河北楊組培苗微枝試管外生根集成技術(shù)※

●胡相偉（甘肅省蘭州市生態(tài)林業(yè)試驗總場 甘肅 蘭州 730085）

近年來，隨著信息網(wǎng)絡(luò)技術(shù)、生物基因技術(shù)、農(nóng)業(yè)工程技術(shù)、材料科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，植物組織培養(yǎng)產(chǎn)業(yè)開始迎來新一輪蓬勃發(fā)展的機遇，植物組織培養(yǎng)技術(shù)在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、林業(yè)、花卉業(yè)、生物醫(yī)藥領(lǐng)域也發(fā)揮著越來越重要的基礎(chǔ)性支撐作用[1]。植物組培苗煉苗移栽生根是關(guān)系到工廠化育苗成敗的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其技術(shù)也不斷進步革新。在生產(chǎn)實踐中，除了常規(guī)培養(yǎng)操作和應(yīng)用現(xiàn)代溫室、農(nóng)業(yè)工程自控技術(shù)外，對于難生根的木本植物組培苗，生根率低、組培苗成活率低是重要制約因素[2]。近年來，土壤微生物學(xué)發(fā)展迅速，針對生根難問題，促進植物生長的根際促生菌不斷得到分離、鑒定、培養(yǎng)和應(yīng)用。其中對植物有保護和促生作用的根際促生菌——熒光假單胞菌“營廣寶”近年來得到實際應(yīng)用，該菌劑能夠保護植物根系免受其他菌類危害，促進植物生長和根系更好發(fā)育[3,4]。

在傳統(tǒng)植物組織培養(yǎng)生根煉苗移栽中，主要依靠保濕煉苗，很少考慮基質(zhì)問題、氣體環(huán)境和光照問題。濕度提高后，基質(zhì)菌類滋生，氣體環(huán)境惡化，組培苗氣孔功能差，加上光照控制不當(dāng)，造成爛根、枯萎、灼傷[5]。近年來二氧化碳捕集劑技術(shù)迅速發(fā)展，引起世界研究熱潮[6]，噴施以小球藻為核心的生物制劑有利于植物莖葉捕集空氣中的二氧化碳，提高單位濃度，進而提高光合效率[7]?；诠S化育苗的三大核心問題，筆者在河北楊植物組織培養(yǎng)苗工廠化微枝生根煉苗移栽育苗實踐中，總結(jié)出利用頂端優(yōu)勢、微生物促生、光合作用原理三者結(jié)合的試管外生根育苗集成技術(shù)，提高了生根率和成苗率，達到了降本增效的目的，該技術(shù)關(guān)鍵步驟有組培苗微枝打頂促莖閉瓶煉苗、根際促生菌蘸根和二氧化碳捕集劑噴施培養(yǎng)等。具體操作總結(jié)如下，僅供廣大組培種苗業(yè)同行們參考。

1 河北楊組培苗微枝打頂促莖閉瓶煉苗

在河北楊組培苗微枝繁殖到一定基數(shù)快出苗時，在超凈臺上，將頂芽（3節(jié)）單獨切取后，余下枝段每隔2～3個葉片剪取作為插段，接種在生根出苗培養(yǎng)基（1/2MS+IBA 0.5mg/mL+蔗糖15g/L+瓊脂5%，pH6.0）上。此時將生根處理組培苗轉(zhuǎn)移到煉苗環(huán)境中邊煉苗邊培養(yǎng)，最好換用透氣蓋培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度23～25℃，光照12h/d，在10d內(nèi)，逐步加強光照，直至移到光照強度達8 000lx的培養(yǎng)架進行培養(yǎng)。等到新頂芽形成，莖干粗壯，葉片加厚，顏色濃綠，苗木健壯整齊時打開瓶蓋，剪取上部粗壯微枝移入溫室用于生根移栽，而基部留1～2個芽，添加適量無菌培養(yǎng)液繼續(xù)蓋瓶蓋培養(yǎng)，以備下次切取微枝進行移栽生根。

2 河北楊組培苗微枝用根際促生菌蘸根

在適宜林木培養(yǎng)的63#穴盤中裝入丹麥品氏專業(yè)育苗基質(zhì)，以保障無菌、無病蟲害、無雜草種子、無有害礦物質(zhì)，免除使用殺蟲殺菌劑進行基質(zhì)消毒的麻煩和帶來的基質(zhì)污染，以及后期拔除雜草帶來的管理問題，以提高煉苗移栽效率和保障快速生根與根部生長。將高5cm左右的河北楊試管苗微枝，用鑷子輕輕夾取，基部1～2cm速蘸植物促生菌“營廣寶”原液，促進試管苗微枝迅速生根生長和防治其他菌類滋生感染，形成具有保護作用的定植菌和促生菌。再扦插入用63#育苗穴盤裝丹麥品氏育苗基質(zhì)中進行移栽，在智能溫室條件下，相對濕度控制在85%左右，光照控制在1 000lx，溫度控制在25℃左右進行生根培養(yǎng)。

3 河北楊組培苗微枝二氧化碳捕集劑噴施培養(yǎng)

二氧化碳捕集劑促進組培苗光合作用，還可促進河北楊組培苗煉苗移栽，提高組培苗煉苗成活率。移栽完的河北楊組培苗相對濕度保持在85%，噴施1 000倍液二氧化碳捕集劑——光碳核肥，形成河北楊組培苗良好氣體環(huán)境，以后每15d噴施1次，每天早晨通風(fēng)換氣20min。光照從8 000lx逐步提高至15 000lx,加速提高河北楊組培苗微枝光合自養(yǎng)能力，促進生根，形成完整植株。

4 總結(jié)

上述河北楊組培苗微枝打頂促莖閉瓶煉苗，利用頂端優(yōu)勢原理，使組培苗微枝嫩莖得到充分利用，使種苗整齊、健壯利于移栽。河北楊組培苗微枝用根際促生菌蘸根，促生菌保護基部免受雜菌感染和危害，改善根際環(huán)境，分泌生根生長物質(zhì)，促進生根。二氧化碳捕集劑噴施培養(yǎng)，創(chuàng)造高濃度光合環(huán)境，抑制菌類和病蟲害滋生，促進葉片光合作用，利于河北楊組培苗微枝健壯生根和生長。這樣培養(yǎng)的河北楊組培苗猝倒病和根癌病的發(fā)病概率大大降低，實踐中生產(chǎn)河北楊組培苗52萬株，移栽效率提高了45%，平均生根成活率由原來的78%提高到92%，苗木整齊健壯，商品性好。最重要的是全程不使用殺菌殺蟲劑和植物生長調(diào)節(jié)劑，綠色環(huán)保無污染，保護生態(tài)環(huán)境。這種集成技術(shù)操作簡單、實用，是微枝試管外生根煉苗技術(shù)的應(yīng)用與提升，有利于木本植物組培苗微枝外生根煉苗培養(yǎng)，尤其是難煉苗的木本植物，能顯著提高生根煉苗移栽效率和成活率，具有廣闊的應(yīng)用前景。