背根神經(jīng)節(jié)巨噬細(xì)胞參與神經(jīng)病理性疼痛的起始和維持

目的：探討背根神經(jīng)節(jié)(DRG)巨噬細(xì)胞在神經(jīng)病理性疼痛的作用。方法：（1）神經(jīng)病理性疼痛模型：坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型(SNI)。（2）Fas誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡(MAFIA)小鼠模型：MAFIA小鼠連續(xù)3天腹腔給予AP20187（AP，該藥不通過(guò)血腦屏障），停藥后第1天DRG巨噬細(xì)胞減少至20%，停藥后第4天DRG巨噬細(xì)胞數(shù)量恢復(fù)至正常水平。說(shuō)明MAFIA小鼠腹腔注射AP，可以選擇性殺死DRG巨噬細(xì)胞。（3）熒光激活細(xì)胞分選術(shù)(FACS)：可以分選出DRG中CX3CR1染色陽(yáng)性的巨噬細(xì)胞。結(jié)果：（1）SNI術(shù)后4天(POD4)，術(shù)側(cè)DRG巨噬細(xì)胞增加至約2.9倍，并且持續(xù)到術(shù)后28天(POD28)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，Ki67+CX3CR1+細(xì)胞在POD4明顯增加，提示外周神經(jīng)損傷后DRG巨噬細(xì)胞增殖加快。（2）MAFIA小鼠先連續(xù)3天腹腔給予AP或溶劑(VEH)，然后建立SNI模型，以研究DRG巨噬細(xì)胞是否參與早期神經(jīng)病理性疼痛。與VEH組術(shù)側(cè)DRG相比，術(shù)后4天(POD4) AP組巨噬細(xì)胞明顯降低，術(shù)后9天(POD9) AP組巨噬細(xì)胞恢復(fù)至VEH組水平。與VEH組相比，AP組術(shù)后7天(POD7)才出現(xiàn)痛行為。此結(jié)果提示，DRG巨噬細(xì)胞參與早期的神經(jīng)病理性疼痛。（3）研究者進(jìn)一步觀察，DRG巨噬細(xì)胞在慢性痛維持中的作用。MAFIA小鼠建立SNI模型28天后，再連續(xù)3天腹腔給予AP。AP組DRG巨噬細(xì)胞數(shù)量明顯降低，同時(shí)神經(jīng)病理性疼痛明顯減輕。此結(jié)果提示，DRG巨噬細(xì)胞也參與神經(jīng)病理性疼痛的維持。（4）DRG局部的神經(jīng)元和巨噬細(xì)胞是否存在交互作用，是研究者下一步要解決的問(wèn)題。采用Adv-Cre; Csf1fl/fl小鼠，可以特異性敲除DRG神經(jīng)元的集落刺激因子-1 (Csf1)基因，同時(shí)阻止外周神經(jīng)損傷引起的DRG巨噬細(xì)胞增加。MAFIA小鼠腹腔給予AP，不僅可以降低巨噬細(xì)胞IL-1β含量，還阻止神經(jīng)損傷引起的DRG神經(jīng)元BDNF的增加。結(jié)論：DRG巨噬細(xì)胞參與神經(jīng)病理性疼痛的起始和維持。神經(jīng)損傷后，DRG巨噬細(xì)胞和神經(jīng)元存在交互作用，提示DRG可作為神經(jīng)病理性疼痛的治療靶點(diǎn)。