干擾素在獸醫(yī)臨床上的科學(xué)應(yīng)用

萬(wàn)遂如

（中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)，吉林 長(zhǎng)春 130122）

干擾素（IFN）是干擾素誘生劑作用于有關(guān)生物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類具有高度生物學(xué)活性、多功能的小分子糖蛋白，由于它們能干擾病毒RNA和DNA的合成而抑制病毒的復(fù)制，故稱之為干擾素（抗病毒蛋白）。干擾素是細(xì)胞因子中的一個(gè)家族，目前已發(fā)現(xiàn)有20多種干擾素家族的細(xì)胞因子。干擾素?zé)o抗原性，不被免疫血清中和，也不被核酸酶滅活，具有抗病毒、抗細(xì)胞增殖與分化、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等作用。本文就當(dāng)前畜牧業(yè)生產(chǎn)中禁止濫用抗生素，保障動(dòng)物性食品安全、公共衛(wèi)生安全和生態(tài)環(huán)境安全，促進(jìn)健康養(yǎng)殖的持續(xù)發(fā)展，替代抗生素，在獸醫(yī)臨床上如何科學(xué)應(yīng)用干擾素問(wèn)題，談點(diǎn)個(gè)人意見，僅供參考。

1 干擾素的分類

1980年國(guó)際干擾素命名委員會(huì)建議將各種干擾素先根據(jù)動(dòng)物的來(lái)源確定分類系統(tǒng)，再按干擾素的抗原特異性和分子結(jié)構(gòu)分成不同的型別。哺乳動(dòng)物的干擾素分為兩類：Ⅰ型干擾素和Ⅱ型干擾素。Ⅰ型干擾素（耐酸型）主要包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-К、IFN-ξ、IFN-δ等類型。主要是由單核-巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的，在耐酸環(huán)境中穩(wěn)定。IFN-α和IFN-β二者結(jié)合相同的受體，分布較為廣泛，包括單核-巨噬細(xì)胞、多形核白細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞、血小板、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。Ⅱ型干擾素即IFN-γ（酸敏感型），主要是由T淋巴細(xì)胞受到有絲分裂原或特異抗原刺激所產(chǎn)生，自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）也可產(chǎn)生，對(duì)酸不穩(wěn)定，結(jié)合的受體與Ⅰ型干擾素不同，但I(xiàn)FN-γ的免疫刺激活性在兩類干擾素中最強(qiáng)。

干擾素也可通過(guò)大腸埃希菌屬及酵母菌基因工程重組（recombinant）而得到基因工程干擾素。目前獸醫(yī)臨床上使用的干擾素就有家禽基因干擾素、豬基因工程干擾素、?；蚬こ谈蓴_素、犬基因工程干擾素等。

2 干擾素的理化性質(zhì)

干擾素為糖蛋白，除有蛋白質(zhì)外，還含有1.6%碳水化合物和2.4%己糖胺。其蛋白質(zhì)是由數(shù)個(gè)不同基因編碼的不同多肽組成的，分子量為15 000～22 000道爾頓，基因結(jié)構(gòu)大約為1 000個(gè)核苷酸，結(jié)構(gòu)基因編碼146～166個(gè)氨基酸序列，含有17種以上的氨基酸，其中的天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸含量較高，不含核酸，所以不會(huì)被DNA酶與RNA酶破壞，但對(duì)蛋白酶較敏感。其余的序列為非編碼序列。干擾素對(duì)熱穩(wěn)定，4 ℃可保存很長(zhǎng)時(shí)間，-20 ℃可長(zhǎng)期保存其活性，56 ℃下30分鐘可被滅活。pH 2～10范圍內(nèi)干擾素不被破壞，α及β干擾素在pH為2穩(wěn)定，γ干擾素在pH為2不穩(wěn)定。

3 干擾素的作用

干擾素是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過(guò)細(xì)胞表面受體作用，使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白（AVP），抑制病毒的復(fù)制。正常細(xì)胞表面有干擾素的特異性受體系統(tǒng)，IFN-α及IFN-β的結(jié)合在同一受體可以相互競(jìng)爭(zhēng)，IFN-γ有單獨(dú)的受體。干擾素對(duì)細(xì)胞表面的干擾素受體有高度親和力，它與受體相互作用可激發(fā)細(xì)胞合成新的mRNA，產(chǎn)生多種效應(yīng)蛋白，同時(shí)又可增強(qiáng)NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞的活力，從而發(fā)揮抑制病毒繁殖與復(fù)制、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用。干擾素不具有特異性，即由一種病毒所誘發(fā)產(chǎn)生的干擾素具有抵御多種病毒甚至其他細(xì)胞內(nèi)寄生的病原微生物的能力。干擾素的作用表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。

3.1 抗病毒作用

干擾素具有廣譜抗病毒活性，對(duì)多種DNA病毒和RNA病毒均有抑制作用。表現(xiàn)在：一是干擾素受體內(nèi)的“抗病毒蛋白”基因受到干擾素作用后被活化，產(chǎn)生抗病毒蛋白可阻止病毒mRNA翻譯并促進(jìn)病毒mRNA降解；二是Ⅰ型干擾素作用于病毒感染的細(xì)胞膜上的受體，促進(jìn)細(xì)胞表面MHC-Ⅰ類（主要組織相容性抗原復(fù)合物Ⅰ）分子的表達(dá)水平，有助于受病毒感染的細(xì)胞向Tc淋巴細(xì)胞亞群呈遞抗原，引起靶細(xì)胞的溶解；三是Ⅱ型干擾素可活化NK細(xì)胞，增強(qiáng)其對(duì)病毒感染細(xì)胞的殺傷能力。

3.2 抗腫瘤作用

Ⅰ型干擾素能抑制細(xì)胞的DNA合成、減慢細(xì)胞的有絲分裂速度。這種抑制作用有明顯的選擇性，對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用比對(duì)正常細(xì)胞的抑制作用要強(qiáng)500～1 000倍。干擾素主要是影響細(xì)胞分裂的G1至G2期的DNA復(fù)制并改變腫瘤細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)和腫瘤原性，從而對(duì)腫瘤細(xì)胞有去惡化作用。Ⅱ型干擾素的免疫調(diào)節(jié)作用，可增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)病毒感染的殺傷能力和對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視功能。

3.3 免疫調(diào)節(jié)作用

Ⅱ型干擾素可使巨噬細(xì)胞表面MHC-Ⅱ類分子的表達(dá)增加，提高其抗原呈遞能力，同時(shí)還可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞表面Fc受體表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫復(fù)合物對(duì)抗體包被的病原體和腫瘤細(xì)胞的殺傷能力；還可通過(guò)誘導(dǎo)NK前體細(xì)胞分化為效應(yīng)型NK細(xì)胞及活化NK細(xì)胞兩個(gè)途徑，增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)病毒感染細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。干擾素對(duì)淋巴細(xì)胞的作用較為復(fù)雜。用低劑量干擾素或在抗原致敏之后（免疫反應(yīng)后期）加入干擾素，可促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，增強(qiáng)T細(xì)胞的功能，增強(qiáng)細(xì)胞免疫與體液免疫的作用。若干擾素濃度過(guò)高或在抗原致敏之前（免疫反應(yīng)早期）使用干擾素，則會(huì)表現(xiàn)出對(duì)細(xì)胞免疫和體液免疫的抑制作用。其原因可能為高濃度的干擾素在免疫應(yīng)答反應(yīng)的早期抑制淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育之故。

3.4 干擾素的毒副作用

長(zhǎng)期大劑量使用干擾素，可出現(xiàn)疲乏、無(wú)力、胃腸道不適、中等程度發(fā)熱及肝功能異常等。偶爾出現(xiàn)白細(xì)胞與血小板減少，可能與干擾素抑制造血細(xì)胞的分裂有關(guān)。

4 干擾素在獸醫(yī)臨床上的科學(xué)應(yīng)用

崔尚金研究員（2011）報(bào)道，用重組豬干擾素防治溫和型豬瘟、藍(lán)耳病、豬偽狂犬病、圓環(huán)病毒2型感染、豬流感、水皰病、流行性腹瀉、傳染性胃腸炎、輪狀病毒病、口蹄疫及病毒與細(xì)菌共感染或繼發(fā)感染，早期應(yīng)用防治效果良好。郭定宗、祝海寶（2006）應(yīng)用大連三儀集團(tuán)研發(fā)的重組豬干擾素治療豬瘟的治愈率達(dá)65.3%、豬流感治愈率達(dá)98.9%、豬病毒性腹瀉治愈率達(dá)100%、羔羊腹瀉治愈率達(dá)95.3%、小鵝瘟治愈率達(dá)75.4%。用三儀集團(tuán)研發(fā)的重組家禽干擾素用于防治雞傳染性支氣管炎、雞傳染性喉氣管炎、傳染性法氏囊病、馬立克氏病、傳染性貧血、雞白血病、新城疫、呼腸孤病毒病及雞球蟲病等已取得良好的臨床效果，受到廣大養(yǎng)雞場(chǎng)的一致好評(píng)。同時(shí)，用干擾素防治奶牛病毒性腹瀉與乳房炎、犬細(xì)小病毒病、偽狂犬病、弓形蟲病、血吸蟲病、瘧疾原蟲病及利什曼原蟲病、雞球蟲病等也取得了良好的臨床效果。汪恭富等（2006）應(yīng)用重組干擾素對(duì)犬冠狀病毒病、犬細(xì)小病毒病、犬瘟熱及犬傳染性肝炎等疫病進(jìn)行治療，通過(guò)跟蹤調(diào)查，證實(shí)了干擾素治療犬的病毒性疾病具有良好的臨床效果。目前獸醫(yī)臨床上常用具有代表性的預(yù)防與治療方案簡(jiǎn)介如下，供參考選用。

4.1 保健預(yù)防方案

方案1：銀翹散（金銀花、連翹、甘草、荊芥、桔梗、淡竹葉等）1 000克、干擾素800克、轉(zhuǎn)移因子400克、溶菌酶400克，拌料1噸，連續(xù)飼喂7～12天。

方案2：小柴胡散（柴胡、黃芩、黨參、半夏、甘草等）600克、干擾素800克、免疫核糖核酸600克、細(xì)菌素400克，拌料1噸，連續(xù)飼喂7～12天。

方案3：仙方活命三連散（板蘭根、大青葉、白芷、紫花地丁、蒲公英等）1 000克、干擾素800克、免疫球蛋白600克、細(xì)菌素400克，拌料1噸，連續(xù)飼喂7～12天。

方案4：香菇多糖粉1 200克、干擾素800克、白細(xì)胞介素-4（400克）、抗菌肽400克，拌料1噸，連續(xù)飼喂7～12天。

方案5：荊防敗毒散（荊芥、防風(fēng)、羌活、獨(dú)活、柴胡、前胡、枳殼、茯苓、桔梗、川芎、薄荷、甘草等）300克、干擾素600克、白細(xì)胞介素-2（400克）、抗菌肽400克，對(duì)水1噸，連續(xù)飲用7～12天。

根據(jù)當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病流行規(guī)律、場(chǎng)內(nèi)動(dòng)物的健康狀況與不同的生產(chǎn)階段，結(jié)合實(shí)際選用上述相應(yīng)功能的方案實(shí)施保健預(yù)防，可有效預(yù)防病毒性、細(xì)菌性、寄生蟲及多種病原體共感染或繼發(fā)感染的疫病，一年四季均可使用，預(yù)防效果尚佳。

4.2 治療方案

方案1：清開靈注射液（金銀花、板蘭根、牛黃、水牛角、黃芪、珍珠母、梔子等），小動(dòng)物每次每頭10毫升、中等動(dòng)物15毫升、大動(dòng)物20毫升，干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），白細(xì)胞介素-4（每千克體重0.2毫升），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4次。

方案2：大敗毒注射液（連翹、紫花地丁、板蘭根、白芷、蒲公英等）每千克體重0.1毫升，干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），轉(zhuǎn)移因子（每40千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注長(zhǎng)效多西環(huán)素注射液，每千克體重0.2毫升，每2日1次，連用2次。

方案3：雙黃連注射液（每千克體重0.2毫升）、干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量）、白細(xì)胞介素-2（每千克體重0.2毫升），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注30%氟苯尼考注射液，每千克體重0.1毫升，每日1次，連用4次。

方案4：復(fù)方板蘭根注射液（每千克體重1毫升）或者復(fù)方柴胡注射液（每千克體重0.2毫升）、干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），高免球蛋白（每50千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注頭孢噻呋鈉（每千克體重5毫克），每日1次，連用4次。

方案5：穿心蓮注射液（每千克體重0.2毫升）或者大青葉注射液（每千克體重0.2毫升），干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），免疫核糖核酸（每70千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注頭孢拉定（每千克體重5毫克），每日1次，連用4次。

方案6：黃芪多糖注射液（每千克體重0.2毫升）或者靈芝多糖注射液（每千克體重0.1毫升），干擾素（每40千克體重1毫升，重癥可加量），轉(zhuǎn)移因子（每40千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注泰拉菌素（瑞可欣）每40千克體重1毫升，每2日1次，連用2次。

方案7：復(fù)方魚腥草注射液（每次5～20毫升）或者銀黃注射液（金銀花、黃芩等），每千克體重0.1毫升，干擾素（每40千克體重1毫升），免疫核糖核酸（每70千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用3～4次；同時(shí)肌注抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4次。

方案8：支持療法。10%葡萄糖鹽水300～500毫升，10%樟腦磺酸鈉10毫升，25%維生素C 5～8毫升，混合靜脈注射，每日1次，連用2～3次。同時(shí)飲用電解質(zhì)多維800克、黃芪多糖粉800克、溶菌酶400克，對(duì)水1噸，連續(xù)飲用7天。

以上治療方案可用于動(dòng)物急性呼吸道疾病、消化系統(tǒng)疾病、免疫抑制性疾病、繁殖障礙性疾病以及常見多發(fā)的急性傳染性疾病的治療。要結(jié)合養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物發(fā)病狀況與臨床特征、流行特點(diǎn)綜合診斷，選用適宜功能的方案實(shí)施對(duì)癥治療，均可取得良好的臨床治療效果。

5 使用干擾素制劑的注意事項(xiàng)

5.1 稀釋干擾素制劑要用滅菌注射用水或生理鹽水，不要使用酸堿性溶液或葡萄糖鹽水作稀釋劑，否則影響其生物活性而失效。

5.2 制劑啟用后按規(guī)定的時(shí)間內(nèi)一次用完，以免失效。融化后不要再進(jìn)行冰凍，可放于4 ℃冰箱中保存，3天之內(nèi)用完。

5.3 干擾素制劑一般肌肉注射；飲水口服給藥，水溫不要超過(guò)30 ℃。

5.4 干擾素制劑在臨床上可與轉(zhuǎn)移因子、白細(xì)胞介素、免疫核糖核酸、高免球蛋白等細(xì)胞因子制劑與抗菌肽、溶菌酶、細(xì)菌素等生物獸藥以及中獸藥制劑，比如清開靈、黃芪多糖、大青葉、板蘭根、柴胡、魚腥草、連翹、金銀花、穿心蓮、雙黃連等制劑聯(lián)合使用，混合注射或飲水，不影響防治效果，而且具有協(xié)同作用與促進(jìn)作用，增強(qiáng)其藥效，可提高防治效果。也可配合某些抗生素使用，但不能混合注射，要分別肌注。

5.5 由于干擾素能抑制病毒復(fù)制與繁殖，因此動(dòng)物使用干擾素制劑后，96小時(shí)內(nèi)不要給動(dòng)物接種弱毒活疫苗，以免影響疫苗的免疫效果。滅活疫苗（死疫苗）可與干擾素制劑同時(shí)使用，但不要混合注射，分別肌注不會(huì)影響疫苗的免疫效果。

5.6 干擾素雖然具有廣譜的抗病毒作用，但又具有相對(duì)的種屬特異性，一般在同種細(xì)胞中生物活性最高；同時(shí)不同的病毒、同一種病毒的不同血清型對(duì)干擾素的敏感性也不盡相同。因此，臨床上要根據(jù)引發(fā)的動(dòng)物疾病病原體的生物學(xué)特性及發(fā)病的臨床特征和疾病流行特點(diǎn)，有針對(duì)性地選擇使用干擾素制劑，配合優(yōu)質(zhì)的中獸藥制劑、生物獸藥及高效安全的抗生素聯(lián)合使用，防治效果會(huì)更好。

5.7 病原感染動(dòng)物的早期與潛伏期使用干擾素制劑，防治效果更佳。