談強(qiáng)制免疫疫苗免疫效果跟蹤監(jiān)測時(shí)樣品采集要點(diǎn)

佟玉紅

談強(qiáng)制免疫疫苗免疫效果跟蹤監(jiān)測時(shí)樣品采集要點(diǎn)

佟玉紅

（遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧 沈陽 110032）

強(qiáng)制免疫疫苗免疫效果跟蹤監(jiān)測是對(duì)疫苗免疫效果的真實(shí)評(píng)價(jià)。如何采集到高質(zhì)量的樣品，對(duì)正確評(píng)價(jià)疫苗免疫效果起到至關(guān)重要的作用。筆者就采集前的準(zhǔn)備、采樣時(shí)間安排、采樣技術(shù)、樣品編號(hào)、個(gè)人防護(hù)、保存運(yùn)送等十個(gè)方面進(jìn)行了闡述。

為科學(xué)評(píng)價(jià)重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫疫苗的免疫效果，更好地保障強(qiáng)制免疫工作高質(zhì)量完成，遼寧省對(duì)所有中標(biāo)企業(yè)的疫苗在全省各市開展疫苗免疫效果跟蹤監(jiān)測評(píng)價(jià)，遴選優(yōu)質(zhì)疫苗，為疫苗招標(biāo)采購提供科學(xué)依據(jù)。筆者從事此項(xiàng)工作多年，為了能采集到高質(zhì)量的免疫前、后樣品，結(jié)合自身實(shí)踐談一下采樣要點(diǎn)，以期對(duì)免疫監(jiān)測工作有所幫助。

1 選擇監(jiān)測場（戶）要嚴(yán)格

疫苗免疫效果監(jiān)測評(píng)估對(duì)象要選擇出生后未免疫的動(dòng)物，而且數(shù)量充分，臨床健康，飼養(yǎng)管理、飼養(yǎng)環(huán)境良好。

2 采樣前準(zhǔn)備工作要充分

一要準(zhǔn)備采樣人員的防護(hù)用品，如防護(hù)服、口罩、手套、防護(hù)鏡、鞋套等。二要準(zhǔn)備標(biāo)簽、記號(hào)筆、采樣記錄單、記錄本等。三要準(zhǔn)備好采樣器材，如注射器、采血針管、酒精棉等采血器材，數(shù)量要充足、質(zhì)量要合格。

3 采樣時(shí)間要科學(xué)

每個(gè)免疫評(píng)估動(dòng)物群均采取4次采樣程序，每次采集的有效樣品家禽一般40份、豬牛羊一般20份。由于不同動(dòng)物抗體監(jiān)測時(shí)間不同，采集樣品時(shí)間也不同，安排免疫和采樣時(shí)間要充分考慮到免疫的時(shí)效性，科學(xué)制定樣品采集方案，嚴(yán)格按照規(guī)定時(shí)間操作，否則，會(huì)影響免疫效果監(jiān)測評(píng)價(jià)。

3.1 第1次采樣 所有評(píng)價(jià)動(dòng)物群均在免疫前進(jìn)行第1次采樣。

3.2 第2次采樣 禽流感和豬瘟疫苗在首次免疫后21 d進(jìn)行采樣，口蹄疫、小反芻獸疫疫苗在首次免疫后28 d進(jìn)行第2次采樣。

3.3 第3次采樣 禽流感、豬瘟和口蹄疫疫苗在二免疫后間隔30 d進(jìn)行第3次采樣，小反芻獸疫疫苗在首次免疫后間隔60 d進(jìn)行第3次采樣。

3.4 第4次采樣 第3次采樣30 d后進(jìn)行第4次采樣。

4 采樣技術(shù)要掌握

采樣前應(yīng)了解采集樣品的有關(guān)規(guī)定。各類動(dòng)物均有其不同的特性和執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，采集程序和要求也有所不同，因此，采樣前應(yīng)先掌握有關(guān)要求后再去實(shí)施，確保樣品送檢得出的檢驗(yàn)或監(jiān)測報(bào)告的準(zhǔn)確性。采樣人員應(yīng)熟知容器性能、操作方法和采樣技術(shù)。禽類通常選擇翅靜脈采血。牛、馬、羊可采取耳靜脈、頸靜脈、前臂靜脈和尾靜脈采血。豬可以采取前腔靜脈采血，用量少時(shí)也可從耳靜脈抽取。

5 樣品處理要科學(xué)

畜禽血清樣品采集時(shí)要用真空采血管或者注射器采集動(dòng)物血液1～2 ml，注射器內(nèi)留一些空間，傾斜放置至血液凝固后方可裝袋（最好在溫和環(huán)境下放置，以便血清的析出）。

5.1 標(biāo)準(zhǔn)血清樣品采集關(guān)鍵因素 一是容器，玻璃試管優(yōu)于塑料離心管；二是斜面，與空氣接觸面要大，傾斜靜置1～2 h；三是溫度，最佳溫度是體溫；四是時(shí)間，室溫靜置最短2 h；五是離心，轉(zhuǎn)速要低，以1 000轉(zhuǎn)/ min離心10～15 min。用移液管吸出血清置于離心管中，保證容器完好不遺漏不破損。

5.2 膠凍狀血清成因分析 一是采血前剛喂食，沒有空腹；二是凝血時(shí)間不夠；三是營養(yǎng)過剩的脂肪血。

6 樣品編號(hào)要有序

樣品編號(hào)要統(tǒng)一編制，可以市名稱拼音第一個(gè)大寫字母開頭，同動(dòng)物品種拼音第一個(gè)大寫字母組成，比如沈陽市雞（SJ），大連市豬（DZ），鞍山市牛（AN），撫順市羊（FY）。同一品種疫苗2個(gè)養(yǎng)殖場，每個(gè)養(yǎng)殖場編碼要連續(xù)排列。如沈陽市第一個(gè)雞場樣品編號(hào)為SJ1～SJ40，第二個(gè)雞場樣品編號(hào)就應(yīng)是SJ41～SJ80，依此類推。備用樣品不用編號(hào)，與編號(hào)樣品同放包裝袋中。

7 填寫采樣單要規(guī)范

采樣單內(nèi)容要齊全，如樣品編號(hào)、樣品名稱、動(dòng)物種類、日齡、疫苗名稱、疫苗批號(hào)、生產(chǎn)廠家、免疫次數(shù)、免疫時(shí)間、采樣日期、養(yǎng)殖場名稱、地址、聯(lián)系人及聯(lián)系方式等。編號(hào)與采樣單要一致，具有唯一性和可追溯性。

8 個(gè)人防護(hù)要全面

在采集樣品過程中，由于人畜密切接觸，易感染人畜共患病。因此，采樣人員要穿好防護(hù)服、防護(hù)靴，佩戴醫(yī)用口罩和乳膠手套，不直接接觸動(dòng)物樣品。

9 環(huán)境污染要避免

要注意人為傳播疫病和污染環(huán)境，對(duì)打開末用完的疫苗、采樣器材、防護(hù)用品等要做好現(xiàn)場清理和無害化處理，避免二次污染。

10 保存運(yùn)送是關(guān)鍵

樣品短時(shí)間內(nèi)可在4～8 ℃ 度低溫保存，不超過2周。如時(shí)間較長應(yīng)凍結(jié)保存，注意避免反復(fù)凍融。運(yùn)送時(shí)，如果能在采集24 h后送抵實(shí)驗(yàn)室，則可放在4 ℃ 左右的容器中運(yùn)送。只有在24 h內(nèi)不能送至實(shí)驗(yàn)室時(shí)才可把樣品冷凍，并以此狀態(tài)運(yùn)送。運(yùn)送時(shí)要減少震蕩以免溶血，做好被盜、遺失、外泄、破損等防范。

[1] 孫世穎. 樣品采集的要求及注意事項(xiàng)[J]. 當(dāng)代畜牧, 2014（11）: 45-46.

[2] 徐百萬. 動(dòng)物免疫采樣與監(jiān)測技術(shù)手冊[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2007.

[3] 羅運(yùn)良, 曹新民. 新編獸醫(yī)手冊[M]. 長沙: 湖南科學(xué)技術(shù)出版社, 2011.

（2021–03–25）

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1007-1733（2021）05-0044-02