膽南星炮制歷史沿革與現(xiàn)代研究△

吳真，劉怡，林麗

1.首都醫(yī)科大學 附屬北京友誼醫(yī)院，北京 100050；2.甘肅中醫(yī)藥大學，甘肅 蘭州 730000

膽南星又名膽星[1]，是天南星與動物膽汁共制而成的炮制加工品，味苦、微辛，性涼，功能為清熱化痰、息風定驚。其炮制應用歷史已900余年，炮制方法多樣且隨時代發(fā)展變遷[2-4]，主要可分為非發(fā)酵法和發(fā)酵法兩類?！吨腥A人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)2020年版記載，膽南星為制天南星的細粉與牛、羊或豬膽汁經(jīng)加工而成，或為生天南星細粉與牛、羊或豬膽汁經(jīng)發(fā)酵加工而成[5]。然而全國各地炮制規(guī)范不統(tǒng)一、質量評價標準不一致。市場上膽南星的品質參差不齊[6-7]，影響臨床療效。各級藥品監(jiān)管部門和中醫(yī)藥研究者一直致力于規(guī)范膽南星的炮制工藝，提高其質量控制標準。2000年以來，多地炮制規(guī)范進行了修編，膽南星炮制方法和質量標準研究取得了一定進展。

鑒此，本文整理歷代藥籍、《中國藥典》、各地現(xiàn)行炮制規(guī)范及近年來膽南星炮制研究報道，試將歷史沿革與現(xiàn)代研究進展對照分析，從原料、工藝、質量鑒別等角度提出問題并進行展望，為深入探究膽南星炮制方法和質量標準提供參考。

1 歷史沿革

1.1 歷代藥籍

膽南星始載于宋代《小兒藥證直訣》：“臘月釀牛膽中陰干百日”[8]。同時期《圣濟總錄》載：“黃牛膽內(nèi)浸三宿焙，牛膽煮一伏時暴干”[9]。釀牛膽長時間陰干法和浸牛膽煮后曝干法，雖制備時長和干燥方式不同，但兩者均有天南星粉末在牛膽中“釀”或“浸”制較長時間的記述，可視為后世發(fā)酵制膽南星法的發(fā)源?！短交菝窈蛣┚址健分惺讋?chuàng)制南星膽汁和餅法：“湯洗，焙，為末，用牛膽汁和作餅，焙干”[10]，提出對南星進行預處理，不需長時間發(fā)酵，提高了生產(chǎn)效率。現(xiàn)在廣為沿用的制天南星細粉與膽汁混合制備膽南星的方法由此可見雛形?！镀諠臼路健分惺状翁岬健把蚰懼啤盵11]?？梢娫谒未?，膽南星的炮制就存在著有或無發(fā)酵工序、用牛膽還是羊膽的不統(tǒng)一。

宋代之后，膽南星炮制法各有沿用、發(fā)展和創(chuàng)新。

在本文所收載的元至民國時期的17項膽南星炮制歷史資料中，12種為釀牛膽長時間陰干法，歸為發(fā)酵法。元、明時期的發(fā)酵工藝與宋代基本相同，操作流程記述更為詳細，出現(xiàn)了認為延長發(fā)酵時間、增加牛膽汁加入次數(shù)可改善膽南星質量的觀點。《活幼心書》載：“剉碎，用臘月黃牛膽釀經(jīng)一夏用”[12]?！兜は姆ā分休d：“須用黃牯牛膽，臘月粉南星，親手修合，風干，隔一年用。牛膽須入三、四次者佳”[13]。明代《本草綱目》記載：“造南星法：以南星生研末，臘月取黃牯牛膽汁，和劑納入膽中，系懸風處干之，年久者彌佳”[1]。明晚期出現(xiàn)了更為復雜的膽星炮制方法?！毒霸廊珪肥蛰d的抱龍丸方中所用膽星注明用“九制”[14]。清代《幼幼集成》較詳細地記錄了九制牛膽南星制法：“取牛膽一枚，傾出膽汁于碗內(nèi)，將南星末和勻，仍復裝入膽皮內(nèi)，懸有風無日處使其陰干，有膽之時將前膽剖破取出，南星末仍以膽汁和勻裝入懸之，能裝過九膽誠為至寶任彼真正牛黃莫能及此?！盵15]九制膽南星需用9個牛膽，膽汁用量大、制作復雜、藥效顯著，但關于制造需用的時間則有不同記載，有用二三年者[16]，有說“至九年才褐色爾”“九年成功者最佳”[17]。

未查到其他古籍文獻記載浸牛膽煮后曝干法。該法可能演變?yōu)閷⑻炷闲欠叟c牛膽汁混合發(fā)酵后蒸制的方法[18]?，F(xiàn)在，全國多地仍在使用膽汁混合發(fā)酵蒸制法。

制南星膽汁和餅法亦未見其他古籍文獻記載。無發(fā)酵工序的膽南星制法古籍中相對少見，如“姜汁浸一夕牛膽拌炒”[19]。在明清較為盛行將生天南星加其他輔料制過后，再研末入牛膽，陰干。制天南星的方法有“姜汁浸炒”[20]、“滾湯明礬或姜汁拌和泡用”[21]、“同桃仁研爛曬干”[22]、“漂天南星、川貝母各半，研極細末”[17]。雖同為置牛膽內(nèi)陰干，這類方法都沒有如前述發(fā)酵法注明所需時間，故難以判定干燥過程是否伴有發(fā)酵。

古法多用牛膽汁，且多注有“臘月黃牯牛膽”，認為其膽汁質佳[1]。羊膽制南星未見宋以后古籍記載?！吨兴幣谥平?jīng)驗集成》載，可以豬膽汁制膽南星[23]。

1.2 歷版《中國藥典》及全國炮制規(guī)范

《中國藥典》1977年版第一次收載膽南星[24]，包括其性狀、顯微和理化鑒別方法?！吨袊幍洹?985年版修訂了膽南星的用量和功能主治[25]，之后歷版《中國藥典》均沿用1985年版膽南星標準至今。自1977年被《中國藥典》收載，膽南星一直按獨立品種列項。在《全國中藥炮制規(guī)范》1988年版中，膽南星被作為天南星的炮制品收載，規(guī)定了2種制法，制南星與膽汁混合蒸制法，或生南星與膽汁混合發(fā)酵后蒸制法。量化了天南星與膽汁投料配比、蒸制時間、發(fā)酵時間和次數(shù)，寫明牛(或豬、羊)膽汁或膽膏粉均可用于制備膽南星[26]。

1.3 全國各省級地方炮制規(guī)范

由于歷史原因，全國各地的炮制方法一直不能統(tǒng)一。本文對現(xiàn)行各省級膽南星炮制規(guī)范進行整理，與20世紀90年代同類統(tǒng)計結果[4]進行比較，認為各地膽南星炮制規(guī)范漸趨統(tǒng)一，更加貼近全國規(guī)范標準，但炮制工藝、膽汁用量、發(fā)酵時間等仍存在差異。全國現(xiàn)行的30個省市炮制規(guī)范中有18個收載了膽南星，共列有31種炮制方法，見表1。其中，5種方法與全國規(guī)范方法一相同，2種方法與全國規(guī)范方法二相同。每100 kg天南星膽汁用量最大的700 kg，最小64 kg，55%的方法采用了天南星與膽汁1∶4的配比。在膽汁來源方面，江西規(guī)定用牛膽汁，四川規(guī)定用豬膽汁，北京、內(nèi)蒙古、浙江3地僅注明膽汁，其余各地均明確可使用牛(或豬、羊)的膽汁。河北、湖北等地取消了地方規(guī)范中的膽南星品種，直接執(zhí)行全國標準。北京原有4種炮制方法，現(xiàn)只保留1種。加大黃制膽南星等地域特點突出的方法不再收錄。

表1 全國各省市膽南星炮制概況

各地炮制方法可分為發(fā)酵法和混合法兩類，安徽等11省市同時收載兩類方法，北京等7省市僅有發(fā)酵法，湖南收2種發(fā)酵法、1種混合法共3種方法，甘肅收1種發(fā)酵法、2種混合法共3種方法。從收載情況看，發(fā)酵法沿用更廣，又有多次發(fā)酵法和單次發(fā)酵法。多次發(fā)酵生產(chǎn)周期更長，最長1年，部分省份明確了發(fā)酵終點性狀指標，沒有規(guī)定具體時間，生產(chǎn)者可根據(jù)環(huán)境溫度等調節(jié)時長以獲得合格的發(fā)酵效果。單次發(fā)酵法耗時更少(3～25 d)，一些發(fā)酵用時短的方法使用了制南星為原料。混合法用料均為制南星，生產(chǎn)周期最短，僅數(shù)小時。

炮制方法沿革有序。混合悶坨法與《太平和劑局方》制南星膽汁和餅法很相近。酒蒸膽南星[27]、川貝膽南星等古法傳承得以保留，但一些需耗時數(shù)年，不符合大規(guī)模生產(chǎn)實際的方法未再收載。

少數(shù)省市制定了高于《中國藥典》2015年版的質量標準，薄層色譜鑒定膽南星中的膽酸類成分含量，增加了水分、灰分、浸出物檢測項[28]。

2 現(xiàn)代研究進展

2.1 膽汁來源、用量對膽南星質量的影響

“膽星，意不重南星而重膽汁，借星以收取汁用，非如他藥監(jiān)制也”[29]，古人認為膽汁在膽南星制備中不是一般認知的輔料，應當被視為主要原料之一。膽汁成分是膽南星現(xiàn)代研究中的重要方向，膽酸類成分測定多見于文獻[30-32]，近年來也出現(xiàn)了關于膽汁來源、用量對膽南星質量影響的研究報道。

傳統(tǒng)膽星炮制多用牛膽汁，少用羊膽汁。前期市場調研發(fā)現(xiàn)，因豬膽汁價廉易得，市售膽南星多為豬膽汁所制。傳統(tǒng)理論認為，牛、豬、羊膽汁性能不盡相同。陳江寧等[33]采用高效液相色譜電霧式檢測器法(HPLC-CAD)檢測發(fā)現(xiàn)，豬、牛、羊膽汁制膽南星中膽酸類成分存在差異，牛膽汁制膽南星中膽酸類成分質量分數(shù)高于羊膽汁和豬膽汁制膽南星，不同膽汁制膽南星對干酵母致小鼠熱證模型的體溫變化影響會隨時間變化呈不同趨勢。另有研究顯示，牛、羊、豬膽汁制膽南星對脂多糖誘發(fā)的急性肺損傷大鼠均具有保護作用，可能是通過抑制炎癥因子的釋放改善肺組織的病理形態(tài)和氧化應激造成的損傷，牛膽南星、羊膽南星較豬膽南星在保護急性肺損傷方面表現(xiàn)出一定優(yōu)勢[34]。以上研究提示，3種膽汁制膽南星均具有清熱化痰作用，牛或豬、羊膽汁均可用于制備膽南星，具備合理性，不同膽汁制膽南星藥效學研究存在差異，其機制尚需深入研究和重復檢驗。

李澤煜等[35]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法(UPLC-MS/MS)及負離子多反應監(jiān)測(MRM)模式測定原料3種配比(膽汁∶天南星分別為3∶1、1∶1、1∶3)的膽南星膽酸類成分含量，結果表明，存在明顯差異，膽汁比例大，則膽南星的解熱、祛痰作用良好，反之作用減弱，但對止咳作用影響較小，認為膽汁與天南星比例不宜低于1∶1。本次檢索未查找到關于多次、大量添加膽汁所制膽南星或“九制膽南星”與按全國炮制規(guī)范所示天南星與膽汁比例為1∶4所制膽南星的成分及藥效比較研究。

2.2 炮制工藝對膽南星成分及質量的影響

20世紀，研究者采用濃縮膽汁混合制[36]、提高發(fā)酵溫度[37]、坨悶制[38]等手段對混合法、發(fā)酵法進行改進，以縮短炮制時間，提高生產(chǎn)效率。僅從生產(chǎn)效率角度考察，混合法優(yōu)于發(fā)酵法。現(xiàn)代研究在評價炮制方法時更加重視炮制過程對提高有效成分含量和藥效的影響。有文獻報道，混合蒸制法制膽南星中主要含有結合型膽汁酸類成分，發(fā)酵制膽南星中含游離型膽汁酸類成分，膽南星炮制發(fā)酵過程可使膽汁中的結合型膽汁酸類成分發(fā)生斷鏈分解，而轉化為游離型膽汁酸[39-42]，膽南星中膽汁酸類成分及其含量可以作為膽南星質量控制的指標[43-44]。朱燕飛等[45]在運用主成分分析(PCA)分析膽南星混合蒸制加工過程中不同工藝參數(shù)對飲片薄層色譜圖譜整體影響時，驗證了豬膽汁來源和不同蒸制時間對成品膽南星物質基礎均有影響，提示PCA所獲參照因子可作為膽南星成品質控的計量手段。唐思園[46]認為，不同發(fā)酵原料和條件能影響膽南星品質。37 ℃干燥條件下，以牛膽粉為原料制備膽南星，可獲得膽汁酸類物質含量高的膽南星發(fā)酵產(chǎn)物。李瑤[47]研究發(fā)酵法和混合法制膽南星在炮制前后成分變化，顯示炮制后較天南星或制天南星，兩者草酸鈣針晶數(shù)量減少、結構破壞；黃酮類成分夏佛托苷、異夏佛托苷及多糖含量均降低。表明2種炮制法均有降低天南星毒性的作用。相較混合制膽南星，發(fā)酵制膽南星中黃酮類成分及多糖含量降低更為明顯，并新生成糖胺類等成分，結合型膽汁酸轉化為游離型膽汁酸，混合制膽南星中則主要含有結合型膽汁酸。應當注意，本文所獲有關文獻多為基于豬膽汁制膽南星的研究，牛、羊膽汁制膽南星是否會有其他結果，尚待研究。鑒于發(fā)酵法和混合法制備的膽南星在成分、性狀等方面的差異，是否能等效替代，需要更多藥效學數(shù)據(jù)支持。發(fā)酵法菌種篩選、溫度濕度控制等方向的研究未見報道。

2.3 質量標準研究

《中國藥典》2015年版所載性狀、顯微、理化鑒定標準難以全面檢查和反映膽南星的品質。建議增加灰分、水分、黃曲霉的檢查?；曳謾z查可有效鑒別摻雜泥沙等雜質的膽南星偽品[48]。水分、黃曲霉檢查可保證發(fā)酵制膽南星的衛(wèi)生和安全性。膽南星薄層鑒別法的研究開展較多，但方法差異較大，選用展開劑、顯色劑、對照品都不一致[49-52]。由于目前膽南星炮制原料和工藝的不統(tǒng)一，藥效物質基礎不明確，尋找一種能廣泛適用且具檢測意義的薄層鑒別方法還需要做大量工作。李欣逸等[53]采用電子鼻技術建立氣味指紋圖譜，不同發(fā)酵時間及不同膽汁比例的膽南星氣味有顯著差別，為膽南星定性鑒別提供一種新的思路。蔡宇憶[54]建立了以總黃酮、總多糖、核苷、膽酸為指標的灰色關聯(lián)分析法，綜合評價膽南星質量。

2.4 傳統(tǒng)炮制方法的保護性研究

一些傳統(tǒng)的膽南星炮制法因操作復雜，耗時耗力，難以適應現(xiàn)代化生產(chǎn)，但不應因此被遺忘而失傳。在走訪中，筆者了解到有飲片廠正在金世元大師等指導下，恢復古法“九制膽南星”的生產(chǎn)。在炮制過程中保留影像及數(shù)據(jù)資料，對不同發(fā)酵節(jié)點的微生物菌群種類和數(shù)量、藥物性狀和成分變化進行檢測記錄，整理分析，開展九制膽南星與普通飲片的藥效學比較研究。守正創(chuàng)新，有助于研究了解古代炮制思想，探尋膽南星藥效物質基礎，同時豐富中藥飲片品種，滿足市場不同層次的需求。古法炮制還給后人留下很多思考空間，如用“臘月黃牛膽”是因為臘月牛膽汁成分有利于膽南星發(fā)酵，還是臘月溫度適宜菌種生長，亦或是出于避免腐敗的考慮。

3 展望與建議

膽南星炮制發(fā)展中始終存在著發(fā)酵法與混合法不統(tǒng)一、不同膽汁選用的問題，現(xiàn)代研究已從成分和藥效方面證明了2種炮制方法、3種膽汁原料的存在具有一定的合理性，也發(fā)現(xiàn)了炮制方法、膽汁來源、膽汁用量對膽南星成分和藥效有不同的影響。深入研究這些差異與炮制減毒、改變藥性之間的關聯(lián)，加強膽南星藥效物質基礎研究，找到能夠充分代表膽南星質量的指標，才能科學篩選原料與炮制方法的優(yōu)勢組合。在沒有結論前，筆者建議應將使用不同膽汁原料的膽南星分開標注，如牛膽南星、豬膽南星，特殊制法如“九制”可單獨列出，分別規(guī)范選料、制法、質量標準等，以便于監(jiān)督管理、合理定價和臨床選用。