應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)提高湖羊產(chǎn)羔數(shù)的試驗(yàn)研究

侯麗萍，劉克禮

（甘肅省定西市畜牧獸醫(yī)局，甘肅 定西743000）

產(chǎn)羔數(shù)是綿羊重要的生產(chǎn)性狀之一，在生產(chǎn)實(shí)踐中很難用傳統(tǒng)的育種方法來提高綿羊群體的產(chǎn)羔數(shù)。目前，國(guó)內(nèi)外提高綿羊繁殖性能常用的方法是利用基因工程技術(shù)進(jìn)行分子育種，從基因水平上提高綿羊的繁殖性能。因此，檢測(cè)湖羊群體中與產(chǎn)羔數(shù)相關(guān)的主效基因并研究該基因與產(chǎn)羔數(shù)之間的關(guān)系對(duì)提高湖羊產(chǎn)羔率至關(guān)重要。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

2018年11月至2020年6月，基礎(chǔ)母羊群篩選，高繁湖羊群選育、擴(kuò)繁、飼養(yǎng)管理等在定西市昌鑫農(nóng)牧科技發(fā)展有限公司實(shí)施。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

根據(jù)系譜記錄連續(xù)2 胎產(chǎn)雙羔及以上湖羊600 只組建基礎(chǔ)母羊群，平均每胎產(chǎn)羔2.26 只。湖羊公羊18 只。

1.3 檢測(cè)材料

采集基礎(chǔ)母羊全血200 份，公羊全血18 份，每份10mL，肝素納抗凝，酚- 氯仿抽提后，TE 溶解，-20℃保存。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 以睪丸大小為數(shù)量性狀，利用二代測(cè)序技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)鑒定控制公羔繁殖性狀的主效基因?；蛐蜋z測(cè)在蘭州大學(xué)完成。

1.4.2 利用同期發(fā)情和人工授精技術(shù)，對(duì)基礎(chǔ)羊群進(jìn)行擴(kuò)繁，利用分子標(biāo)記輔助選擇育種技術(shù)，篩選出具有高繁力基因的湖羊母羊和具有高繁殖力基因純合子的湖羊公羊。

1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)系譜記錄，以連續(xù)2 胎產(chǎn)雙羔及以上母羊組建基礎(chǔ)母羊群，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)羔率；采集基礎(chǔ)母羊和種公羊血液進(jìn)行檢測(cè)與繁殖性狀相關(guān)的主效基因，篩選出純合子種公羊和高產(chǎn)基礎(chǔ)母羊；利用同期發(fā)情和人工授精技術(shù)，對(duì)基礎(chǔ)母羊群進(jìn)行擴(kuò)繁，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)羔率。

2 結(jié)果與分析

2.1 FecB 基因是湖羊產(chǎn)羔數(shù)的主效基因

檢測(cè)結(jié)果表明：FecB 基因位點(diǎn)在湖羊中存在多態(tài)性，是限制湖羊排卵及產(chǎn)羔率的主效基因。FecB 基因中BB 基因型個(gè)體和B+基因型個(gè)體產(chǎn)羔數(shù)較高（2.66-2.73），表明FecB 基因型與湖羊產(chǎn)羔數(shù)顯著相關(guān)，可將其作為性狀與標(biāo)記間連鎖分析的候選標(biāo)記。

2.2 分子標(biāo)記技術(shù)可提高產(chǎn)羔率

采用同期發(fā)情和人工授精技術(shù)對(duì)600 只湖羊基礎(chǔ)母羊通過同期發(fā)情技術(shù)處理，用采集的純合子湖羊種公羊精液人工授精，懷孕率達(dá)97%，2胎共產(chǎn)羔3049 只（其中公羔1281 只，母羔1768只），繁殖率達(dá)262%（試驗(yàn)前為226%），表明應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)可有效提高試驗(yàn)湖羊的產(chǎn)羔率。

2.3 FecB 基因在湖羊的遺傳多態(tài)性分析

檢測(cè)結(jié)果表明：湖羊BB、B+ 及++ 基因型頻率分別為0.71、0.26、0.06，B 和+ 等位基因型 頻率為0.81、0.15。湖羊該點(diǎn)位He 以及PIC 分別為0.30、0.27，表現(xiàn)為中度多態(tài)，可見湖羊FecB 的多態(tài)性較高，遺傳變異較大，可作為繁殖性狀的候選基因，在提高湖羊產(chǎn)羔率的標(biāo)記輔助技術(shù)上應(yīng)用。

2.4 FecB 基因多態(tài)性與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性分析

FecB 基因不同基因型與產(chǎn)羔數(shù)統(tǒng)計(jì)表

由上表可知，BB 型和B+型個(gè)體的產(chǎn)羔數(shù)均極顯著高于++ 型個(gè)體（P＜0.01）,而BB 型個(gè)體和B+ 型個(gè)體之間無顯著差異（P＞0.05），表明FecB基因與湖羊產(chǎn)羔數(shù)相關(guān)性較高。

3 小結(jié)

分子標(biāo)記技術(shù)作為綿羊常規(guī)育種的輔助工具，在國(guó)內(nèi)外育種界普遍應(yīng)用。但由于綿羊繁殖性狀屬于低遺傳力性狀，群體選擇世代進(jìn)展緩慢，要培育出具有鮮明地方特色的優(yōu)勢(shì)肉羊品種（系）不僅需要大量的人力、物力、時(shí)間、經(jīng)費(fèi)投入，而且需要科研院所的技術(shù)支撐，所以在基層由于受技術(shù)、資金、條件等限制推廣應(yīng)用難度較大。因此，急需盡快開發(fā)出分析速度快、成本低、穩(wěn)定性好、信息量更大的分子標(biāo)記。分子標(biāo)記技術(shù)終將在畜禽育種方面得到更加廣泛的應(yīng)用，并將極大的推動(dòng)畜禽育種的進(jìn)程。