIPs,作為MSPD吸附劑用于魚樣品中唑類殺菌劑(攀緣唑、克霉唑和咪康唑)的前處理。MSPD萃取時(shí)間短,通過(guò)將DMIPs與樣品充分研磨,萃取劑與目標(biāo)物可充分接觸,從而大大提高吸附萃取效果。

分子印跡膜(MIM)技術(shù)是一種將MIPs合成在多孔膜表面的技術(shù)。MIM具有合成簡(jiǎn)便、成本低、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),可以作為一種樣品前處理材料,從復(fù)雜基質(zhì)中分離富集目標(biāo)物。通過(guò)虛擬模板策略,可以克服MIM在使用過(guò)程中產(chǎn)生的模板泄漏問(wèn)題,避免對(duì)后續(xù)檢測(cè)帶來(lái)影響,極大提高了MIM的性能和應(yīng)用。田紅靜等[18]在聚偏氟乙烯膜表面,以環(huán)丙沙星的結(jié)構(gòu)類似物恩諾沙星為虛擬模板、甲基丙烯酸為功能單體、乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑制備了恩諾沙星MIM,萃取牛奶樣品中的環(huán)丙沙星,結(jié)合儀器分析,快速檢測(cè)了牛奶中痕量環(huán)丙沙星殘留。將虛擬模板印跡策略與MIM相結(jié)合的制備方法為快速準(zhǔn)確檢測(cè)復(fù)雜樣品中痕量目標(biāo)物殘留提供了新思路。

2.2 傳感分析

傳感器主要由信號(hào)識(shí)別單元和信號(hào)轉(zhuǎn)換單元組成,基于MIPs的傳感分析,是指MIPs在傳感器中作為信號(hào)識(shí)別單元,特異性識(shí)別結(jié)合分析物后產(chǎn)生一定的信號(hào),產(chǎn)生的信號(hào)被識(shí)別后得到分析數(shù)據(jù)。虛擬模板印跡策略的使用,一定程度上解決了MIPs在識(shí)別吸附目標(biāo)物的過(guò)程中模板泄漏的問(wèn)題,進(jìn)一步提高了傳感器的檢測(cè)準(zhǔn)確度和靈敏度,拓展了傳感器的應(yīng)用范圍。

Li等[19]以磺胺苯(SZ)為虛擬模板,采用本體聚合法制備了能夠同時(shí)識(shí)別15種磺胺類藥物的DMIPs,將其作為識(shí)別試劑在常規(guī)的96孔微板上構(gòu)建化學(xué)發(fā)光傳感器。傳感器可用于測(cè)定豬肉中15種磺胺類藥物的殘留量,檢出限為1.0～12 pg/mL,響應(yīng)時(shí)間在30 min內(nèi),可重復(fù)使用4次以上。該傳感器可以大量篩查樣本,且操作簡(jiǎn)單,選擇性強(qiáng),靈敏度高,在快檢領(lǐng)域應(yīng)用潛力巨大。

虛擬模板印跡策略也常與其他印跡策略相結(jié)合進(jìn)行傳感分析。Huang等[20]將雙模板印跡策略和虛擬模板印跡策略結(jié)合,制備了MIPs化學(xué)發(fā)光傳感器,用于雞肉樣品中除蟲菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)。以除蟲菊酯I和苯基醚為雙模板合成了用于除蟲菊酯類識(shí)別的雙-虛擬模板MIPs (DDMIPs)。將DDMIPs顆粒涂覆在96微板孔中,然后加入咪唑增強(qiáng)的雙(2,4,6-三氯苯酚)草酸-H2O2系統(tǒng)來(lái)誘導(dǎo)光信號(hào)。最后,利用化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的變化用于分析物定量測(cè)定。結(jié)果表明,該傳感器可重復(fù)使用4次。10種除蟲酯類農(nóng)藥的檢出限為0.3～6.0 pg/mL,空白雞肉樣品的加標(biāo)回收率為70.5%～99.7%。Guo等[21]利用量子點(diǎn)量子產(chǎn)率高、光穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)制備了量子點(diǎn)分子印跡熒光傳感器。以5,7-二甲氧基香豆素為虛擬模板,通過(guò)St?ber法制備了包覆CdTe量子點(diǎn)的DMIPs(MIP@CdTe QDs),利用量子點(diǎn)的發(fā)光特性制備了熒光傳感器,用于對(duì)黃曲霉毒素B1(AFB1)的快速特異性識(shí)別。研究表明,該傳感器與傳統(tǒng)的UPLC-MS測(cè)定的結(jié)果無(wú)顯著差異。該DMIPs傳感分析方法有望為快速檢測(cè)復(fù)雜基質(zhì)中痕量外源有害物質(zhì)開(kāi)辟新途徑。

3 片段印跡和虛擬模板印跡策略的比較

片段印跡和虛擬模板印跡策略都不直接采用待測(cè)目標(biāo)物作為模板,在一定程度上解決了MIPs使用過(guò)程中識(shí)別吸附不穩(wěn)定、模板泄漏、某些模板不易獲得等問(wèn)題,極大拓展了MIPs的應(yīng)用范圍。本文對(duì)兩種策略的異同點(diǎn)及優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)(見(jiàn)圖2)。片段印跡策略對(duì)以細(xì)菌和病毒(傳染性強(qiáng)的物質(zhì))為模板的印跡過(guò)程操作條件更安全,因使用的模板尺寸較小,有利于創(chuàng)造更多印跡位點(diǎn)。虛擬印跡盡管解決了痕量分析中的模板泄漏問(wèn)題,但有可能會(huì)導(dǎo)致識(shí)別選擇性降低,進(jìn)而降低萃取效率。當(dāng)選取的模板分子與目標(biāo)物的某部分特定結(jié)構(gòu)相同,但模板分子又是另一種不同的物質(zhì)時(shí),既可認(rèn)作片段印跡策略也可認(rèn)作虛擬模板印跡策略。若根據(jù)一類目標(biāo)物的共有結(jié)構(gòu),篩選出理想的模板分子用于制備FMIPs/DMIPs,即可對(duì)一類具有共同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)進(jìn)行同時(shí)、選擇性富集和分離測(cè)定,實(shí)現(xiàn)高通量分析。

圖 2 片段印跡策略和虛擬模板印跡策略的基本示意圖及比較Fig. 2 Basic scheme and comparison of fragment imprinting strategy and dummy template imprinting strategy

4 結(jié)論與展望

盡管片段印跡策略和虛擬模板印跡策略在MIPs制備過(guò)程中應(yīng)用廣泛,然而,目前仍存在以下4點(diǎn)主要問(wèn)題亟待解決:在策略使用過(guò)程中,選擇或制備合適的片段模板和虛擬模板仍然有困難[22];如何確保制得的模板與原模板在吸附選擇性上幾乎沒(méi)有差異,確保理想的特異識(shí)別性;如何在制備和應(yīng)用過(guò)程中使用環(huán)保試劑,減少環(huán)境污染,實(shí)現(xiàn)綠色化學(xué)的目標(biāo)[23];通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到的材料如何進(jìn)一步產(chǎn)業(yè)化,提高實(shí)用效果,以促進(jìn)生產(chǎn)力發(fā)展。期待通過(guò)發(fā)展更多的制備策略和技術(shù)及其組合使用,能夠更快更好推進(jìn)FMIPs/DMIPs在更多領(lǐng)域持續(xù)發(fā)展和高效應(yīng)用。