宮頸病變382例高危人乳頭瘤病毒亞型分布及其與宮頸癌的相關性分析

胡敏

作者單位：洪湖市婦幼保健院婦產(chǎn)科，湖北 荊州433200

宮頸癌發(fā)病率居全球女性惡性腫瘤第3位，而在發(fā)展中國家發(fā)病率及死亡率居第2位，嚴重威脅女性生命健康［1］。宮頸癌從發(fā)生、發(fā)展至癌前病變是一個連續(xù)復雜的病理過程，而人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是目前全球公認的可導致宮頸癌發(fā)生的危險因素，尤其是高危HPV持續(xù)感染與宮頸癌發(fā)生密切相關［2-3］。大量資料調查研究發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)HPV亞型分布及感染情況存在較大差異［4］。因此，本研究旨在探討荊州市婦女高危HPV亞型分布及與宮頸癌的相關性分析，為該地宮頸癌篩查及治療提供參考資料。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2016年1月至2018年8月洪湖市婦幼保健院收治的382例宮頸病變病人進行研究，其中宮頸癌病人95例（宮頸癌組）、宮頸癌前病變病人135例（癌前病變組），宮頸炎病人152例（宮頸炎組）。納入標準：（1）入組前24 h內(nèi)無性行為者；（2）入組前3 d未使用陰道藥物者；（3）病人對本研究知情，并簽署知情同意書；（4）年齡＞18歲；（5）無盆腔放射治療史；（6）未曾服用激素。排除標準：（1）有宮頸切除史者；（2）有宮頸手術及放化療史者；（3）無性生活史者；（4）合并嚴重肝、腎等合并癥者；（5）有家族遺傳病史者；（6）精神疾病病人；（7）妊娠或哺乳期婦女。宮頸癌組年齡范圍為29～58歲；病程范圍為1～3年；組織病理切片分期：Ⅰ期26例，Ⅱ期45例，Ⅲ期19例，Ⅳ期5例。癌前病變組年齡范圍為29～59歲；病程范圍為1～4年；低級別病變63例，病程（1.35±0.15）年；高級別病變72例，病程（2.17±0.52）年。宮頸炎組年齡范圍為27～59歲；病程范圍為1～5年，三組病人年齡、病程等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關要求。

表1 三組宮頸病變病人一般資料比較/

表1 三組宮頸病變病人一般資料比較/

組別宮頸炎組癌前病變組宮頸癌組F值P值例數(shù)152 135 95年齡/歲37.82±5.41 38.51±4.16 39.37±4.23 2.455 0.087病程/年1.49±0.35 1.45±0.38 1.42±0.33 1.188 0.306

1.2診斷標準根據(jù)《宮頸癌及癌前病變規(guī)范化診療指南（試行）》［5］中宮頸癌與癌前病變診斷標準診斷，并經(jīng)組織病理切片確診。宮頸炎診斷標準為棉拭子檢查宮頸管內(nèi)有肉眼可見黏液膿性分泌物，宮頸管接觸性出血，陰道分泌物高倍鏡下白細胞數(shù)15～30個或宮頸分泌物白細胞＞10個。

1.3樣本采集受試者外陰和宮頸口消毒，拭去宮頸表面分泌物，取樣刷置入宮頸管內(nèi)順時針旋轉4周取出，將標本洗脫到含細胞保存液采樣管中，4℃保存待檢。

1.4方法（1）HPV檢測：取樣本0.5 mL于離心管中，12 000 r/min離心1 min，棄上清，加細胞裂解液提取DAN，配制PCR擴增反應體系：互補DNA（cDAN）2μL，混合物（mix）0.5μL，上、下游引物各0.5μL，雙蒸水（ddH2O）16.5μL，擴增條件：95℃ 20 s，72 ℃ 300 s，40個循環(huán)，獲取樣本Ct，根據(jù)ΔΔCt計算HPV水平。（2）HPV-DNA亞型檢測：采用雜交捕獲法對 14種高危亞型（HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68）分型檢測，分型檢測試劑盒購于深圳邁瑞爾科技有限公司，實驗操作步驟嚴格參照試劑盒說明書執(zhí)行。

1.5統(tǒng)計學方法研究數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行處理，計量資料用描述，三組間比較采用單因素方差分析，計數(shù)資料用例（%）描述，三組比較采用χ2檢驗，當P＜0.05時，差異有統(tǒng)計學意義。三組之間兩兩比較采用P值修正的方法，當P＜0.05/3＝0.016 7時，才能認為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1三組病人HPV陽性率比較宮頸癌組、癌前病變組HPV陽性檢出率分別為94.74%、72.59%，高于宮頸炎組 23.03%（χ2＝120.271，P＜0.001；χ2＝70.641，P＜0.001），宮頸癌組明顯高于癌前病變組（χ2＝18.319，P＜0.001）。

2.2三組病人高危HPV亞型分布情況比較三組間HPV16、HPV18、HPV52、HPV59及總HPV亞型陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），宮頸癌組中HPV16、HPV18、HPV52、HPV59及總HPV亞型陽性檢出率高于宮頸炎組（P＜0.05），其中總HPV亞型陽性檢出率還高于癌前病變組（P＜0.05），見表2。

2.3三組高危HPV陽性病人單一感染情況比較宮頸癌組、癌前病變組高危HPV陽性病人單一型感染率分別為94.74%（72/76）、72.41%（63/87），明顯高于宮頸炎組40.74%（11/27）（P＜0.001），三組比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝34.410，P＜0.001）。

2.4高危HPV不同亞型在宮頸癌不同分型中的分布比較宮頸癌病人HPV16亞型在鱗癌中陽性檢出率最高，不同臨床分型比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），HPV18亞型在腺癌中陽性檢出率最高，不同臨床分型比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），HPV33、HPV35、HPV51、HPV52、HPV59及其他亞型在不同臨床分型比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表2 三組宮頸病變病人高危HPV亞型分布情況比較/例（%）

表3 高危HPV不同亞型在宮頸癌不同臨床分型中的分布比較/例（%）

3 討論

宮頸癌全世界每年新增病例約為50萬例，其中約59%發(fā)生在亞洲，而中國發(fā)病率和死亡率約占全世界的1/3，并呈逐年升高趨勢［6-7］。宮頸癌從癌前病變到發(fā)展為宮頸浸潤癌要經(jīng)歷10～20年，而HPV持續(xù)感染為導致癌前病變與宮頸癌必要因素，并且不同亞型HPV致病力差異較大，對宮頸癌發(fā)生影響差異也較大［8］。因此，明確高危HPV亞型分布對宮頸癌篩查及預防十分重要。

HPV亞型眾多，目前發(fā)現(xiàn)的已有200多種，根據(jù)對宮頸病變致病程度不同分為高危型和低危型，而其中14種（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68）高危型已被認定與宮頸癌相關，HPV感染后約50%～90%病人可經(jīng)自身免疫系統(tǒng)清除，無病變發(fā)生，只有高危HPV持續(xù)感染才能引起病變，尤其在宮頸癌中約有99.7%由HPV感染所致［9-10］。有研究報道粵東地區(qū)宮頸癌中HPV感染率為86.45%，江蘇地區(qū)宮頸癌中HPV感染率為82.10%［11-12］。本研究結果顯示，宮頸癌病人中HPV感染率為94.74%，明顯高于宮頸癌前病變、宮頸炎病人的72.59%、23.03%，與張玲［13］研究結果基本相一致，提示宮頸癌病人HPV感染率高。

國際癌癥研究協(xié)會調查報道HPV16為全球感染率最高亞型，HPV18感染率僅次于HPV16，亞洲國家中HPV52、58感染較其他亞型常見。時宇等［14］研究發(fā)現(xiàn)北京地區(qū)宮頸癌病人以HPV16、18、52、58亞型為主。本研究結果顯示，宮頸癌組中HPV16、18、52、59陽性檢出率最高，HPV35亞型陽性檢出率也略高于其他亞型，與毛麗梅等［15］研究結果基本相一致，提示荊州市宮頸癌病人以HPV16、18、52、59感染為主，存在地區(qū)差異，對該地區(qū)HPV16、18、52、59感染病人進行早期干預，可能對宮頸癌發(fā)生具有一定預防作用。

HPV亞型較多，各亞型間缺乏交叉保護抗體，導致多重感染或交叉感染發(fā)生，但關于HPV亞型多重感染是否增加宮頸癌發(fā)生率存在爭議較大［16-17］。本研究結果顯示，宮頸癌組、癌前病變組高危HPV陽性病人單一型感染率分別為94.74%、72.41%，與原榮等［18］研究報道的陜西省榆林地區(qū)與商洛地區(qū)感染情況相似，提示荊州市宮頸癌病人主要為高危HPV單一亞型感染。最后對高危HPV不同亞型在宮頸癌不同臨床分型分布情況比較顯示，宮頸癌病人HPV16亞型在鱗癌中陽性檢出率最高，不同分型比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），HPV18亞型在腺癌中陽性檢出率最高，不同臨床分型比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與石彩歌等［19］研究結果基本相一致。

綜上所述，本研究通過對荊州市宮頸癌病人高危HPV檢測顯示，該地區(qū)宮頸癌病人HPV16、HPV18、HPV52、HPV59亞型在該地區(qū)較常見，以單一亞型感染為主，其中HPV16、HPV18與宮頸癌臨床分型相關，高危HPV亞型檢測對宮頸癌篩查具有重要意義。本研究所選研究對象及取樣范圍有限，可能會造成一定結果誤差。