早期急性腦梗死患者血清MMP-9、S100水平與血腦屏障損傷相關(guān)性研究

黃文娟 張雯雯 岳嬋娟 程星 張俠 陳巍巍

221000徐州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科1，江蘇徐州

221000徐州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科2，江蘇徐州

資料與方法

2019年1月-2020年2月收治急性腦梗死患者53 例，作為急性腦梗死組，男31 例，女22 例；年齡38～87 歲，平均(61.49±9.85)歲；所有患者均為首次發(fā)病，在發(fā)病12 h 內(nèi)入院，按照第四屆全國腦血管病修訂診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)頭顱CT排除出血后入組。對(duì)照組為健康體檢者36例，男21 例，女15 例；年齡49～73歲，平均(61.61±10.48)歲；經(jīng)神經(jīng)系統(tǒng)及CT排查排除顱內(nèi)病灶。急性腦梗死組脫落2例，均為男性患者。

脫落標(biāo)準(zhǔn)：①中途轉(zhuǎn)院或退出研究；②依從性差或不合作。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①病情危重；②生命體征不穩(wěn)定或昏迷狀態(tài)；③自身免疫系統(tǒng)和血液系統(tǒng)疾??；④代謝免疫性疾??；⑤惡性腫瘤；⑥心肝腎功能衰竭、感染等嚴(yán)重合并癥；⑦近期有手術(shù)或創(chuàng)傷、近3個(gè)月內(nèi)有激素使用史及可能影響血清MMP9、S100、CRP、NSE水平的疾病。

方法：①標(biāo)本采集：急性腦梗死患者于發(fā)病72 h 抽取晨起空腹靜脈血1次，對(duì)照組于體檢時(shí)采血1 次。靜脈血標(biāo)本5 mL 采用抗凝管收集，4℃低溫離心機(jī)，2 500 r/min離心15 min，收集上清液，-80℃冰箱儲(chǔ)存，用于ELISA 檢測MMP9；S100、NSE、C 反應(yīng)蛋白送至醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測。②頭顱CT檢查：全部入組患者均在入院當(dāng)天及第10 天復(fù)查頭顱CT。應(yīng)用Pullicino 公式：長×寬×CT 掃描陽性層數(shù)×π/6 計(jì)算梗死體積，梗死體積＜5 cm3為小面積梗死灶，5～10 cm3為中面積梗死灶，＞10 cm3為大面積梗死灶。③NIHSS 評(píng)分：在患者入院當(dāng)天(發(fā)病后12 h內(nèi))進(jìn)行NIHSS評(píng)分，主要通過意識(shí)水平、眼位、面癱、語言、肢體活動(dòng)及感覺等方面。＜4分為輕度腦梗死，5～15 分為中度腦梗死，＞15 分為重度腦梗死。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 23.0 軟件處理；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；多樣本間兩兩比較采用單因素方差分析；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

兩組臨床資料及生化指標(biāo)水平比較：急性腦梗死組年齡、性別、高血壓病、糖尿病、吸煙等情況與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。急性腦梗死組HCY 水平顯著高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴(yán)重程度的關(guān)系：按照NIHSS 評(píng)分將急性腦梗死組患者分為輕、中、重組。急性腦梗死組血清S100、MMP9 水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。輕度組CRP、NSE 水平與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 S100、MMP9、CRP、NSE 隨著神經(jīng)功能損害程度加重而逐漸升高，中度損傷組較輕度損傷組，重度損傷中較重度損傷組之間的S100、MMP9、CRP、NSE 水平均有明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

血腦屏障與梗死面積的相關(guān)性：按照急性梗死組患者顱內(nèi)梗死面積大小，將急性腦梗死患者分為小面積、中面積、大面積腦梗死。隨著急性腦梗死面積的增大，血清S100、MMP9、NSE水平逐漸升高，且各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。小面積組和中面積組CRP 無顯著差異，大面積組CRP 顯著高于中面積組和小面積組。見表3。

表1 兩組臨床資料及生化指標(biāo)水平比較[(±s)，n(%)]

表1 兩組臨床資料及生化指標(biāo)水平比較[(±s)，n(%)]

注：與對(duì)照組相比，?P＜0.05。

組別n平均年齡(歲)男女吸煙高血壓糖尿病血同型半胱氨酸(HCY)(μmol/L)對(duì)照組3661.61±10.48211513(36.11)22(61.11)11(30.56)10.00±3.90急性腦梗組5161.49±9.85292220(39.21)32(62.75)17(33.33)17.80±5.26?

表2 血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴(yán)重程度的關(guān)系(±s)

表2 血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴(yán)重程度的關(guān)系(±s)

注：與對(duì)照組相比，aP＜0.05；與輕度梗死組相比，bP＜0.05；與重度梗死組相比，cP＜0.05。

組別nS100MMP9NSECRP對(duì)照組3675.97±17.9921.84±8.097.05±2.756.44±3.27 NIHSS分級(jí)輕(＜4分)15119.97±25.52a117.58±17.08a7.37±2.986.72±2.86中(5～15分)23200.25±48.85ab165.35±17.68ab20.67±7.29b10.94±4.70b重(＞15分)13396.41±82.64abc217.23±22.44abc46.48±17.52bc43.14±33.76bc

表3 血腦屏障損傷與梗死面積相關(guān)性(±s)

表3 血腦屏障損傷與梗死面積相關(guān)性(±s)

注：與小面積組相比，aP＜0.05；與中面積組相比，bP＜0.05。

組別nNIHSSS100MMP9NSECRP＜5 cm3144.60±3.34136.71±33.62128.91±23.809.84±4.598.24±3.24 5～10 cm31912.22±8.92a215.50±121.37a158.87±34.93a20.42±12.34a8.71±4.80＞10 cm31820.50±9.46ab340.68±81.77ab205.95±37.08ab33.18±14.35ab33.72±31.12b

討論

急性腦梗死是由于多種原因引起的局部腦血液供應(yīng)障礙，缺血、缺氧引起腦屏障破壞，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫豁免地位隨之改變，大量免疫細(xì)胞滲透入腦實(shí)質(zhì)，引起免疫相關(guān)反應(yīng)，最終導(dǎo)致特殊的固有免疫和適應(yīng)性免疫反應(yīng)[1-2]。蛋白質(zhì)在血液中含量豐富，它可以在疾病表現(xiàn)出可察覺的臨床癥狀之前，即出現(xiàn)可監(jiān)測的變化。通過檢測血液指標(biāo)中的MMP9、S100 觀察血腦屏障損傷水平，應(yīng)用CRP 觀察血腦屏障破壞后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎性反應(yīng)，通過檢測NSE 觀察炎性反應(yīng)導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷情況。

血腦屏障是由毛細(xì)血管周圍星形膠質(zhì)細(xì)胞足突，內(nèi)皮細(xì)胞及其緊密連接的基膜、周細(xì)胞組成，起到維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的作用[3-4]。急性腦梗死發(fā)病過程常伴隨著血腦屏障的破壞、受損腦組織中大量炎性細(xì)胞的產(chǎn)生、浸潤和聚集，炎性因子的分泌增多、黏附分子的表達(dá)上調(diào)等。強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)可以導(dǎo)致急性腦梗死后繼發(fā)的腦組織損傷。急性腦梗死患者隨著梗死面積及受損程度的加重，CRP 水平呈逐漸上升趨勢，因此隨著血腦屏障受損加重，會(huì)造成更嚴(yán)重的炎性反應(yīng)[5-6]。本試驗(yàn)同步檢測NSE 水平，入組的急性腦梗死患者，輕度、中度、重度腦梗死組NSE水平呈上升趨勢，神經(jīng)元隨著炎性反應(yīng)損傷逐漸加重。