家蠶雄蛾染色技術研究

張明海 向蘋葦 任杰群 曾新宇 譚立新 鄭章云 邱詩春 楊 義

(重慶三峽農業(yè)科學院，重慶萬州 404155)

蠶種作為蠶桑產業(yè)發(fā)展的基本生產資料，其質量的好壞直接影響蠶繭的品質、產量和農民的收益[1]。而蠶種生產是一項技術處理嚴、受控因素多、生產環(huán)節(jié)多、季節(jié)性強、勞動強度大、生產環(huán)境差、短時間內對勞動力的需求量大的產業(yè)[2-4]。但是，隨著城市化、工業(yè)化的不斷推進，農村勞動力大量向城市轉移[2]，留在農村的以婦女、老人為主，部分蠶種場在制種階段經常出現因為請不到工人削繭、鑒蛹等造成不必要損失的情況，影響了蠶種的正常生產[1]。為了解決蠶種生產用工的難題，各蠶種場采取了繁育斑紋限性品種的措施[2，5]。斑紋限性品種能在蠶期分離雌、雄，雌蠶為普通斑，雄蠶為素蠶[5]，但在制種階段仍存在雌、雄蛾區(qū)分標識不明顯的情況。有學者利用家蠶暗化型灰黑蛾品種與常規(guī)白蛾品種組配新的家蠶品種，交配中黑白分明的蛾色能有效解決蠶種生產多環(huán)節(jié)操作中出現的品種混雜問題[6]。但目前利用家蠶暗化型斑紋育成的現行品種極少，蠶種生產上仍主要依靠肉眼觀察體征識別雌、雄蛾，對于老齡化愈發(fā)嚴重的蠶種從業(yè)人員，理對、拆對速度越來越慢，誤差越來越大，蠶種生產效率極低。雄蛾染色便于肉眼觀察體征識別雌、雄蛾，可保證雜交徹底，確保一代雜交種健康一致[7]。因此，本研究開展了家蠶雄蛾染色試驗，以期為蠶種生產中雄蛾染色技術的推廣應用提供基礎數據和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

試驗時間為2019年8月13日至2019年10月5日，試驗地點為重慶三峽農業(yè)科學院甘寧基地。

1.2 試驗材料

1.2.1 供試蠶種 家蠶原種蘇·菊、明·虎，由重慶市蠶業(yè)科學技術研究院繁育提供。

1.2.2 供試染料 翠綠(綠)色、胭脂(紅)色復配食品添加劑，天津多福源實業(yè)有限公司產品，市售。

1.2.3 主要儀器設備 手持式0.8 L氣壓噴霧器，臺州市砂源花噴霧器有限公司生產，市售；機械冷庫，重慶三峽農業(yè)科學院甘寧基地。

1.3 試驗方法

1.3.1 雄蛾染色 取綠色和紅色染料各15 g，分別置于噴霧器中，加少量(1/4)熱水反復搖動至完全溶解，加水至刻度線，加壓后調試噴嘴至噴成霧狀。染色在雄發(fā)蛾室外進行，先將捉取的雄蛾適當收攏，用噴霧器來回噴霧3～4次，至所有蛾子都有色素附著，放置10 min后送至交配室進行配對(圖1)。

圖1 家蠶雄蛾染色配對情況(左圖為雄蛾染紅色，右圖為雄蛾染綠色)

1.3.2 雄蛾染色對理對、拆對的影響調查 盛發(fā)蛾日進行雄蛾染色，分別隨機指定3個染色區(qū)為試驗區(qū)、3個未染色區(qū)為對照區(qū)；抽取4名技術水平相當的同志為理對、拆對操作人員。在交配環(huán)節(jié)調查各區(qū)理對用時，在拆對環(huán)節(jié)調查各區(qū)拆對用時、雌蛾中混雜的雄蛾個數、雄蛾中混雜的雌蛾個數，計算理對速度、拆對速度、拆對誤差率。

1.3.3 雄蛾染色對雄蛾耐貯藏能力的影響調查 盛發(fā)蛾日進行雄蛾染色，從蘇·菊和明·虎2個品種的鮮蛾和一交蛾中分別抽取染色和未染色雄蛾，分別置于地下室(20 ℃)、冷庫(5 ℃)貯藏；每個處理3個重復，每個重復200頭雄蛾，24 h后調查雄蛾成活數、死亡數。對不同品種(蘇·菊、明·虎)、是否鮮蛾(是為鮮蛾、否為一交蛾)、溫度高低(20 ℃、5 ℃)、是否染色等4個自變量和雄蛾死亡率1個因變量進行多元線性回歸分析，分析各因素對雄蛾耐貯藏能力的影響大小。

1.4 數據處理與分析

數據處理與統計分析采用SPSS 16.0軟件進行。

2 結果與分析

2.1 雄蛾染色對理對、拆對速度的影響

從雄蛾染色的理對、拆對速度方差分析(表1)可以看出，蘇·菊染色處理與未染色處理間理對速度t=3.933>t0.05=2.776、拆對速度t=4.056>t0.05=2.776，明·虎染色處理與未染色處理間理對速度t=3.322>t0.05=2.776、拆對速度t=5.611>t0.05=2.776，說明家蠶蘇·菊、明·虎雄蛾染色后理對速度、拆對速度在P<0.05水平上與未染色均存在顯著差異，雄蛾染色后的理對速度蘇·菊較未染色提高了18.52%、明·虎較未染色提高了18.03%，雄蛾染色后的拆對速度蘇·菊較未染色提高了23.08%、明·虎較未染色提高了22.22%。

表1 雄蛾染色的理對、拆對速度方差分析

2.2 雄蛾染色對拆對誤差率的影響

從表2可以看出，雄蛾染色后，蘇·菊的拆對誤差率降低了3.63個百分點，明·虎的拆對誤差率降低了7.52個百分點，蘇·菊的拆對誤差率|t|=14.742>t0.05=2.776，明·虎的拆對誤差率|t|=60.664>t0.05=2.776，說明家蠶蘇·菊、明·虎雄蛾染色后拆對誤差率在P<0.05水平上與未染色均存在顯著差異。

表2 雄蛾染色的拆對誤差率方差分析

2.3 雄蛾染色對雄蛾耐貯藏能力的影響

選取不同品種、是否鮮蛾、溫度高低和是否染色為自變量，雄蛾死亡率為因變量進行多元線性回歸分析，結果如表3所示。以進入概率小于0.05、移出概率大于0.10為準則，采用逐步法建立多元線性回歸模型，結果如表4所示。從表4可以看出：隨著逐步法的推進，已排除的變量逐漸減少；在模型4中僅剩是否染色，根據t檢驗的結果顯示，是否染色對雄蛾死亡率的Sig=0.524>0.05，說明是否染色對雄蛾死亡率的影響不顯著，即雄蛾染色對雄蛾耐貯藏能力影響不顯著。因此，是否染色被排除，不在模型中體現。

表3 不同因素下的雄蛾死亡率

表4 已排除的變量

以Y表示雄蛾死亡率，X1表示溫度，X2表示是否鮮蛾，X3表示品種，則回歸方程為Y=a0+a1×X1+a2×X2+a3×X3。其中a0為回歸模型的常數項，a1～a3為回歸模型對應自變量的偏回歸系數項。模型匯總結果如表5所示，隨著模型的逐步遞進，R2逐漸增大，模型3中的調整后R2=0.764，可較好地擬合回歸方程；隨著模型的逐步遞進，標準估算誤差越來越小，說明模型用來預測因變量的準確度越來越高。回歸模型的方差分析結果如表6所示，在模型3中，回歸模型的Sig=0.000<0.01，說明模型3中回歸方程因變量與各自變量之間的相關性非常顯著，因變量與各自變量之間的擬合程度較好。自變量多元線性回歸分析系數如表7所示。在模型3中，3個自變量的Sig均小于0.05，說明因變量與各自變量之間的相關性顯著，擬合得到多元線性回歸方程為Y=6.910+1.106X1-7.917X2-5.208X3。如方程所示，自變量變化1個單元后，是否鮮蛾對雄蛾死亡率的影響最大，然后依次為品種、溫度，即各因素對雄蛾耐貯藏能力的影響大小依次為是否鮮蛾>品種>溫度。

表5 模型匯總結果

表6 回歸模型的方差分析結果

表7 自變量多元線性回歸分析系數

3 小結與討論

在家蠶制種階段進行雄蛾染色，蘇·菊、明·虎理對速度較未染色分別提高18.52%、18.03%，蘇·菊、明·虎拆對速度較未染色分別提高23.08%、22.22%。蘇·菊的拆對誤差率從4.45%降至0.82%，降低了3.63個百分點；明·虎的拆對誤差率從8.19%降至0.67%，降低了7.52個百分點；這說明在家蠶制種階段進行雄蛾染色，能顯著提高理對、拆對速度，降低拆對誤差率。采用多元線性回歸分析雄蛾染色各因素對雄蛾耐貯藏能力的影響發(fā)現：是否染色對雄蛾耐貯藏能力的影響不顯著；以Y表示雄蛾死亡率，X1表示溫度，X2表示是否鮮蛾，X3表示品種，擬合得到多元線性回歸方程Y=6.910+1.106X1-7.917X2-5.208X3，即各因素對雄蛾耐貯藏能力的影響大小依次為是否鮮蛾>品種>溫度。

目前探討家蠶雄蛾染色的研究相對較少，僅有報道雄蛾染色技術的具體步驟[7]，而很少見家蠶雄蛾染色對雄蛾耐貯藏能力的影響方面的報道。為了解雄蛾染色與雄蛾耐貯藏能力的相關性，我們通過對2個主要家蠶品種在不同條件下進行雄蛾染色，發(fā)現雄蛾染色對雄蛾耐貯藏能力的影響不顯著，一交蛾死亡率大于鮮蛾，雄蛾冷藏對雄蛾耐貯藏能力影響顯著，生產中應留足雄蛾，盡量避免冷藏；但雄蛾染色、冷藏是否對蠶種質量有影響還需要作進一步研究。

本試驗調查對象僅限于重慶三峽農業(yè)科學院繁育的2個主要家蠶品種，但我國家蠶品種豐富，各地家蠶品種不盡相同，其他家蠶品種雄蛾染色與耐貯藏能力的關系需要通過調查才能確定。今后，我們將收集更多的家蠶品種，開展類似的調查研究，以期為家蠶雄蛾染色技術提供更多更有效的理論依據。