鄭從坤
(湖南省耒陽(yáng)市三都鎮(zhèn)畜牧水產(chǎn)站,湖南耒陽(yáng)421800)
豬繁殖呼吸障礙病毒又稱為豬藍(lán)耳病毒(PRRSV),其感染仔豬和保育豬可導(dǎo)致患畜出現(xiàn)明顯的呼吸癥狀,感染母豬則出現(xiàn)繁殖障礙性疾病[1]。豬圓環(huán)病毒病又稱為皮炎腎病綜合征,由圓環(huán)病毒2 型(PCV2)感染所引起,引起仔豬出現(xiàn)呼吸癥狀、腹瀉和皮炎等,同時(shí)可導(dǎo)致母豬出現(xiàn)繁殖障礙[2]。PCV2 和PRRSV 均為重要的免疫抑制性病毒,豬群感染這兩種病原后不但會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀,病豬先天性免疫和獲得性免疫性能也受到抑制,導(dǎo)致其更容易受到其它病原感染,繼發(fā)其它疫病往往導(dǎo)致病畜死亡[3-4]。
豬鏈球菌(SS)在豬場(chǎng)無(wú)處不在,但該病原為機(jī)會(huì)性致病菌,豬群被感染后不表現(xiàn)明顯臨床癥狀,豬群一般為隱性感染,當(dāng)豬群免疫力下降時(shí),豬鏈球菌可導(dǎo)致患畜出現(xiàn)敗血癥、腦膜炎和關(guān)節(jié)炎等,甚至豬鏈球菌2 型可感染人,對(duì)人畜健康造成巨大的威脅[5-6]。在小型養(yǎng)殖場(chǎng)或散養(yǎng)場(chǎng)中,由于某些豬場(chǎng)飼養(yǎng)水平較低,豬群受到多種病原威脅,導(dǎo)致多病原混合感染現(xiàn)象較為常見(jiàn),但混合感染較為復(fù)雜,導(dǎo)致傳統(tǒng)的臨床和病理診斷較為困難,誤診或少診往往延誤病情,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本文以一例保育豬PRRSV、PCV2 和SS 混合感染為例,對(duì)其診斷與治療過(guò)程進(jìn)行闡述,旨在為該類(lèi)病原混合感染疫病的防控提供借鑒。
2019 年10 月初,耒陽(yáng)市三都鎮(zhèn)畜牧水產(chǎn)站接到當(dāng)?shù)啬池i場(chǎng)保育豬發(fā)病情況報(bào)告后,特派本人前往現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查情況。該場(chǎng)為小型散養(yǎng)場(chǎng),從外地購(gòu)買(mǎi)仔豬(24 日齡)進(jìn)行育肥,在購(gòu)入仔豬后1 周左右,部分豬群開(kāi)始發(fā)病,其主要臨床癥狀包括消瘦、皮毛雜亂、咳嗽、腹瀉等,少部分發(fā)病豬四肢關(guān)節(jié)腫大或耳廓發(fā)紫。出現(xiàn)疫情后,養(yǎng)殖戶對(duì)全部豬群進(jìn)行抗生素用藥,其中包括阿莫西林和青霉素,但效果不好。
將死亡不久的病豬進(jìn)行剖檢,病變明顯的器官主要是肺臟、腎臟和淋巴結(jié)等,其中肺臟有明顯充血,呈現(xiàn)彌漫間質(zhì)性肺炎癥狀,腹腔內(nèi)有大量積液,腎臟表明有大量的針尖狀出血點(diǎn),關(guān)節(jié)腔內(nèi)有清亮的積液,此外,病豬全身性淋巴結(jié)(腹股溝淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)和腸淋巴結(jié)等)均不同程度的充血或腫大,而其它器官出血病變較輕微。
經(jīng)過(guò)初步臨床診斷,筆者判定為藍(lán)耳病毒、圓環(huán)病毒和其它病原混合感染,確診還需要進(jìn)一步試驗(yàn)室診斷。
無(wú)菌采集病豬病變明顯的腹股溝淋巴結(jié)、肺臟、脾臟和腎臟等組織,剪取少量組織混合,與適量生理鹽水混合,充分研磨后,反復(fù)凍融促進(jìn)病毒從組織中釋放到上清,其后高速離心,取上清。
用商品化試劑盒提取組織上清核酸(RNA 和DNA)。對(duì)于DNA 病毒(PCV2 和豬偽狂犬病毒(PRV)檢測(cè),可直接以提取核酸作為模板,按照相應(yīng)病原檢測(cè)說(shuō)明書(shū)對(duì)進(jìn)行操作,對(duì)于RNA 病毒(PRRSV、豬流行性腹瀉(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬瘟病毒(CSFV))的檢測(cè),則需要將核酸樣品中RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA 后,再根據(jù)相應(yīng)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。最后檢測(cè)結(jié)果顯示,樣品為PCV2 和PRRSV 混合感染。
將組織切開(kāi),用接種環(huán)蘸取少量組織液在鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面進(jìn)行劃線,其后將培養(yǎng)基置于37℃培養(yǎng)箱內(nèi),36 h 后觀察培養(yǎng)基表面是否存在菌株,并通過(guò)革蘭氏染色法對(duì)菌株形態(tài)學(xué)進(jìn)行初步鑒定。結(jié)果顯示,菌株在鮮血培養(yǎng)基表面以成對(duì)排列,為圓形隆起,呈針尖狀,此外,菌落周?chē)纬赏该鞯娜苎?。進(jìn)一步革蘭氏染色鑒定結(jié)果顯示菌株為革蘭氏陽(yáng)性菌,為鏈狀。進(jìn)一步藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明菌株對(duì)恩諾沙星、氟苯尼考、氧氟沙星等抗生素敏感,對(duì)環(huán)丙沙星、阿莫西林、鏈霉素和林可霉素和復(fù)方新諾明等耐藥。
結(jié)合臨床與實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果,可以確診本案例中保育豬發(fā)病由PRRSV、PCV2 和豬鏈球菌混合感染所致。
基于以上檢測(cè)結(jié)果,我們采取以下緊急措施:對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行消毒,在飼料中添加適量的黃芪多糖,飲水中加多維,降低豬群的應(yīng)激;對(duì)未發(fā)病豬群緊急免疫接種PRRSV 和PCV2 弱毒疫苗;對(duì)全場(chǎng)豬群肌肉注射氟苯尼考(20 mg/kg·d),連續(xù)用藥3d。實(shí)施以上緊急措施后,豬群發(fā)病情況得到有效控制,生產(chǎn)成績(jī)提高。
在生豬養(yǎng)殖過(guò)程中,特別是在某些飼養(yǎng)條件較差的散養(yǎng)場(chǎng)或小型養(yǎng)殖場(chǎng)中,豬多種病原混合感染現(xiàn)象較為常見(jiàn)。對(duì)于該類(lèi)疫病的診斷依靠養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)或者臨床診斷往往不可靠,需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷,只有確診發(fā)病原因后才能針對(duì)性進(jìn)行治療,最終減少養(yǎng)殖企業(yè)(戶)的經(jīng)濟(jì)損失。而對(duì)該類(lèi)疫病的防控主要是杜絕病原進(jìn)入豬場(chǎng),即在外購(gòu)仔豬或引進(jìn)種豬時(shí)加強(qiáng)對(duì)病原的監(jiān)測(cè),在養(yǎng)殖過(guò)程中加強(qiáng)衛(wèi)生管理,提高豬群的免疫性能,定期對(duì)豬群實(shí)施免疫接種相應(yīng)疫苗等。