生物農(nóng)藥與生物質(zhì)發(fā)酵肥對(duì)煙草根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害防控效果研究

黃 坤，余 萍，闕勁松，羅紅梅，劉春明，陳麗華，張紹松*

(1.云南省煙草公司紅河州公司，云南 彌勒 652399；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部西南作物基因資源與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/云南省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650205)

【研究意義】煙草生產(chǎn)過(guò)程中常出現(xiàn)多種病害，根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)(Root-knot nematode)病是最重要病害之一[1]。根據(jù)2002年我國(guó)煙草業(yè)統(tǒng)計(jì)，全國(guó)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害發(fā)生面積為10.83萬(wàn)hm2，直接危害造成的煙葉經(jīng)濟(jì)損失7917.84萬(wàn)元，占侵染性病害所致?lián)p失的5.7 %[2]。該屬的南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)(Meloidogyneincognita)寄主范圍廣[3]。因根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)危害給煙草生產(chǎn)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，防控該病害備受關(guān)注，研究具有安全、環(huán)境友好型、資源良性循環(huán)的高效防控策略和技術(shù)措施，對(duì)增加煙農(nóng)的收入、提升煙葉質(zhì)量和改善生態(tài)環(huán)境均具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)主要危害作物的根部，給防治帶來(lái)困難[4]。早期曾使用溴甲烷[5]、棉隆(Dazomet)[6-7]、涕滅威(Carbanolate,Temik)[8]等對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)進(jìn)行防治，雖效果良好，但這類(lèi)化學(xué)農(nóng)藥對(duì)人、畜和環(huán)境危害大[5-8]，近幾年已禁用或限制使用。應(yīng)用生物農(nóng)藥防控根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害是備受關(guān)注的熱點(diǎn)領(lǐng)域，自發(fā)現(xiàn)阿維菌素 (Avermectins)具有殺線(xiàn)蟲(chóng)活性[9-11]后，近年來(lái)，又發(fā)現(xiàn)生物堿對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)具有毒殺活性[12]。蘇云金芽孢桿菌[13]、厚孢輪枝菌[14]、及淡紫擬青霉[15]等細(xì)菌、放線(xiàn)菌與真菌對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性。利用細(xì)菌、放線(xiàn)菌或真菌的活體細(xì)胞及其代謝產(chǎn)物、植物活性成分進(jìn)行根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害的防控是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)。有關(guān)病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)方面，作者曾開(kāi)展了根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)分離和苗期接種方法的探索[16]；病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的染色方法研究[17]；煙苗移栽初期病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵入寄主根系組織的檢測(cè)等[18]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】在開(kāi)展煙草根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害防控研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合紅河煙區(qū)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)發(fā)生的特點(diǎn)，在關(guān)鍵時(shí)期，選用防控效果較好的3種生物農(nóng)藥，配合施用生物質(zhì)發(fā)酵肥，采取生物農(nóng)藥、生物質(zhì)發(fā)酵肥與施藥關(guān)鍵時(shí)期相結(jié)合的綠色綜合防控策略?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】研究總結(jié)出一套生物農(nóng)藥與生物質(zhì)發(fā)酵肥科學(xué)配施、選準(zhǔn)施用時(shí)期與劑量，建立具有顯著效果的綠色綜合防控策略與技術(shù)措施。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

2018年4-12月在云南省紅河州建水縣臨安鎮(zhèn)明哨村和云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 供試材料

1.2.1 煙草種子與煙苗 煙草(NicotianatabacumLinn)品種：煙草品種為云煙87。田間試驗(yàn)的種子、煙苗培育及其處理由紅河州煙草公司建水縣分公司南莊煙站提供與實(shí)施。

1.2.2 復(fù)混肥料 復(fù)混肥料屬于煙草專(zhuān)用肥，總養(yǎng)分≥45 %(含硝態(tài)氮)，N-P2O5-K2O=18-5-25，云南省紅河恒林化工有限公司產(chǎn)品。

1.2.3 生物農(nóng)藥 25 %丁硫甲維鹽(濰坊萬(wàn)勝生物農(nóng)藥有限公司產(chǎn)品)，水乳劑，總有效成分含量25 %，丁硫克百威含量23 %；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽含量2 %?？习罹€(xiàn)尊(泰安市泰山現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司產(chǎn)品)，顆粒劑，阿維菌素有效成分含量0.5 %，低毒。厚孢輪枝菌(云南微態(tài)源生物科技有限公司產(chǎn)品)，微粒劑，有效成分含量2.5億個(gè)孢子/g。

1.2.4 生物質(zhì)發(fā)酵肥 苕子秸稈發(fā)酵肥、萬(wàn)壽菊秸稈發(fā)酵肥、油蘿卜綠色秸稈發(fā)酵肥和中藥渣發(fā)酵肥均由課題組、紅河州煙草公司和云南千州生物有機(jī)肥有限公司共同研發(fā)，利用生物質(zhì)秸稈或殘?jiān)砑泳鷦┌l(fā)酵制備而成(試制品)。

1.2.5 儀器與分樣篩 解剖鏡和顯微鏡：Olympus SZX10解剖鏡、Olympus BX51光學(xué)顯微鏡；分樣篩：20、100和600目共3種孔徑分樣篩。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共設(shè)8個(gè)處理：處理1(CK)，施用復(fù)混肥料45 g/株，不施用其它有機(jī)肥和防控根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害的農(nóng)藥；處理2，育苗末期漂池中施用丁硫甲維鹽0.077 g/株，移栽前塘施丁硫甲維鹽0.18 g/株(1.8 mg/mL溶液100 mL)和油蘿卜綠色秸稈發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32 g/株；處理3，育苗末期漂池中施用肯邦線(xiàn)尊0.309 g/株，移栽前塘施肯邦線(xiàn)尊1.36 g/株(按重復(fù)小區(qū)180株，稱(chēng)取244.8 g，與砂土8755.8 g混勻，塘施含農(nóng)藥砂土50 g/株)和油蘿卜綠色秸稈發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32g/株，煙株團(tuán)棵期揭膜前再次塘施0.909 g/株；處理4，育苗末期漂池中施用丁硫甲維鹽0.077 g/株，移栽前塘施厚胞輪枝菌0.909 g/株(按重復(fù)小區(qū)180株，稱(chēng)取163.6 g，與砂土8836.4 g混勻，塘施含農(nóng)藥砂土50 g/株)和油蘿卜綠色秸稈發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32 g/株，煙株團(tuán)課期揭膜前再次塘施0.909 g/株；處理5，移栽前塘施苕子秸稈發(fā)酵肥36g/株，配施復(fù)混肥32 g/株；處理6，移栽前塘施萬(wàn)壽菊秸稈發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32 g/株；處理7，移栽前塘施油蘿卜綠色秸稈發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32 g/株；處理8，移栽前塘施中藥渣發(fā)酵肥36 g/株，配施復(fù)混肥32 g/株。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植60株煙，株行距為0.40 m×1.10 m，試驗(yàn)區(qū)的四周留出2～3株或2～3墑作為保護(hù)行。與對(duì)照相比，各處理的復(fù)混肥料施用量為32 g/株，減少28.9 %。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 煙苗培育與移栽后管理 煙苗培育采用漂浮育苗技術(shù)，建水縣分公司南莊煙站育苗點(diǎn)培育。采用烤煙小苗膜下移栽技術(shù)，煙苗移栽后，其它措施按烤煙小苗膜下移栽技術(shù)規(guī)程進(jìn)行管理。試驗(yàn)小區(qū)煙株不同生長(zhǎng)階段的管理，按烤煙大田種植技術(shù)措施進(jìn)行管理。

1.4.2 煙田根際土壤取樣 取樣時(shí)間：分別在移栽前、移栽后45、90 d和采烤結(jié)束4個(gè)時(shí)期，采集根際土壤樣品共4次。取樣方法：每重復(fù)小區(qū)選第15、30和45株煙，共采集3株煙的根際土壤，距煙株15 cm，向下20 cm取土約400 mL(下一次取土樣在煙株另一側(cè)，交替取樣)根際土壤，裝入取樣袋，分別記錄試驗(yàn)地點(diǎn)、取樣時(shí)間、處理編號(hào)和重復(fù)小區(qū)煙株編號(hào)等。

1.4.3 煙株根際土壤二齡幼蟲(chóng)(J2)檢測(cè) 采集每個(gè)重復(fù)小區(qū)3株煙的根際土壤，在實(shí)驗(yàn)室從個(gè)土壤樣品中及時(shí)量取樣品50 mL并將其混勻，取出混勻土樣50 mL。土壤中J2數(shù)量檢測(cè)方法同文獻(xiàn)[16]，采用高滲蔗糖溶液分離與分樣篩分離相結(jié)合的分離方法，并在解剖鏡下測(cè)定每個(gè)土壤樣品單位體積(50 mL)中J2數(shù)量。

1.4.4 煙田根際土壤主要養(yǎng)分檢測(cè) 團(tuán)棵期采集的土壤樣品，以每個(gè)小區(qū)3株煙的等體積根際土壤的混合樣品作為小區(qū)土樣，將樣品送至云南耘耨科技有限公司檢測(cè)。檢測(cè)土壤pH值(NY/T1377-2007)，有機(jī)質(zhì)(NY/T1121.6-2006)，全氮(NY/T1121.24-2012)，水解性氮(LY/T1228.6-2015)，有效磷(NY/T1121.7-2014)和速效氮(NY/T889.6-2004)等6項(xiàng)指標(biāo)。

1.4.5 煙葉采烤、分級(jí)、產(chǎn)量與產(chǎn)值測(cè)定 按煙葉采收、烘烤與分級(jí)管理要求進(jìn)行。采烤完畢，稱(chēng)量每個(gè)重復(fù)小區(qū)不同等級(jí)的煙葉重量，并按當(dāng)年收購(gòu)價(jià)計(jì)算每個(gè)小區(qū)的產(chǎn)值。每個(gè)小區(qū)種植了60株煙，在煙株生長(zhǎng)過(guò)程中，個(gè)別煙株因多種緣由死亡，以最終采烤煙株的數(shù)量，計(jì)算出小區(qū)內(nèi)單株煙的平均產(chǎn)量與產(chǎn)值，進(jìn)而折算為公頃產(chǎn)量與產(chǎn)值。

1.4.6 采烤煙葉結(jié)束后挖根調(diào)查病害危害程度 采烤煙葉結(jié)束，按“中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T23222-2008”中煙草病蟲(chóng)害分級(jí)及調(diào)查方法，采用煙草根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害地下部分分級(jí)與病情指數(shù)調(diào)查方法。及時(shí)挖出盡可能完整的煙株根系，當(dāng)天調(diào)查每個(gè)試驗(yàn)小區(qū)中每株煙的根系受根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)危害的病級(jí)，詳細(xì)記錄并計(jì)算試驗(yàn)小區(qū)煙株的病級(jí)與小區(qū)病情指數(shù)。

病情指數(shù) =

采用不同藥劑或生物質(zhì)有機(jī)肥料的處理，與空白對(duì)照(CK)相比，即為某種處理的相對(duì)防效。

某種處理的相對(duì)防效(%)=

2 結(jié)果與分析

2.1 煙株根際土壤單位體積中2齡幼蟲(chóng)的數(shù)量檢測(cè)

烤煙移栽前后不同時(shí)期4次采集的根際土壤，采用高滲蔗糖溶液離心與分樣篩分離相結(jié)合的方法，檢測(cè)單位體積根際土壤中J2數(shù)量，結(jié)果如圖1所示。通過(guò)對(duì)所檢測(cè)的50 mL根際土壤中J2數(shù)量的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)中8個(gè)處理的4次采樣檢測(cè)，其中，第1次采樣(F=1.60F0.01=4.28，處理間差異達(dá)及極顯著水平。第3次采樣的檢測(cè)結(jié)果方差分析顯示，處理間差異達(dá)顯著水平，F(xiàn)=2.77>F0.05=2.76。

根據(jù)方差分析結(jié)果，試驗(yàn)中第1次取樣檢測(cè)的各處理間根際土壤中J2數(shù)量差異不顯著，總體的根際土壤中J2數(shù)量都較少(10～35條/50 mL土)，此時(shí)，只是劃定試驗(yàn)小區(qū)，未對(duì)試驗(yàn)地進(jìn)行任何施藥與施肥處理，測(cè)定的J2數(shù)量只是試驗(yàn)地的背景值。但是，測(cè)定數(shù)據(jù)顯示，試驗(yàn)地的土壤中含有J2，各處理與小區(qū)間的土壤中J2數(shù)量不均一，只是未達(dá)到顯著差異。該結(jié)果提示，試驗(yàn)地在上年度種植烤煙發(fā)生根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害，本次試驗(yàn)所檢測(cè)的J2中可能含有根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的幼蟲(chóng)。第2次采樣的檢測(cè)結(jié)果顯示各處理間差異達(dá)極顯著水平，單位體積根際土壤中J2數(shù)量總體較低(4～29條/50 mL土)，比移栽煙苗前的背景值低，同時(shí)，出現(xiàn)未作任何處理的空白對(duì)照最低，而藥劑或施生物質(zhì)發(fā)酵肥處理卻較高的現(xiàn)象，分析認(rèn)為，由于處理1(CK)未施藥或施發(fā)酵肥，較多的J2已侵入煙株根系，故所檢測(cè)到的單位體積根際土壤中J2數(shù)量較低。施藥與施肥的不同處理間， J2侵染進(jìn)程受到影響，單位體積根際土壤中J2數(shù)量相對(duì)較高。第3次采樣的檢測(cè)結(jié)果，各處理間差異達(dá)顯著水平，且總體的單位體積根際土壤中J2數(shù)量較高(56～164條/50 mL土)，表明根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)已完成至少1個(gè)侵染循環(huán)，并已孵化出大量的J2，同時(shí)，以處理1(CK)的J2數(shù)量最高，不同施藥或施肥處理的J2數(shù)量相對(duì)較低，該結(jié)果佐證了對(duì)第2次檢測(cè)結(jié)果的分析。第4次采樣的檢查結(jié)果顯示，各處理間的差異不顯著，依據(jù)單位體積根際土壤中J2數(shù)量，處理2和處理4明顯低于處理1(CK)，一定程度上反映出這2種農(nóng)藥與肥料對(duì)J2產(chǎn)生的抑制效果。由于此次采樣距移栽時(shí)間約120 d，故侵染的線(xiàn)蟲(chóng)至少已發(fā)生2個(gè)侵染循環(huán)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，紅河煙區(qū)在移栽后35 d，煙株根系已產(chǎn)生大量的卵塊團(tuán)，完全可以孵化成J2，由于首個(gè)侵染循環(huán)至第2個(gè)侵染循環(huán)過(guò)程中所受影響因素較多，同時(shí)，施入的藥劑或肥料作用時(shí)間(或半衰期)存在差異，因而在第4次檢測(cè)中單位體積根際土壤J2數(shù)量出現(xiàn)較大起伏屬正?，F(xiàn)象。

同一取樣時(shí)間不同處理數(shù)字后不同大小寫(xiě)字母分別表示差異達(dá)0.01或0.05顯著水平，下同The capital and lower-case letter behind the number with different treatments indicated the significant difference at 0.01 and 0.05 level, respectively, the same as below圖1 4個(gè)時(shí)期煙株根際土壤單位體積(50 mL)中J2數(shù)量檢測(cè)Fig.1 Determination of nematode J2 amount in rhizosphere soil (50 mL) of tobacco plants during 4 growing stage

第2、3次采樣檢測(cè)根際土壤中J2數(shù)量，方差分析結(jié)果分別顯示極顯著差異和顯著差異。根據(jù)幾個(gè)處理在4個(gè)時(shí)期單位體積根際土壤中J2數(shù)量的變化，初步判斷生物農(nóng)藥丁硫甲維鹽和肯邦線(xiàn)尊、以及油蘿卜秸稈發(fā)酵肥施用于煙株根際土壤中，對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)J2具有明顯的抑制效果。

2.2 采烤煙葉結(jié)束后挖根調(diào)查根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)危害程度

試驗(yàn)中的8個(gè)處理，處理1(CK)的病情指數(shù)最高，處理3病情指數(shù)最低，為24.00(相對(duì)防效為67.1 %)；其次處理8的病情指數(shù)為28.37(相對(duì)防效為61.1 %)；處理2的病情指數(shù)為36.20(相對(duì)防效為50.4 %)。其它處理對(duì)煙株根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害均有不同程度的防控效果。進(jìn)一步分析顯示，8個(gè)處理間的病情指數(shù)差異達(dá)極顯著水平，處理間F=4.64>F0.01=4.28，表明移栽煙苗前各處理與處理1(CK)具有極顯著的差異。處理1(CK)的平均病情指數(shù)為73，高于藥劑或生物質(zhì)發(fā)酵肥處理后的病情指數(shù)。新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)顯示，只有處理7(中藥渣發(fā)酵肥)與處理1(CK)在同一水平上，該結(jié)果與單位體積根際土壤中J2數(shù)量的檢測(cè)結(jié)果相對(duì)應(yīng)。

圖2 各處理病情指數(shù)Fig.2 Disease index investigation of root-knot nematode with different treatments

圖3 各處理采烤煙葉的產(chǎn)量Fig.3 Yield of cured tobacco leaves with different treatments

圖4 各處理采烤煙葉的產(chǎn)值測(cè)定Fig.4 Output value determination of cured tobacco leaves

2.3 采烤的煙葉分級(jí)、產(chǎn)量測(cè)定與產(chǎn)值測(cè)評(píng)

從圖3～4可見(jiàn)，平均產(chǎn)量以處理1(CK)最低，為2535.0 kg/hm2；最高產(chǎn)量是處理3，為3278.55 kg/hm2；其次是處理8，為3172.05 kg/hm2；處理7的產(chǎn)量最低，為2982.00 kg/hm2。該結(jié)果與病害調(diào)查結(jié)果相一致。8個(gè)處理重復(fù)小區(qū)折算的每公頃產(chǎn)量進(jìn)行方差分析，處理間差異達(dá)極顯著水平，F(xiàn)=6.33>F0.01=4.28，表明不同生物農(nóng)藥或生物質(zhì)發(fā)酵肥對(duì)煙葉產(chǎn)量的影響存在極顯著的差異。通過(guò)新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)，施藥劑和施有機(jī)肥料的各處理在同一水平，但與處理1(CK)差異極顯著。有關(guān)產(chǎn)量方面新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)的結(jié)果與病情指數(shù)的測(cè)驗(yàn)結(jié)果相一致。

從圖4可見(jiàn)，不同處理的產(chǎn)值排序與產(chǎn)量排序基本一致。方差分析的結(jié)果顯示，F(xiàn)=5.48>F0.01=4.28，各處理間產(chǎn)值的差異達(dá)到極顯著水平。移栽煙苗前的不同藥劑處理及空白處理間具有極顯著的差異。產(chǎn)值最高的處理3，為89 200.20元/hm2；其次是處理8，為88 612.50元/hm2；處理7產(chǎn)值為8296.05元/hm2。通過(guò)新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)，施藥劑和施肥的各處理在同一水平，但與處理1(CK)差異極顯著，與上述產(chǎn)量方面及根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害方面的分析結(jié)果相一致。有關(guān)產(chǎn)值方面的方差分析結(jié)果與產(chǎn)量及病情指數(shù)的分析結(jié)果相印證。

2.4 煙田土壤主要養(yǎng)分檢測(cè)

土壤樣品在6月12-14日采集，當(dāng)時(shí)已培土，有些處理已進(jìn)行第3次施藥。煙株生長(zhǎng)至團(tuán)棵期。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，除了中藥渣發(fā)酵肥、萬(wàn)壽菊秸稈發(fā)酵肥和厚孢輪枝菌各處理中土壤pH值低于處理1(CK)(表1)，及厚孢輪枝菌或苕子秸稈發(fā)酵肥各處理中速效鉀含量低于處理1(CK)，其它的數(shù)值均高于處理1(CK)，該結(jié)果表明在減施復(fù)混肥28.9 %的條件下，配施600 kg/hm2的生物質(zhì)發(fā)酵肥，土壤主要養(yǎng)分高于常規(guī)只施750 kg/hm2復(fù)混肥的處理1(CK)。而且上述試驗(yàn)處理的煙葉產(chǎn)量與產(chǎn)值也高于處理1(CK)。進(jìn)一步對(duì)試驗(yàn)小區(qū)6項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，各項(xiàng)指標(biāo)的F測(cè)驗(yàn)值均小于F0.05=2.76(表1)，表明這6項(xiàng)指標(biāo)各處理間的差異不顯著，說(shuō)明在配施生物質(zhì)發(fā)酵肥與施藥條件下，減施復(fù)混肥28.9 %，可以滿(mǎn)足煙株生長(zhǎng)需求。

表1 煙田土壤主要養(yǎng)分含量

從表1及其源數(shù)據(jù)還可以看出，多數(shù)試驗(yàn)處理土壤的有機(jī)質(zhì)、全氮、水解性氮、有效磷和速效鉀含量均比處理1(CK)高，只是因?yàn)樘镩g土壤所受影響因素較多，檢測(cè)獲得的結(jié)果波動(dòng)性大，方差分析結(jié)果顯示處理間差異不顯著。但配施所研發(fā)的發(fā)酵肥，可將復(fù)混肥減少至450 kg/hm2。

3 討 論

栽培作物的土壤中含有各類(lèi)線(xiàn)蟲(chóng)，包括腐生性線(xiàn)蟲(chóng)和寄生性的病原線(xiàn)蟲(chóng)。根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)屬于內(nèi)寄生的病原線(xiàn)蟲(chóng)。栽培地的作物發(fā)生根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害之后，病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的幼蟲(chóng)和卵的數(shù)量會(huì)顯著增加[7-9]。研究中試驗(yàn)地是上一年種植烤煙并發(fā)生較重的根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害的煙田，移栽前土壤中存在一定數(shù)量的J2。而且，檢測(cè)到的J2有腐生性和寄生性的，包括病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的J2。曾探索到移栽煙苗后，室內(nèi)和田間J2最早侵入根系的時(shí)間為6 d[18]，以此推測(cè)首批侵入根系的J2為土壤中已存在的，后續(xù)侵入根系的有可能是土壤中移栽煙苗后卵孵化的幼蟲(chóng)。研究組已開(kāi)展了大量的土壤樣品中J2數(shù)量檢測(cè)，檢測(cè)的樣品中有的數(shù)量極高，可能所采樣品來(lái)自發(fā)病較重的根系區(qū)域和采樣時(shí)間恰好是根系上卵塊大量孵化的時(shí)間，故出現(xiàn)個(gè)別樣品單位體積(50 mL)土壤中J2數(shù)量達(dá)到2000條以上的現(xiàn)象。從第4次采樣時(shí)期推測(cè)，病原根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)有可能已發(fā)生2～4個(gè)侵染循環(huán)，故檢測(cè)結(jié)果存在波動(dòng)性大，方差分析較難出現(xiàn)處理間差異顯著的現(xiàn)象。此外，不論藥劑或生物質(zhì)發(fā)酵肥，對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的作用均具有時(shí)效性。再者，土壤是微生物的大本營(yíng)，會(huì)存在降解各類(lèi)活性成分的微生物及其分泌的酶類(lèi)。因而，后期的檢測(cè)結(jié)果中各處理間一般不會(huì)存在差異顯著的現(xiàn)象。

參試的丁硫甲維鹽和肯邦線(xiàn)尊農(nóng)藥中均含有阿維菌素類(lèi)成分。阿維菌素對(duì)病原線(xiàn)蟲(chóng)具有毒殺作用[9-11]，迄今，阿維菌素類(lèi)農(nóng)藥可廣泛應(yīng)用于防控根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害，較安全的環(huán)境友好型生物農(nóng)藥。其中還含有生物堿。近年來(lái)，范玉嬌等報(bào)道了關(guān)于生物堿殺線(xiàn)蟲(chóng)活性的研究[12]。有關(guān)生物堿殺線(xiàn)蟲(chóng)將是一個(gè)研究熱點(diǎn)。楊章明等報(bào)道了利用萬(wàn)壽菊與厚孢輪枝菌防治煙草根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害的效果[14]，顯示研究目標(biāo)越來(lái)越多聚焦到根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害的生物防控方面。

研究生物質(zhì)發(fā)酵肥，選擇苕子秸稈發(fā)酵是因?yàn)槠鋵俣箍浦参铮^早被用作綠肥作物[21]。選擇中藥渣作為生物質(zhì)發(fā)酵原料，主要是近些年廢棄中藥渣已危害到生態(tài)環(huán)境[22-23]，中藥渣的主要原料是植物秸稈，加工成有機(jī)肥既解決了其危害性，又將廢棄物資源化利用，植物秸稈還田極大有利于生態(tài)環(huán)境。油蘿卜秸稈用于發(fā)酵肥原材料，主要原因是油蘿卜具有抗甜菜孢囊線(xiàn)蟲(chóng)[24]和四種根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)[25-26]，利用油蘿卜秸稈進(jìn)行發(fā)酵，制備有機(jī)肥，除作有機(jī)肥料，還可防控根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害。

4 結(jié) 論

種植煙草過(guò)程中，在育苗末期、移栽前和團(tuán)棵期分別將阿維菌素類(lèi)生物農(nóng)藥與油蘿卜秸稈發(fā)酵肥配施，可減少?gòu)?fù)合肥28.9 %的施用量，并有效防控?zé)煵莞Y(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害，產(chǎn)量與產(chǎn)值顯著提高。

致 謝：徐宏韜和杜潮庚同學(xué)在實(shí)習(xí)期間參與了本研究的工作，特此感謝！