20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲的室內(nèi)毒力

孫 海，馮 鵬，王俊俠，李云龍，李 錦，胡 彬，王 胤，曹金娟，鄭建秋

（1.北京市植物保護(hù)站，北京 100029；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，北京 100011；3.北京市昌平區(qū)植保植檢站，北京 102200）

辣根素是從辣椒等茄科植物中提取出來的一類次生代謝產(chǎn)物，其主要成分為異硫氰酸酯類化合物（isothiocyanates，簡(jiǎn)稱ITCs），其中含量較高的為烯丙基異硫氰酸酯（allyl isothiocyanate，簡(jiǎn)稱AITC）。由于辣根素生物活性具有廣譜性，引起了諸多學(xué)者的廣泛關(guān)注[1-2]。在國(guó)外有將紅辣椒和芥末提取的混合物用于防治土傳病蟲害的報(bào)道，且有效成分為辣根素、異硫氰酸烯丙酯等。隨著國(guó)內(nèi)保護(hù)地種植年限的增加，根結(jié)線蟲發(fā)生頻率也不斷上升，而且一旦發(fā)生后很難根治，目前有效的防治技術(shù)手段仍是化學(xué)防治，但在綠色和有機(jī)蔬菜種植上缺乏高效防治根結(jié)線蟲的產(chǎn)品。辣根素作為一種植物源農(nóng)藥，不僅可以防治根結(jié)線蟲，還具有廣譜的殺蟲和抑菌活性，其推廣和應(yīng)用對(duì)綠色和有機(jī)蔬菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。20%辣根素水乳劑是由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)的植物源土壤熏蒸藥劑，本文將通過室內(nèi)系統(tǒng)評(píng)價(jià)其對(duì)根結(jié)線蟲的毒力效果，為該藥劑田間防治根結(jié)線蟲的應(yīng)用提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)藥劑

20%辣根素水乳劑由云南聯(lián)創(chuàng)利民生物工程有限公司提供；1.8%阿維菌素乳油由浙江世佳科技有限公司提供。

1.1.2 根結(jié)線蟲卵及二齡幼蟲的制備

從中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)線蟲研究室培養(yǎng)的番茄根部挑取南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita）新鮮卵塊，一部分卵塊用毛筆在無菌水中輕輕打散成卵粒，用于室內(nèi)卵孵化率的離體測(cè)定；另一部分卵塊放在小培養(yǎng)皿（直徑3.5 cm）中的紗網(wǎng)上，再向培養(yǎng)皿中加入少許蒸餾水, 保存在4 ℃冰箱中；卵孵化后取出并放在室溫下，24 h 后收集2 齡幼蟲（J2）， 每天收集1次， 共收集3 d ，配制成幼蟲懸浮液，后將幼蟲懸浮液稀釋至200條/mL，并用于室內(nèi)對(duì)幼蟲致死率的離體測(cè)定。

1.2 室內(nèi)離體測(cè)定

1.2.1 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲幼蟲的致死效果測(cè)定

用無菌水配制20%辣根素水乳劑1 000、2 000、4 000、8 000、10 000、20 000倍液即6個(gè)稀釋濃度（6個(gè)處理），將稀釋液分別加到24孔板中，每個(gè)孔中加入0.5 mL，每個(gè)稀釋濃度加3個(gè)孔，作為3次重復(fù)。1.8%阿維菌素乳油用無菌水稀釋10 000倍，加入24孔板中，作為藥劑對(duì)照。在24孔板中設(shè)置無菌水的空白對(duì)照。將根結(jié)線蟲幼蟲懸浮液加到以上各處理稀釋液中，每個(gè)孔中加入50～80條線蟲。24 h后調(diào)查根結(jié)線蟲幼蟲的死亡數(shù)量，計(jì)算矯正致死率。公式為：死亡率＝死亡線蟲數(shù)/處理線蟲數(shù)×100%；矯正致死率＝（處理死亡率－空白對(duì)照死亡率）/（1－空白對(duì)照死亡率）×100%。

1.2.2 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲卵孵化抑制效果測(cè)定

用無菌水配制20%辣根素水乳劑100、300、500、1 000倍液即4個(gè)稀釋濃度（4個(gè)處理），將稀釋液分別加入到24孔板中，每個(gè)孔中加入0.5 mL，每個(gè)稀釋濃度4個(gè)孔（4次重復(fù)）。1.8%阿維菌素乳油用無菌水稀釋500倍，加入24孔板中，作為藥劑對(duì)照。在24孔板中設(shè)置無菌水的空白對(duì)照。將根結(jié)線蟲卵粒加到以上各處理的稀釋液中，每孔60～80粒。72 h后調(diào)查卵的孵化率，計(jì)算孵化抑制率。公式為：孵化率＝孵化卵數(shù)/處理卵數(shù)×100%；孵化抑制率＝（對(duì)照孵化率–處理孵化率）/對(duì)照孵化率×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

采用SPSS 軟件做DMRT 分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲幼蟲的致死效果

室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果顯示（表1），20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲幼蟲有較強(qiáng)的致死效果；其中，20%辣根素1 000、2 000、4 000倍液處理的矯正致死率均為100%；20%辣根素8 000倍液處理的矯正致死率仍能達(dá)到96.5%，20%辣根素10 000倍液處理時(shí)矯正致死率下降到66.6%，且二者致死效果均低于1.8%阿維菌素乳油10 000倍液處理的100.0%。說明20%辣根素水乳劑稀釋8 000倍以下時(shí)對(duì)南方根結(jié)線蟲幼蟲有較高的致死效果。

表1 20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲幼蟲致死效果

2.2 20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲卵孵化抑制效果

室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果顯示（表2），20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲卵的孵化抑制效果較弱。20%辣根素100倍液處理對(duì)南方根結(jié)線蟲卵的孵化抑制率達(dá)69.5%，20%辣根素300倍液處理對(duì)卵的孵化抑制率顯著下降到38.7%。藥劑對(duì)照1.8%阿維菌素500倍液處理對(duì)南方根結(jié)線蟲卵的孵化抑制率為83.7%，抑制效果顯著高于20%辣根素水乳劑的各個(gè)處理。

3 結(jié)論與討論

由試驗(yàn)結(jié)果可以看出，20%辣根素水乳劑稀釋低于8 000倍液時(shí)對(duì)南方根結(jié)線蟲幼蟲都有較高的毒殺活性，致死率能保持在96.5%以上，10 000倍液時(shí)下降到66.6%；因此，在應(yīng)用20%辣根素水乳劑防治根結(jié)線蟲時(shí)，稀釋倍數(shù)建議不超過8 000倍。20%辣根素水乳劑對(duì)南方根結(jié)線蟲卵的抑制能力很低，100倍液時(shí)對(duì)卵的孵化抑制率為69.5%，500倍液時(shí)僅為26.9%，當(dāng)土壤中根結(jié)線蟲卵塊較多時(shí)， 20%辣根素水乳劑的防治效果會(huì)受到影響，但可通過與藥劑復(fù)配或在生長(zhǎng)期配合使用阿維菌素等藥劑聯(lián)合控制線蟲來提高防治效果。

表2 20%辣根素水乳劑對(duì)根結(jié)線蟲卵的抑制效果 %