Let-7a調(diào)控自身免疫性甲狀腺炎發(fā)生發(fā)展及其機(jī)制研究

王 麗，張 靜，張洪宇，于 婧，曾 薇，駱海濤，何 寧，張優(yōu)明

（1.齊齊哈爾市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 齊齊哈爾 161005；2.齊齊哈爾和平醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 齊齊哈爾 161005）

近些年來(lái)，隨著生活節(jié)奏的加快和飲食結(jié)構(gòu)的改變，自身免疫性甲狀腺炎在人群中的發(fā)病率逐年在增加。自身免疫性甲狀腺炎又稱橋本甲狀腺炎或稱慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎，是一種具有明顯遺傳傾向的器官特異性自身免疫性疾病，其發(fā)病率約為0.3～1.5/1000人/年，約占甲狀腺疾病的20%左右[1]。自身免疫性甲狀腺炎多發(fā)于30～50歲女性。患者大多有甲狀腺腫，半數(shù)甲狀腺功能正常，約1/4有甲亢，甲減僅占1/7。這種疾病若得不到及時(shí)有效的治療，則會(huì)引發(fā)甲亢危象及甲亢性心臟病等并發(fā)癥，從而威脅到患者的生命安全。因此本研究選取2018年8月～2019年8月期間我收治的的100例患有自身免疫性甲狀腺炎（AITD）的患者作為研究對(duì)象，從而探討Let-7a調(diào)控自身免疫性甲狀腺炎發(fā)生發(fā)展及其機(jī)制，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年4月～2019年8月期間我收治的的100例患有自身免疫性甲狀腺炎（AITD）的患者作為研究對(duì)象，收集齊清晨空腹靜脈血，并將其設(shè)為實(shí)驗(yàn)組；收集同一時(shí)期在我院進(jìn)行體檢的100名人員的空腹靜脈血樣本，并將其設(shè)為對(duì)照組。

1.2 方法

本研究采取的方法如下：①收集臨床血清：用不含抗凝劑的普通采血管（紅帽）收集患者的外周靜脈血（一般為5 ml），然后提取血清；②構(gòu)建自身免疫性甲狀腺炎大鼠模型：將60只SPF級(jí)SD雌性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開(kāi)始造模，并隨機(jī)分為正常對(duì)照組和自身免疫性甲狀腺炎大鼠模型組，每組各30只；其中模型組按照體重給予高碘水（500 g/L），對(duì)照組給予蒸餾水，8周后收集兩組大鼠血清樣本進(jìn)行qRT-PCR實(shí)驗(yàn)；③RNA的提取和轉(zhuǎn)錄：利用TRIzol、二甲基亞砜（DMSO）、異丙醇及無(wú)水乙醇等有機(jī)試劑進(jìn)行RNA的提?。虎躌eal time qPCR反應(yīng)→TUNEL染色→細(xì)胞轉(zhuǎn)染→流式細(xì)胞術(shù)→Western blot實(shí)驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)均采用Graph Pad Prism 5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用數(shù)值和百分?jǐn)?shù)表示，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用±s表示，采用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，概率值P＜0.05表示差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 前期結(jié)果

在前期實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)收集10例正常人和10例自身免疫性甲狀腺炎患者的血清樣本來(lái)檢測(cè)miRNAs的表達(dá)情況，qRT-PCR結(jié)果顯示，①let-7a、miR-125、miR-1792在實(shí)驗(yàn)組患者的血清中明顯升高，而miR-142和miR-155在實(shí)驗(yàn)組患者血清中沒(méi)有明顯的變化；②與治療前相比，治療過(guò)程中l(wèi)et-7a、miR-125、miR-1792在實(shí)驗(yàn)組患者的血清中均降低；③與對(duì)照組相比，let-7a、miR-125、miR-1792在模型組大鼠血清中均有所升高，其中l(wèi)et-7a升高最明顯。

3 討 論

在本研究中，通過(guò)上述方法，let-7a、miR-125、miR-1792在實(shí)驗(yàn)組患者的血清中明顯升高，而miR-142和miR-155在實(shí)驗(yàn)組患者血清中沒(méi)有明顯的變化；與治療前相比，治療過(guò)程中l(wèi)et-7a、miR-125、miR-1792在實(shí)驗(yàn)組患者的血清中均降低；與對(duì)照組相比，let-7a、miR-125、miR-1792在模型組大鼠血清中均有所升高，其中l(wèi)et-7a升高最明顯，差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因此，我們可認(rèn)為，let-7a可能與自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)生和發(fā)展有著一定的聯(lián)系。