合并及非合并糖尿病的乳腺癌患者乳腺癌組織IGF-1R表達(dá)及預(yù)后分析

閻曉路，高哲，白麗湘

(河北省人民醫(yī)院，河北 石家莊 050051)

0 引言

乳腺癌在女性惡性腫瘤中占首位，約28%左右，嚴(yán)重危害女性生命健康[1-2]。而2型糖尿病已成為全世界關(guān)注的重大公共衛(wèi)生健康問題，研究推測2000年至2030年全球成人2型糖尿病患者總數(shù)將從1.7億人增長至3.6億人[3]。有數(shù)據(jù)顯示糖尿病是乳腺癌的高危因素之一，20%的早期乳腺癌患者患有糖尿病，其相關(guān)機(jī)制包括高血糖、高胰島素血癥等[4-5]。胰島素和胰島素樣生長因子-1(insulin like growth factor 1，IGF-1)兩者和相應(yīng)受體間有交叉結(jié)合的現(xiàn)象。胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)為一種跨膜的酪氨酸蛋白受體，在乳腺癌、肺癌、神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤、腎上腺皮質(zhì)腫瘤及肝細(xì)胞癌中均有高表達(dá)，且通過與其配體結(jié)合對(duì)細(xì)胞的分化、凋亡及增殖功能等產(chǎn)生重要影響。因此本文通過回顧性研究就診于我院的合并及非合并糖尿病的乳腺癌患者的臨床病理特征以及癌組織IGF-1R的表達(dá)是否存在差異，以探討2型糖尿病和乳腺癌患者生物學(xué)特性的相關(guān)性及影響，探討是否乳腺癌表達(dá)IGF-1R的差異影響了合并糖尿病的乳腺癌患者的預(yù)后，為分析糖尿病與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和理論的依據(jù)，對(duì)乳腺癌的防治具有重要的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 入組標(biāo)準(zhǔn)

收集我院乳腺癌合并2型糖尿病患者102例為2型糖尿病組(糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1999年WHO/IDF提出的診斷標(biāo)準(zhǔn))，選取同時(shí)期就診的乳腺癌非糖尿病患者106例為對(duì)照組，均經(jīng)外科手術(shù)治療且術(shù)后病理證實(shí)為浸潤性乳腺癌。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

1型糖尿病、繼發(fā)性糖尿病、乳腺原位癌、雙側(cè)乳腺癌、男性乳腺癌患者。

1.2 研究方法

整理兩組患者的病例資料，比較兩組的一般資料(年齡、體質(zhì)量、家族史、絕經(jīng)狀態(tài))、臨床分期、腫瘤組織學(xué)分級(jí)、分子分型、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況、5年生存率，檢測乳腺癌組織。臨床病理分期根據(jù)2010年美國癌癥聯(lián)合會(huì)(American Joint Committee on Cancer，AJCC)第七版，組織學(xué)分級(jí)采用Scarff-Bloom-Richardson (SBR)改良分級(jí)系統(tǒng)，乳腺癌分子分型參照2011年3月St. Gallen召開的國際乳腺癌會(huì)議。術(shù)前術(shù)后加強(qiáng)血糖控制，術(shù)后按乳腺癌隨訪原則隨訪5年。

IGF-1R檢測：采用鏈霉素-生物素(S-P)免疫組化技術(shù)檢測乳腺癌組織IGF-1R，具體方法按說明書進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：IGF-1R陽性表現(xiàn)為胞膜處出現(xiàn)淡黃色-棕黃色著色。染色結(jié)果判定均采用Sinicrope改良法。陽性細(xì)胞百分比：染色細(xì)胞<5%計(jì)0分；染色細(xì)胞6%～5%計(jì)1分；染色細(xì)胞26%～50%計(jì)2分；染色細(xì)胞51%～75%計(jì)3分；染色細(xì)胞>75%計(jì)4分。染色強(qiáng)度分為4級(jí)：0分：無色；1分：淺黃色顆粒；2分：深棕黃色；3分：棕黑色。每份切片記分：染色細(xì)胞計(jì)數(shù)分?jǐn)?shù)×染色強(qiáng)度分?jǐn)?shù)，所得分?jǐn)?shù)0～1分為陰性結(jié)果，2～3分為弱 陽性(+)，4～6分為中 度陽性(++)，≥7分為強(qiáng)陽性(+++)，(-)、(+)判為陰性，(++)、(+++)均判為陽性[6]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用(±s)表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

兩組體質(zhì)量、家族史差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2型糖尿病組與對(duì)照組比較年齡較大、絕經(jīng)后比例較高(P<0.05)。

2.2 病理學(xué)特征

2型糖尿病組與對(duì)照組比較臨床分期更晚、組織學(xué)分級(jí)更高，分子分型Basal-like分型者更常見，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示預(yù)后更差。

2.3 預(yù)后情況

2型糖尿病組與對(duì)照組比較患者的局部復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移比例高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2型糖尿病組患者的5年生存率比對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.4 IGF-1R表達(dá)

2型糖尿病組與對(duì)照組比較IGF-1R表達(dá)均高(P<0.05)。

3 討論

隨著現(xiàn)代社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人類逐漸進(jìn)入老齡社會(huì)。伴隨而來的惡性腫瘤和糖尿病已成為當(dāng)前威脅人類健康和生命的兩大常見疾病，這兩類疾病其發(fā)病率和病死率都在逐年升高，目前乳腺癌已經(jīng)成為全球發(fā)病率最高的惡性腫瘤。國內(nèi)外不同研究均發(fā)現(xiàn)，同時(shí)合并糖尿病患者惡性腫瘤的發(fā)生率亦明顯增加。乳腺癌在女性惡性腫瘤中發(fā)病率及病死率均位居第一[1,7]，人類越來越重視糖尿病與乳腺癌發(fā)病的關(guān)系，2型糖尿病可能是乳腺癌發(fā)生的高危因素之一[8]，在乳腺癌的不同發(fā)展階段，乳腺癌細(xì)胞具有異質(zhì)性，導(dǎo)致其不同階段的臨床特征和分子基因表型的異型性，最終影響其不同的治療反應(yīng)和預(yù)后[9]，因此我們在該研究中分析了乳腺癌合并2型糖尿病的患者臨床特征、分子基因表型的差異并分析IGF-1R表達(dá)情況以及對(duì)預(yù)后的影響。

在本研究中發(fā)現(xiàn)2型糖尿病組與對(duì)照組在體質(zhì)量指數(shù)上差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明肥胖既是糖尿病的高危發(fā)病因素，也是乳腺癌的高危發(fā)病原因。多項(xiàng)循證醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)顯示超重和肥胖這兩種因素會(huì)增加女性絕經(jīng)后乳腺癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[10]，其可能的發(fā)病機(jī)制認(rèn)為肥胖不僅會(huì)增加體內(nèi)脂肪細(xì)胞因子的數(shù)量，還能改變胰島素、瘦素以及雌激素等多種激素的水平變化，并和其生物學(xué)活性以及慢性炎癥有關(guān)[11]。Li等研究報(bào)道合并2型糖尿病的乳腺癌患者年齡偏大并且絕經(jīng)后比例較高[12]，Michels等發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)比與非糖尿病患者高17%，且絕經(jīng)后的女性尤為明顯[13]。本研究與上述研究結(jié)果一致，結(jié)果顯示2型糖尿病組患者年齡較大，該組患者絕經(jīng)后比例為67.6%，明顯高于對(duì)照組56.7%。

Peairs等[14]研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)在乳腺癌分子分型以及臨床分期、組織學(xué)分級(jí)等多方面，結(jié)果顯示合并2型糖尿病的乳腺癌患者的臨床分期上晚期占比更多，患者預(yù)后也更差。本研究結(jié)果顯示2型糖尿病組較對(duì)照組臨床分期晚，2型糖尿病組中Ⅱ/Ⅲ期患者的比例(74.5%)顯著高于對(duì)照組(55.7%)，結(jié)果與先前研究基本一致。另外，結(jié)果的分層分析數(shù)據(jù)顯示不同分子分型的乳腺癌患者預(yù)后也不相同，以三陰乳腺癌最差。本研究結(jié)果顯示2型糖尿病組組織學(xué)分級(jí)更高、Basallike型者(即三陰性乳腺癌)更常見，與文獻(xiàn)報(bào)道相似[14]。本研究對(duì)合并2型糖尿病的乳腺癌患者的預(yù)后進(jìn)一步分析，結(jié)果顯示2型糖尿病組與對(duì)照組比較患者的局部復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移比例高，雖有差異但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但2型糖尿病組5年生存率降低。Villareal等[15]針對(duì)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的前瞻性研究顯示，高血糖組(>130 mg/dL)與正常血糖組相比，總生存時(shí)間明顯縮短。Erickson等[16]研究也顯示女性乳腺癌患者糖化血紅蛋白>7%的預(yù)后更差，總生存率低于對(duì)照組。

為進(jìn)一步明確糖尿病與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，我們檢測了合并及非合并糖尿病的乳腺癌患者癌組織IGF-1R的表達(dá)。IGF-1由位于第12號(hào)染色體上的基因編碼，是含有70個(gè)氨基酸的堿性單鏈多肽，與胰島素有60%的同源性。2型糖尿病由于胰島素抵抗的影響，機(jī)體內(nèi)IGF-l與胰島素長期處于高水平狀態(tài)，IGF-1R繼發(fā)性增高，而IGF-1主要通過IGF-1R發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)[17]。IGF-1與IGF-1R結(jié)合后通過激活磷酸肌醇3激酶(PI3K) Akt或Ras/Raf/促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)通路，使Bcl家族中的BAD蛋白發(fā)生磷酸化失活，從而使細(xì)胞免于凋亡[18]。同時(shí)，MAPK通路還可以將信號(hào)轉(zhuǎn)至核內(nèi)導(dǎo)致核轉(zhuǎn)錄因子的激活，促進(jìn)細(xì)胞增殖，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展直接相關(guān)[19]。我們研究結(jié)果顯示2型糖尿病組與對(duì)照組比較IGF-1R陽性率增高，我們通過分析合并2型糖尿病的乳腺癌患者的生物學(xué)特性及預(yù)后發(fā)現(xiàn)2型糖尿病組較對(duì)照組臨床分期晚、組織學(xué)分級(jí)更高、Basal-like型者(即三陰性乳腺癌)更常見，5年生存率降低，提示可能糖尿病患者糖代謝異常，IGF-1R繼發(fā)性增高，促進(jìn)了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展。Christopoulos等報(bào)道IGF-1系統(tǒng)及其受體在乳腺癌的發(fā)生、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中具有重要的作用[20]。

綜上所述，2型糖尿病可能是影響乳腺癌發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的重要危險(xiǎn)因素之一，可以降低乳腺癌患者5年生存率，IGF-1R的高表達(dá)可能是影響合并糖尿病的乳腺癌患者有較差預(yù)后的重要因素之一，未來在患有2型糖尿病的乳腺癌患者臨床治療中可進(jìn)一步干預(yù)其中間環(huán)節(jié)，從而為乳腺癌的預(yù)防與治療提供新的理論思考和新的思路。