有毒中藥鬧羊花的現(xiàn)代研究進展*

郭小紅，馮靖雯，尤 強，陳鴻平，劉友平△

（1.重慶市中醫(yī)院藥劑科，重慶400021；2.成都中醫(yī)藥大學藥學院，四川 成都611137）

鬧羊花為杜鵑花科羊躑躅Rhododendron molleG.Don的干燥花，又名黃杜鵑、羊躑躅花、黃色映山紅等，在我國分布廣泛，特別是南方地區(qū)，具有祛風除濕、散瘀定痛之功效，用于治療風濕痹痛、偏正頭痛、跌撲腫痛、頑癬。古今均認為鬧羊花有大毒，其始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為下品（多為有毒之品），《植物名實圖考》中被列入毒草類，《有毒中草藥大辭典》中被列為有毒麻醉藥，《醫(yī)療用毒性藥品管理辦法》中被列為毒性藥品管理品種，現(xiàn)為2015年版《中國藥典（一部）》10種大毒中藥材之一。由于其毒性劇烈，有效劑量接近中毒劑量，安全窗較窄，導致臨床中毒事件時有發(fā)生，現(xiàn)中醫(yī)臨床已較少應用，造成有毒中藥資源的極度浪費。目前，國內(nèi)外學者對鬧羊花開展了大量研究，主要集中在化學成分、藥理活性、毒性作用等方面。其化學成分主要為二萜類、黃酮類、三萜類、木脂素類，其中二萜類成分被認為是毒性成分，同時也是藥效成分，毒效同源。鬧羊花具有抗炎、鎮(zhèn)痛、麻醉、降血壓、殺蟲、抗病毒、抗癌等藥理活性，但使用不當亦可導致中毒，產(chǎn)生神經(jīng)、心臟、肝腎等毒性，嚴重者可致死[1]。近年來，雖有學者從不同角度對羊躑躅這一植物的現(xiàn)代研究進行了概述[2-3]，但至今對羊躑躅的花（鬧羊花）仍缺乏全面、深入的綜述。為此，查閱中醫(yī)經(jīng)典著作、中國知網(wǎng)、PubMed、SciFinder、Web of Science等數(shù)據(jù)庫，對有關鬧羊花的文獻進行系統(tǒng)綜述，為該藥材的臨床應用、質(zhì)量標準建立及基礎研究提供參考。

1 化學成分

鬧羊花的主要化學成分包括二萜類（1～57）、黃酮類（58～72）、三萜類（73～76）、香豆素類（80）、木脂素類（81）、其他（77～79，82～84），共同構成鬧羊花的藥效物質(zhì)基礎?；瘜W成分見表1。

二萜類：鬧羊花中存在一系列以四環(huán)二萜類為主的二萜類物質(zhì)，為杜鵑花屬特有化學成分類型，該類成分有毒，用之不當易導致中毒，亦是藥效成分。至今，已從鬧羊花中分離得到了57個二萜類化合物，grayanane（1～42）、3，4-seco-grayanane（43～46）、kalmane（47～50）、1，5-seco-kalmane（51～52），rhomollane（53）、dimeric grayanoid（54～57）6種二萜骨架類型，其中以grayanane為主，又分為rhodomolleins、rhodomolin，grayanotoxin，rhodojaponin等亞型，其化學結構見圖1。2017年，ZHOU等[15]從鬧羊花中首次分離出二聚體二萜類化合物birhodomolleins A～C（55～57）。2019年，LI等[13]分離得到羊躑躅素XLⅢ（54），豐富了鬧羊花中二萜類成分的多樣性。鬧羊花中二萜類成分豐富，但含量均很低，其中鬧羊花毒素Ⅱ含量為0.05%～0.13%，產(chǎn)地不同，含量有差異[19]；鬧羊花毒素Ⅲ，Ⅳ含量分別為1.21，1.03 mg/g，鬧羊花毒素Ⅲ含量最高也僅約為0.12%[5]。

黃酮類：黃酮類化合物是天然植物和草本中常見的具有多種藥理活性的成分，在鬧羊花中含量很高，總黃酮含量約占生藥材的8.80%。2005年，王素娟等[17]從鬧羊花中分離得到5個二氫查耳酮化合物（67～71）。2009年，劉有強[16]等分離得到9個黃酮類、黃酮醇類化合物（58～66）。2014年，王璇等[18]分離得到杜荊素（72）。至今，已從鬧羊花的干燥花中分離出15個黃酮類化合物。其結構見圖2。

三萜類：目前，已從鬧羊花中分離出4種三萜類化合物，包括齊墩果烷型、烏蘇烷型。2012年，張枝潤[5]分離出2α，3β，24-trihydroxy urs-12-en-28-oic acid（73）。2014年，王旋等[18]分離出asiatic acid、oleanic acid、2αhydroxy-oleanolic acid（74～76）。其結構見圖3。

其他：鬧羊花中還含有少量香豆素類、木脂素類、甾體類等成分。2012年，張枝潤[5]從鬧羊花中分離出1種香豆素類化合物6，8-dimethoxy coumarin（80），1種木脂素類化合物pinoresinol（81）。2013年，CHEN等[12]分離得到benzyl 2，6-dihydroxyl-benzoate-6-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→3）-β-D-glucopyranoside（78）。2014年，王璇等[18]分離出2E，4Zabscisic acid（77）、dibutyl phthalate（79）、β-sitosterol（82）、steraric acid（83）、benzyl glucoside（84）。其結構見圖4。

2 藥理作用

鬧羊花在我國藥用歷史悠久，有祛風除濕、散瘀定痛之功效，用于治療風濕痹痛、偏正頭痛、跌撲腫痛、頑癬等。大量現(xiàn)代藥理研究表明，鬧羊花具有抗炎、鎮(zhèn)痛、降血壓、抗心律失常、抗病毒、殺蟲等藥理作用，詳見表2。

抗炎作用：鬧羊花作為一種傳統(tǒng)中藥，廣泛用于多種炎性疾病的治療，對風濕性關節(jié)炎、類風濕關節(jié)炎、慢性腎小球腎炎、跌打損傷有很好的臨床療效。ZHOU等[20]采用RAW264.7細胞試驗發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ，2-O-methylrhodomolleinⅪ，6-O-acetylrhodomolleinⅩⅪ有抗炎作用，根據(jù)結構-抗炎活性關系，推測6-OAc基團對抗炎活性至關重要，而14-OAc基團可能導致該成分無抗炎活性[20]。姚禹民等[21]以RAW264.7細胞體外試驗發(fā)現(xiàn)，鬧羊花水煎液、鬧羊花毒素Ⅲ均可抑制白細胞介素（IL）-1β的水平，且體內(nèi)試驗發(fā)現(xiàn)兩者均可顯著降低模型小鼠的耳廓腫脹度，表現(xiàn)出較強的抗炎活性。QIU等[22]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅱ能減弱阿霉素腎病小鼠的腎損傷，其作用機制為下調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1水平，抑制Smad3磷酸化，恢復Smad7水平。

鎮(zhèn)痛作用：鬧羊花古今常作為止痛藥用于各種疼痛。張覃沐[23]研究發(fā)現(xiàn)，木藜蘆毒素Ⅱ的最小有效劑量為0.5 mg/kg。陳錦明等[24]將鬧羊花毒素Ⅱ與哌替啶進行對比發(fā)現(xiàn)，鬧羊花的鎮(zhèn)痛作用較哌替啶更好。WANG等[14]從鬧羊花中分離得到secorhodomollolides A～D，并發(fā)現(xiàn)secorhodomollolides D有鎮(zhèn)痛活性，而其他3種化合物無該活性。LI等[13]采用醋酸扭體試驗法發(fā)現(xiàn)鬧羊花中kalmanol的鎮(zhèn)痛效果最強（0.4 mg/kg時抑制率為34.3%），羊躑躅素XLⅦ、2-O-甲基鬧羊花毒素Ⅵ次之（2 mg/kg時抑制率為46.0%～39.4%），羊躑躅素XLⅣ，XLⅧ，LⅢ，Ⅺ，seco-rhodomollone鎮(zhèn)痛作用最弱（20 mg/kg時抑制率為41.9%～91.6%）。

鎮(zhèn)靜、麻醉作用：鬧羊花是古代蒙汗藥（麻醉藥）之一，我國著名醫(yī)學家發(fā)明的麻沸散中含有鬧羊花，可用于外科手術的麻醉。鬧羊花小劑量有鎮(zhèn)靜催眠作用，大劑量有麻醉作用，鬧羊花作為術前麻醉劑，通常與洋金花進行聯(lián)合麻醉。陳錦明等[24]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅱ有鎮(zhèn)靜、麻醉作用。WANG等[14]研究發(fā)現(xiàn)，secorhodomollolides B，D有鎮(zhèn)靜作用，23 mg/kg劑量下增加入睡率分別為66.7%和100.0%。

表1鬧羊花中已分離鑒定的化學成分

圖1鬧羊花中二萜類化合物化學結構

圖2鬧羊花中黃酮類成分化學結構

圖3鬧羊花中三萜類成分化學結構

降壓作用：1977年版《中國藥典》收載的八里麻毒素（又名鬧羊花毒素Ⅲ）及2種八里麻毒素制劑（八里麻毒素片及八里麻毒素注射液）均有降血壓作用，可用于治療高血壓。樊紅鷹等[35]認為，木藜蘆毒素Ⅱ能抑制整體動物心臟，并通過抑制減壓反射而減慢心率。MAO等[26-27]研究發(fā)現(xiàn)，降低心率是鬧羊花毒素Ⅲ抗高血壓的重要原因。CHEN等[25]研究發(fā)現(xiàn)，20μg/mL鬧羊花乙醇提取物顱內(nèi)注射有顯著的中樞降壓作用，其機制與激活α-adrenergic受體有關。QIU等[22]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅲ能增加心房心室舒張閥，延長心房心室不應期，其降壓機制為降低AngⅡ和增加eNOS。

圖4鬧羊花中其他類成分化學結構

殺蟲作用：鬧羊花作為殺蟲劑在我國南方地區(qū)廣泛使用，對斜紋夜蛾、小菜蛾、致倦庫蚊、柑橘全爪螨等害蟲均有很強的毒殺作用。汪曉紅等[36]發(fā)現(xiàn)，植物源性農(nóng)藥（0.1%鬧羊花毒素，安徽昌山日化有限公司）對防治菜青蟲有很好的作用。ZHONG等[32]對0.1%鬧羊花毒素Ⅲ的進一步研究發(fā)現(xiàn)，其對Pieris rapae（L.）larvae（油菜幼蟲）的不同年齡期的殺蟲效果不等，在96 h時對3，5齡期半數(shù)抑制濃度（IC50）分別為2.84，9.53 mg/L；對3齡期的接觸毒性幾乎是5齡期的30倍。ZHONG等[6]研究發(fā)現(xiàn)，rhodomolins A，B和鬧羊花毒素Ⅰ對Spodoptera frugiperda（sf-9）有細胞毒性，有殺蟲作用。程東美等[31]研究指出，鬧羊花素Ⅲ是通過影響斜紋夜蛾Spodoptera litura離體培養(yǎng)細胞，對Na+和K+吸收迅速，進而產(chǎn)生殺蟲效果。CHENG等[28]體外試驗結果顯示，鬧羊花毒素Ⅲ能強烈抑制Spodoptera frugiperda（Sf-9）細胞增殖，通過誘導細胞內(nèi)Ca2+，pH變化和細胞周期阻滯，在G2/M能干涉細胞周期和增殖抑制。此外，研究還發(fā)現(xiàn)鬧羊花對狹胸散白蟻、東亞飛蝗有殺蟲作用[29-30]。

其他：鬧羊花還有抗病毒、抗腫瘤、正性肌力作用。LI等[33]研究發(fā)現(xiàn)，rhodomollins A，B在體外對A/95e359流感病毒感染的MDCK細胞具有抑制作用，且rhodomollins B的IC50為19.24 mmol/L。姚敏等[37]研究發(fā)現(xiàn)，secorhodomollolide B對Bel-7402肝癌細胞系有細胞毒性，IC50為0.97μmol/L，表明該化合物對腫瘤細胞有顯著的細胞毒性作用。劉慧等[34]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅲ對貓心房肌有正性肌力作用，且對豚鼠心室乳頭肌有濃度依賴性的正性肌力作用，主要是促進鈉-鈣交換電流，而不是增加鈣電流。

“我上一次到訪查謨-克什米爾大君的斯里那加宮殿時， 他們端出了三十個盤子，如果我說任何一個盤子上的寶石都能在市場賣得到一百萬元，恐怕是遠遠低估了這些寶物的美及它所代表的財富。”

表2鬧羊花的藥理作用

表3鬧羊花藥材及化合物的急性毒性

3 毒理作用

3.1 急性毒性

鬧羊花的毒性反應癥狀早在秦漢時期的《本草經(jīng)集注》就有記載“羊誤食其葉，躑躅而死”，躑躅者，以足擊地?，F(xiàn)代大量臨床中毒案例表明，鬧羊花的毒性極大，且中毒潛伏期短，服用0.5 h后即有明顯中毒反應。鬧羊花的毒性反應主要表現(xiàn)為惡心、嘔吐、腹瀉、腹痛，心跳緩慢，血壓下降，動作失調(diào)，呼吸困難，昏迷，病情嚴重者可因呼吸停止而死亡。詳見表3。

SCOTT等[38]研究發(fā)現(xiàn)木藜蘆毒素Ⅰ，Ⅲ的半數(shù)致死濃度（LD50）分別為1.28，0.908 mg/kg，木藜蘆毒素Ⅱ的毒性最小，LD50＞4 mg/kg。HIKINO等[39]測定多種木藜蘆烷型二萜類對Artemia Salina產(chǎn)生痙攣反應效果的半數(shù)有效濃度（ED50），發(fā)現(xiàn)其鬧羊花毒素Ⅲ（0.40μg/mL）、鬧羊花毒素Ⅴ（0.75μg/mL）、木藜蘆毒素Ⅲ（0.84μg/mL）、鬧羊花毒素Ⅵ（1.23μg/mL）、木藜蘆毒素Ⅰ（1.31μg/mL）、鬧 羊 花 毒 素Ⅱ（18.50μg/mL）、木 藜 蘆 毒 素Ⅱ（26.10μg/mL）、鬧羊花毒素Ⅳ（＞100μg/mL），并認為以木藜蘆烷型骨架結構對毒性是必須的，3β-OH、2β，3β-氧環(huán)、6β-OH決定了此類化合物的高毒性；C-2α位無取代，可產(chǎn)生最大毒性。張智等[40]發(fā)現(xiàn)，鬧羊花粉劑的LD50為2.32 g/kg，僅次于斑蝥、蟾酥、馬錢子，鬧羊花的LD50是臨床用量的93倍，安全性最低。岑靖嶼等[41]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花水煎劑的LD50為2.12 g/kg。姚禹民等[21]將鬧羊花水煎劑及鬧羊花水煎劑上大孔樹脂洗脫，結果水洗脫部位、30%乙醇洗脫部位、95%乙醇洗脫部位的LD50均明顯大于鬧羊花毒素Ⅲ，Ⅵ，且以95%乙醇部位（LD50為88.54 mg/kg）毒性最大。

3.2 中毒機制

鬧羊花對多臟器均有毒性，目前已分離鑒定的57種二萜類化合物為毒性物質(zhì)基礎。ZHANG等[42]采用液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）法建立了鬧羊花毒素Ⅲ的檢測方法，并運用于代謝動力學。給小鼠靜脈注射（0.06 mg/kg）或口服（0.24 mg/kg）后，鬧羊花毒素Ⅲ口服吸收快（達到峰值時間0.08 h），口服生物利用度好（73.6%）。此外，經(jīng)靜脈或口服給藥后，鬧羊花毒素Ⅲ迅速消除，半衰期分別為0.19 h和0.76 h。口服后廣泛分布于腎、肺、心、脾、胸腺等組織。

肝腎毒性：張智等[43]給大鼠長期服用鬧羊花粉劑后觀察血液指標變化，發(fā)現(xiàn)鬧羊花能升高血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、血葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）指標，降低膽紅素（BIL）指標，有肝腎功能損傷。姚敏等[44]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花水煎劑會導致血清中ALT明顯升高，肝臟病理切片均有損傷，表現(xiàn)為不同程度肝細胞胞質(zhì)疏松、水樣性、肝組織壞死、細胞浸潤、淤血等，并發(fā)現(xiàn)梔子導致鬧羊花毒性降低。

心臟毒性：姚敏等[37]研究發(fā)現(xiàn)，鬧羊花水提取物液能導致小鼠血清中酪蛋白激酶（CK）值明顯上升，心臟組織勻漿中超氧化物歧化酶活性明顯下降、丙二醛含量明顯升高，表明其對心臟有損傷。劉春霞[45]在臨床使用鬧羊花治療類風濕關節(jié)炎時出現(xiàn)中毒、休克、心律失常，心電圖示竇性心動過緩、交界性自主心律、Ⅱ度竇房傳導阻滯。BAYRAM等[46]發(fā)現(xiàn)，鬧羊花毒素Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ對心肌有明顯損傷，且乳酸脫氫酶（LDH），肌酸激酶同工酶（CK-MB）呈劑量依賴性，導致心房顫動合并緩慢心室呼吸。

神經(jīng)毒性：姚敏等[37]研究發(fā)現(xiàn)，小鼠在灌胃鬧羊花水煎劑后，毒性表現(xiàn)為小鼠呈醉酒狀，四肢不穩(wěn)或異常安靜，翻正反射消失；小劑量時翻正反射能恢復，大劑量時小鼠死亡，其中毒率、翻正反射消失率、死亡率隨著劑量的增加而增高，且翻正反射恢復率與劑量呈反比。KOBAYASHI等[47]發(fā)現(xiàn)，低劑量木藜蘆毒素Ⅰ（1～100μg/kg）能誘發(fā)動物的傳入神經(jīng)、迷走神經(jīng)、肌神經(jīng)、頸神經(jīng)、頸動脈神經(jīng)和皮質(zhì)神經(jīng)產(chǎn)生強烈的突發(fā)效應，同時可特異性地增加心肌、肌梭等部位的神經(jīng)細胞和肌肉細胞靜息膜對Na+的通透性，提高細胞膜內(nèi)Na+濃度，從而影響神經(jīng)沖動傳導，表現(xiàn)為強烈神經(jīng)毒性。KIM等[48]研究發(fā)現(xiàn)，木藜蘆毒素Ⅲ通過增加自發(fā)性γ-氨基丁酸神經(jīng)元和谷氨基酸神經(jīng)元的突觸后電流頻率，增加下丘腦腹內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元遞質(zhì)的釋放，增加Ca2+流入Na+通道，激活下丘腦腹內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元突觸，增加γ-氨基丁酸和谷氨酸釋放，是木藜蘆毒素Ⅲ中毒的根本原因。

4 結語

鬧羊花含有豐富的二萜類、黃酮類、三萜類、木脂素類等，其中二萜類成分被認為是鬧羊花的毒性成分，同時也是主要藥效成分，毒效同源，用量大小決定其是毒還是效，低劑量表現(xiàn)為抗炎、鎮(zhèn)痛、麻醉、殺蟲、降血壓等藥理作用，高劑量表現(xiàn)為神經(jīng)毒性、心臟毒性、肝腎毒性，嚴重者因呼吸衰竭而死亡。

毒性限制其臨床應用：由于其毒性大，2015年版《中國藥典（一部）》限制了其用量用法，用量為0.6～1.5 g，浸酒或入丸散，外用適量，煎水洗。不宜多服、久服；體虛者及孕婦禁用。因其毒性劇烈，限制了其臨床應用，2015年版《中國藥典（一部）》中僅納入2種含有鬧羊花的復方制劑（六味木香散、生發(fā)搽劑）。據(jù)文獻報道，羊躑躅花和果實的毒性大，根和葉的毒性較小，是否能開發(fā)其根和葉，有待進一步研究。因其有殺蟲效果，可作為農(nóng)業(yè)的天然殺蟲劑。

缺乏毒-效的系統(tǒng)研究：雖在化學成分、藥理活性、毒理作用領域?qū)︳[羊花展開了大量研究，但臨床研究和藥代動力學的系統(tǒng)研究還很缺乏，這些領域的補充數(shù)據(jù)對充分了解該植物的藥理作用和潛在應用也非常重要。因此，應進一步加強對其毒理學、臨床研究和藥代動力學的研究。鬧羊花有大毒，毒性成分及其靶器官的研究也應予以重視，尋找潛在的方法來減輕這種植物的毒性也很重要，如配伍減毒、炮制減毒等。

質(zhì)量標準不完善：至今，鬧羊花質(zhì)量標準尚不完善，在2015年版《中國藥典（一部）》10種大毒中藥中，鬧羊花是唯一尚無含量測定、毒性成分限量規(guī)定的大毒中藥。質(zhì)量標準極不完善是導致臨床中毒事件發(fā)生和現(xiàn)臨床避之不用的主要原因之一。因此，有必要對其質(zhì)量標準進行完善，以保證臨床用藥安全、有效。