程園園/江蘇省泰州市高港區(qū)畜牧獸醫(yī)站 225528
王小斌/江蘇省泰州市高港區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 225528
隨著生豬養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)?;图s化發(fā)展,豬病的種類越來越多,嚴(yán)重影響我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展,為此,應(yīng)該采取科學(xué)的豬病診斷技術(shù),從而為防治工作提供依據(jù),PCR 技術(shù)的出現(xiàn)解決了豬病快速診斷的方法,本文主要闡述了PCR 技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用。
經(jīng)過多年的科研,PCR 技術(shù)應(yīng)用于豬病的檢測和診斷中,具有特異性高和便于操作等特點(diǎn),得到了廣泛的臨床應(yīng)用。該技術(shù)能夠在比較短的時(shí)間內(nèi)使基因進(jìn)行快速的擴(kuò)增,從而使微量的基因檢測在臨床中得到應(yīng)用實(shí)踐?,F(xiàn)階段,隨著該技術(shù)的不斷發(fā)展,其不僅僅局限于傳統(tǒng)的檢測技術(shù),同時(shí)經(jīng)過研究之后還出現(xiàn)了各種新型的PCR 技術(shù)。
在該技術(shù)實(shí)際應(yīng)用的過程中,其優(yōu)點(diǎn)主要包括以下幾方面。首先,操作性較強(qiáng),技術(shù)能夠簡單的應(yīng)用于實(shí)際的工作中。其次,高效的擴(kuò)增結(jié)果,能夠?qū)崿F(xiàn)成果的轉(zhuǎn)化。最后,特異性較高,技術(shù)性較強(qiáng)?,F(xiàn)階段,該技術(shù)能夠在很短的時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)張的形勢(shì)使微量基因得到快速的檢測。
3.1 單一型病毒首先,豬2 型圓環(huán)病毒。豬2 型圓環(huán)病毒的主要特點(diǎn)是形態(tài)小,是現(xiàn)階段生物學(xué)范圍內(nèi)已知的最小形態(tài)的病毒。相關(guān)的研究顯示,此病毒包括PCV1 和PCV2 兩個(gè)血清型。前者屬于非致病性的病毒,后者屬于致病性病毒?,F(xiàn)階段,豬2 型圓環(huán)病毒主要危害斷奶仔豬,會(huì)使仔豬出現(xiàn)多系統(tǒng)衰竭綜合征,死亡率可以達(dá)到10%,耐過豬的生長發(fā)育將變的遲緩。采取疫苗免疫的方式能夠提高豬只的抵抗力,減少疾病的發(fā)生。通過一定的形式將該病毒基因作為模板,在適合的反應(yīng)條件下建立起能夠用于檢測豬圓環(huán)2 型病毒的PCR 方法,相關(guān)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該方法的特異性強(qiáng),能夠提高樣品檢測的靈敏度。也在一定程度上說明該方法在臨床試驗(yàn)中能夠取得理想的效果。其次,豬瘟病毒。隨著養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)?;l(fā)展,豬瘟病毒呈現(xiàn)蔓延的趨勢(shì),相關(guān)的工作部門也加強(qiáng)了對(duì)豬瘟病毒的研究,并且在生物技術(shù)方面取得了一定的成就,可以建立起用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的方式檢測是否存在豬瘟病毒。通過相關(guān)的一系列的實(shí)驗(yàn)研究證明,該方法能夠取得比較明顯的效果,在彌補(bǔ)傳統(tǒng)免疫血清方法中起著非常關(guān)鍵的作用,同時(shí)可靠性能高,實(shí)際生產(chǎn)的過程中能夠及時(shí)的做出對(duì)豬瘟病毒的診斷和分析。最后,母豬繁殖障礙與呼吸綜合征。母豬繁殖障礙與呼吸綜合征是免疫抑制性疾病的一種,具有很廣泛的流行性,并且發(fā)病時(shí)間短。如果在發(fā)病期間能夠得到及時(shí)準(zhǔn)確判斷的話,尤其是能夠找到病因,采取有針對(duì)性的治療措施能夠減少該疾病的影響。如果母豬出現(xiàn)繁殖障礙呼吸綜合征不能得到有效的對(duì)癥治療,還是使用傳統(tǒng)的血清檢驗(yàn)辦法,浪費(fèi)了大量的救治時(shí)間,也會(huì)耗費(fèi)一定的精力,給養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來很大的風(fēng)險(xiǎn)。為此,采取快速診斷的方式非常必要。
3.2 混合型病毒在PCR 檢測技術(shù)中,還有一種技術(shù)叫多重PCR 技術(shù),該技術(shù)的主要原理就是在反應(yīng)體系中加入兩種或者兩種以上的病毒應(yīng)用,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)多種病毒的有效檢測,同時(shí)檢測結(jié)果比較準(zhǔn)確,實(shí)驗(yàn)反應(yīng)也比較迅速。該技術(shù)具有敏感性強(qiáng)的特點(diǎn),尤其是比PCR 檢測技術(shù)的優(yōu)勢(shì)更加明顯,實(shí)際生豬養(yǎng)殖業(yè)的過程中,可以采取該種技術(shù)檢驗(yàn)多種病毒混合感染的癥狀。多重PCR 技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)豬病診斷的快速性和準(zhǔn)確性,但是該項(xiàng)技術(shù)還有發(fā)展的空間,需要進(jìn)一步的研究和完善。為此,在今后的技術(shù)研究中,可以從增加檢測病原數(shù)量的方面入手,保證反應(yīng)體系中的引物有所增加,從而擴(kuò)展檢測的范圍。另外,在檢測疫苗株和變異株的疾病診治的過程中,還應(yīng)該結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查的情況,在利用該技術(shù)的基礎(chǔ)之上將檢測的敏感性和特異性特征用于縮短檢測時(shí)間,并且能夠在檢測的過程中加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)過程的管理。
豬病種類在不斷增加的同時(shí),關(guān)于豬病的診斷和防治技術(shù)也在進(jìn)步,其中就包括PCR 檢測技術(shù),該技術(shù)能夠?qū)τ行┴i病作出準(zhǔn)確的判斷,進(jìn)一步保證檢測的準(zhǔn)確性和快速性。此外,針對(duì)混合型病癥,可以利用多重PCR 檢測技術(shù),該技術(shù)的靈敏性比較強(qiáng),準(zhǔn)確性高,在診斷的過程中可以節(jié)省大量的時(shí)間,能夠后期的及時(shí)和有效的治療和防治疾病奠定基礎(chǔ),從而減少了養(yǎng)殖者所承擔(dān)的經(jīng)濟(jì)風(fēng)險(xiǎn),促進(jìn)我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。