注射用噴昔洛韋的制備及質(zhì)量研究

王校生(浙江尖峰藥業(yè)有限公司，浙江 金華 321000)

0 引言

注射用噴昔洛韋適用于嚴(yán)重帶狀皰疹患者，如出血性帶狀皰疹，壞疽性帶狀皰疹，播散性帶狀皰疹，嚴(yán)重疼痛的早期帶狀皰疹等和免疫機(jī)能障礙并發(fā)的帶狀皰疹。長(zhǎng)期以來(lái)，噴昔洛韋在用藥劑型上一直有著較大的局限性。國(guó)內(nèi)外只有外用霜?jiǎng)┖腿楦鄤﹥煞N劑型。而這些劑型用于重癥患者以及免疫功能低下患者都容易產(chǎn)生嚴(yán)重的并發(fā)癥，實(shí)踐證明，用注射給藥方式更有利于快速控制病情。本文對(duì)注射用噴昔洛韋(凍干粉針)的處方及制備工藝進(jìn)行了篩選，對(duì)其質(zhì)量及安全性等進(jìn)行了研究與評(píng)價(jià)。

1 處方研究

噴昔洛韋與阿昔洛韋一樣，水中溶解度較小，參照注射用阿昔洛韋工藝，將噴昔洛韋轉(zhuǎn)為鈉鹽，加入合適的賦形劑，灌裝，冷凍干燥。

1.1 賦形劑的選擇

在實(shí)驗(yàn)室用的冷凍干燥機(jī)上，我們對(duì)比了不加賦形劑及使用目前凍干制劑中常用輔料低分子右旋糖酐和甘露醇作為賦形劑，方法如下：取噴昔洛韋適量，加5%氫氧化鈉溶液溶解至澄清，用水稀釋至100 mg/mL的濃度。取低分子右旋糖酐適量，加水溶解配制1%、2%、4%三個(gè)溶液濃度。取甘露醇適量，加水溶解配制成4%、6%、8%三個(gè)溶液濃度。將噴昔洛韋溶液分別用水及不同低分子右旋糖酐液和甘露醇溶液等體積稀釋一倍，用10 mL西林瓶灌裝，5 mL/瓶，一同放入凍干機(jī)內(nèi)冷凍干燥，結(jié)果表明加2%低分子右旋糖酐的成型好，無(wú)萎縮。

1.2 酸堿度

噴昔洛韋在水中的溶解度很低，因此提高溶解度是本品制備過(guò)程中需要解決的主要問(wèn)題。經(jīng)初步試驗(yàn)，加入有機(jī)溶媒和某些表面活性劑對(duì)噴昔洛韋溶解度的增加不顯著，而在堿性條件下噴昔洛韋溶解度有較大提高，因此制備時(shí)加入氫氧化鈉，使其成鈉鹽后呈較強(qiáng)的堿性，以250 mg/5mL，完全成鈉鹽溶解后pH值約為11.2～11.3，但凍干后溶于20 mL水中，pH值會(huì)降低0.4左右，參照阿昔洛韋注射劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，將pH值控制在10.5～11.5，配料時(shí)將pH值控制在11.3左右。

1.3 裝量體積

從實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，裝量體積小于4 mL，制品在凍干過(guò)程中，由于凍干箱體傳熱不均勻，凍干曲線(xiàn)不易掌握，部分產(chǎn)品易出現(xiàn)局部萎縮，而且易碎，而裝量在4～5 mL時(shí)，萎縮產(chǎn)品較少見(jiàn)，產(chǎn)品整齊美觀。根據(jù)目前使用10 mL西林瓶情況，將裝量定為4～5 mL/瓶。根據(jù)研究結(jié)果，確定注射用噴昔洛韋處方如下：以1 000瓶，0.25 g規(guī)格計(jì)：噴昔洛韋250.0 g，5%氫氧化鈉適量，低分子右旋糖酐100.0 g，加注射用水至5 000 mL。

2 工藝研究

2.1 配料

按處方量稱(chēng)取噴昔洛韋，用5%的氫氧化鈉溶解至澄清(控制pH值小于11.5)低分子右旋糖酐用注射用水先配制成10%的溶液，加0.5%的活性炭，煮沸30 min，冷卻過(guò)濾。將上述兩種溶液混合，再加入0.5%的活性炭，攪拌30 min，過(guò)濾，取樣測(cè)含量，加注射用水至規(guī)定體積，測(cè)pH值。

2.2 過(guò)濾除菌

上述溶液經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾至A級(jí)潔凈區(qū)內(nèi)。

2.3 灌裝

經(jīng)灌裝機(jī)灌裝，5.0 mL/瓶，半落塞。

2.4 冷凍干燥

灌裝制品進(jìn)箱后，預(yù)凍4 h，擱板溫度至-45 ℃以下，制品溫度為-20 ℃以下，開(kāi)真空泵制品開(kāi)始升華，升華階段制品溫度控制在-15 ℃以下(制品共熔點(diǎn)約為-9 ℃)，待水線(xiàn)到底后，制品溫度緩慢升溫至37 ℃左右，擱板溫度為40 ℃，保溫8 h，真空下壓塞出箱。由于本品有較強(qiáng)的引濕性，故保溫時(shí)間比一般凍干制劑產(chǎn)品延長(zhǎng)，以保證水分控制在標(biāo)準(zhǔn)以?xún)?nèi)。

2.5 成品

制品出箱后，軋蓋，檢驗(yàn)合格后，包裝得成品。

3 注射用噴昔洛韋的質(zhì)量評(píng)價(jià)

(1)性狀。本品三批樣品(批號(hào)200801、 200802 、200803 以下同)均為白色疏松塊狀物。

(2)堿度。取本品三批直接測(cè)定，三批樣品pH值分別為11.4、11.3、11.3。

(3)溶液的澄清度和顏色。取本品，依照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行檢查，結(jié)果三批樣品均符合規(guī)定。

4 質(zhì)量控制方法研究

4.1 材料與儀器

新世紀(jì)T6型紫外分光光度法計(jì)，AE-240型電子天平，噴昔洛韋對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，對(duì)照品含量為99.3%，注射用噴昔洛韋由浙江尖峰藥業(yè)有限公司提供(規(guī)格為0.25 g)。

4.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取噴昔洛韋對(duì)照品約50 mg，精密稱(chēng)定，置50 mL容量瓶中，加水溶解并定量稀釋至刻度，精密吸取1 mL，置100 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻作為對(duì)照品溶液。

4.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

精密稱(chēng)取噴昔洛韋對(duì)照品50 mg，置50 mL容量瓶中，加水溶解并定容得1.0 mg/mL溶液，各精密量取該溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分別置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，以水為空白對(duì)照，在253 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度對(duì)濃度進(jìn)行回歸計(jì)算，得回歸方程：Y=0.044 4+0.05114x,r=0.999 6,結(jié)果表明：噴昔洛韋在水中溶解后，濃度在10.0～50.0 μg/mL范圍內(nèi)，濃度與吸收度呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系。

4.2.3 樣品溶液的含量測(cè)定

取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，精密稱(chēng)定適量(約相當(dāng)于噴昔洛韋0.25 g)，置250 mL容量瓶中，加水200 mL溶解后，加稀鹽酸1 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL至100 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，照紫外-分光光度法(中國(guó)藥典2015版四部)，在253 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。另精密稱(chēng)取噴昔洛韋對(duì)照品，加水溶解并定量稀釋成每1 mL中約含10 μg的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。含量測(cè)定結(jié)果分別為：64.6%、66.76%、67.36%，標(biāo)示含量分別為96.40%、99.6%、97.0%。

4.2.4 精密度試驗(yàn)

取同批對(duì)照品溶液，重復(fù)測(cè)定5次，結(jié)果RSD=0.20%。精密度良好。

4.2.5 回收率試驗(yàn)

取已知含量的噴昔洛韋供試品(約相當(dāng)于噴昔洛韋0.25 g)，精密稱(chēng)定(共5份)，按樣品溶液的配制方法制備供試液，按樣品測(cè)定方法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果，平均加樣回收率為99.34%。RSD=0.31%(n=5)。

4.2.6 重復(fù)性試驗(yàn)取同一批次供試品5份，分別按樣品溶液配制方法操作、測(cè)定、計(jì)算噴昔洛韋含量，得平均值X=66.10%，RSD=0.20%

4.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批供試品溶液，分別在不同時(shí)間測(cè)定，結(jié)果表明，供試品在6 h內(nèi)穩(wěn)定。

4.2.8 有關(guān)物質(zhì)檢查

取本品1瓶，加水200 mL溶解，加入1 mL稀鹽酸，再用流動(dòng)相稀釋制成每1 mL中含0.2 mg的供試品溶液和每1 mL中含2 μg的對(duì)照溶液。照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2015年版四部)測(cè)定，用十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(1:9)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為253 nm，理論板數(shù)按噴昔洛韋峰計(jì)算應(yīng)不低于2500，噴昔洛韋與其相鄰雜質(zhì)峰的分離度不小于1.5。取對(duì)照溶液20 μL注入液相色譜儀，調(diào)整檢測(cè)器靈敏度，使主成分峰高為滿(mǎn)量程20%～25%，再精密取供試品溶液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍。供試品溶液的色譜圖中如顯雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰面積總和，不得大于對(duì)照溶液的主峰面積(1.0%)。三批樣品檢測(cè)結(jié)果分別為0.5%、0.5%、0.7%，結(jié)果符合規(guī)定。

5 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)實(shí)驗(yàn)和查閱相關(guān)文獻(xiàn)，我們對(duì)處方和工藝進(jìn)行了研究，篩選了工藝條件，得出最佳處方和制備工藝，并建立了用紫外分光光度法測(cè)定噴昔洛韋含量的方法。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定注射用噴昔洛韋的含量操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，結(jié)果可靠，可用于注射用噴昔洛韋的含量測(cè)定。文獻(xiàn)報(bào)道有噴昔洛韋栓、噴昔洛韋脂質(zhì)體和噴昔洛韋注射液的制備和質(zhì)量控制，而本文講述了注射用噴昔洛韋(凍干粉針劑)的制備和質(zhì)量研究，該劑型具有比其他任何劑型穩(wěn)定等特點(diǎn)，而且注射劑型起效更迅速，可快速控制病毒感染，對(duì)嚴(yán)重帶狀皰疹具有更快更好的療效，因此具有廣闊的市場(chǎng)，將非常適合我國(guó)目前醫(yī)藥衛(wèi)生狀況，適應(yīng)廣大患者的要求。