血紅蛋電泳法對地中海貧血診斷符合率分析及應(yīng)用價值探究

徐開忠

（文山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 云南 文山 663000）

全自動毛細(xì)管電泳儀是目前最先進(jìn)、自動化程度最高的多功能蛋白電泳檢查的儀器，提供了從原試管連續(xù)進(jìn)樣到最后電泳結(jié)果剖析的全過程，具體的過程分為標(biāo)本識別、標(biāo)本稀釋、毛細(xì)管清潔、標(biāo)本金陽、電泳、檢測、結(jié)果處理和網(wǎng)絡(luò)傳輸?shù)?。這種儀器可以應(yīng)用在多種蛋白電泳測定，血紅蛋白電泳就其測定的項(xiàng)目之一，而血紅蛋白電泳則是地中海貧血這一疾病的主要篩查方法[1-3]。筆者在本文探討了毛細(xì)管電泳血紅蛋白對于地中海貧血的診斷符合率，具體報(bào)告內(nèi)容如下：

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取我院接收的做血紅蛋白電泳分析，疑是地中海貧血表型陽性的標(biāo)本100 例，靜脈血3mlADC 抗凝血，2 攝氏度～8 攝氏度為儲存環(huán)境。

1.2 方法

1.2.1 血紅蛋白電泳 血紅蛋白電泳儀器為法國Sebia minicap 全自動毛細(xì)管電泳儀，按照說明書進(jìn)行操作，分理處患者的血紅蛋白成分和比例，主要是HbA、HbA2、HbF、HbH 以及Hb Barts。

1.2.2 參考區(qū)間 血紅蛋白電泳成人HbA2 的數(shù)值為2.5%～3.5%之間，中間并沒有異常血紅蛋白帶。一旦發(fā)現(xiàn)HbA2 小于等于2.5%及大于3.5%或者檢出HbF，就可以初步判定為地中海貧血表型陽性。

1.2.3 基因判斷 將該100 例被判定為地中海貧血表型陽性標(biāo)本均進(jìn)行下一步行基因分析確診，基因檢測送往金域檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)實(shí)做，檢測完畢后結(jié)果回傳查詢統(tǒng)計(jì)分析，具體的方法為聚合酶鏈反應(yīng)，DNA 擴(kuò)增技術(shù)（polymerase chain reaction，PCR）以及反向斑點(diǎn)雜交（reverse dot blot，RDB）。

2.結(jié)果

對100 例α 地中海貧血表型陽性標(biāo)本進(jìn)行基因判斷，經(jīng)過基因判斷發(fā)現(xiàn)，確診為地中海貧血85 例，初篩符合率為85%（85/100），50 例β 地中海貧血篩查經(jīng)過基因診斷，確診47 例，診斷符合率為94%（47/50）。標(biāo)本PCR-RDB 檢測結(jié)果提示：地中海貧血100 例，β 地中海貧血50 例。

患者毛細(xì)管電泳分析：其中85 例患者HbA2 低于2.5%，平均（1.5±0.6）%，診斷為α 地中海貧血；23 例患者HbA2高于3.5%，平均（4.2±0.5）%，24 例患者HbF 高于2%，平均（3.2±0.7）%，均診斷為β 地中海貧血。

3.討論

地中海貧血是我們國家極為常見的一種遺傳性疾病，該疾病會對患者的日常生活以及生命安全帶來嚴(yán)重的威脅，為此有效的探討該疾病的診斷方法是必要的。本文的基因診斷結(jié)果為α 地中海貧血表型陽性表本的符合率為85%，β 地中海貧血的診斷符合率為94%，造成α 地中海貧血與β 地中海貧血差異的主要原因可能是由于缺鐵性貧血，以及其他貧血及一些特殊血紅蛋白病，導(dǎo)致患者M(jìn)CV 下降及成份改變引起。目前我國普高醫(yī)療機(jī)構(gòu)的基因診斷只能診斷出缺失性α 地中海貧血，對于突變性α 地中海貧血檢測測序很少開展，因此可能導(dǎo)致α 地中海貧血的診斷率相對較低。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)結(jié)合分子生物學(xué)手段檢測α、β 地中海貧血效果良好，但是分子生物學(xué)技術(shù)檢測要求相對較高，方法較為繁瑣，在檢測的過程當(dāng)中，應(yīng)用存在一定的局限性，對于一些基層醫(yī)院，在實(shí)際運(yùn)行的過程當(dāng)中，往往不存在應(yīng)用的條件。因此，在實(shí)際的測量以及鑒定的過程中，仍然使用簡單、方便的血液學(xué)方法來進(jìn)行地中海貧血篩查[4-5]。血紅蛋白電泳技術(shù)是目前較為常見的一種技術(shù)，該技術(shù)可以根據(jù)各種血紅蛋白的等電點(diǎn)不同來對疾病進(jìn)行次檢測，該技術(shù)是目前最為常見的檢驗(yàn)方法，本文探討了該技術(shù)的診斷效果。

本文的研究結(jié)果與臨床醫(yī)學(xué)界的研究結(jié)果相似，王蒹的研究結(jié)果為：17454 例新生兒中檢測出2712 例血紅蛋白陽性,陽性率為15.54%；其中1879 例(10.77%)α 型地中海貧血,750 例(4.30%)β 型地中海貧血,異常血紅蛋白83 例(0.48%)；本院召回221 例α 地中海貧血樣本和80 例β 地中海貧血樣本進(jìn)行基因分析,其中α 地中海貧血的診斷符合率為90.05%,β 地中海貧血診斷符合率為83.75%。由此可以看出，本次實(shí)驗(yàn)研究具有一定的研究意義。

綜上，毛細(xì)血管電泳血紅蛋白對地中海貧血進(jìn)行檢查，效果良好，為α 地中海貧血及β 地中海貧血疾病早期診療提供有效的依據(jù)，可作為確診的重要線索，當(dāng)電泳時出現(xiàn)少見模式異常條帶等異常，必要時可對電泳篩查陽性者采用基因檢測或DNA 序列測序分析進(jìn)一步驗(yàn)證確診。