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    觀賞地被植物百里香快繁優(yōu)化研究

    2020-11-09 03:45:58任俞新張德罡
    甘肅農(nóng)業(yè)科技 2020年8期
    關(guān)鍵詞:百里香成活率誘導(dǎo)

    任俞新 張德罡

    摘要:以當年生幼嫩莖段為外植體,進行百里香優(yōu)化快繁再生體系試驗。結(jié)果表明,百里香莖切段較理想的滅菌方法為75 %酒精浸泡30 s,轉(zhuǎn)入飽和漂白粉上清液浸泡300 s。適合不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L 6-BA + 0.3 mg/L NAA+ 0.3 mg/L GA3,誘導(dǎo)率達95.25%,平均芽數(shù)10.8個。較佳的不定芽增殖培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.4 mg/L GA3,增殖倍數(shù)為15.11,平均苗高為4.61 cm。理想的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.2 mg/L IBA +0.1 mg/L IAA,生根率為100%,平均生根數(shù)10.03條,生根試管苗移栽20 d后成活率達95%。

    關(guān)鍵詞:百里香;優(yōu)化快繁;誘導(dǎo);培養(yǎng); 成活率

    中圖分類號:S682? ? ? ? 文獻標志碼:A? ? ? ? ?文章編號:1001-1463(2020)08-0039-05

    doi:10.3969/j.issn.1001-1463.2020.08.010

    Abstract:The effects of different ratio of attapulgite (PAL) and LC-S01 on soil heavy metal passivation and reduce crop absorption were studied. The results showed that PAL could effectively increase the yield of Tartary buckwheat at 4 500.0 kg/hm2, which was 20.4% more than the control. When lC-SO1 was applied with 1 500.0 kg/hm2 + attapulgite 3 000.0 kg/hm2, the uptake of heavy metals in Tartary buckwheat roots, stems and grains decreased to different degrees, and the uptake of Cu, Zn, Cd and Pb in grains decreased by 23.5%, 23.3%, 43.9% and 61.0%, respectively, which had a positive effect on remediation of heavy metal pollution.

    Key words:Attapulgite;Soil remediation conditioner;Heavy metals;Cultivated land;Buckwheat; Passivation

    百里香(Thymus mongolicus Ronn)別名地椒、千里香、地姜,屬唇形科半灌木。植株矮小,高5~20 cm。匍匐莖平臥,末端多為開花枝。密生多數(shù)平行直立莖,當年生枝紫色,老枝灰色。葉小近無柄,長橢圓形或長方條形,全緣,有側(cè)脈2~3對,具透明腺點,腺點都可分泌濃郁的香氣?;ㄓ屑t、粉紅、淡紫、粉白等多種色彩,小花密集枝端成圓頭狀花序,花具短梗,花冠二唇型,二強雄蕊外露[1 ]。種子極小,無胚乳或少胚乳。4 — 5月為盛花期,6 — 9月常有星星小花點綴綠葉間,許多年份 9 — 10月還有1次盛花期。百里香在歐美各國均有分布,我國天然分布于內(nèi)蒙古、甘肅、陜西、青海、寧夏、新疆、山西、北京、遼寧、吉林、黑龍江等地,為北方鄉(xiāng)土植物,適應(yīng)性強,抗寒抗旱耐高溫。其根系發(fā)達,母株根長超過匍匐莖, 細根如網(wǎng),又有匍匐莖隨處生根,在十分干旱的流沙陽坡風化砂巖上均可正常生長,但在條件稍好土壤中生長更好。喜光也稍耐蔭,但不耐潮濕。

    百里香花色艷麗,香氣怡人,莖匐葉密,如蔓地綠毯,是西北地區(qū)園林綠化的良好材料,可用于營造大面積觀賞性草坪、芳香療養(yǎng)功能性草坪、護坡草坪、花壇、花鏡等,還可用于盆栽裝飾陽臺和屋頂。百里香也是典型的藥用植物,具有解表祛風,行氣止痛,止咳,降壓之功效[2 - 3 ]。百里香整株具有芳香氣味,可作為香料蔬菜、蜜源植物。

    百里香在觀賞、藥用和食用方面的應(yīng)用已引起了人們的廣泛關(guān)注,但其野生資源種群數(shù)量少,作為藥源,近年來人為采挖較為嚴重。為有效保護野生資源,開展百里香的繁育工作勢在必行,而采用扦插、壓條等常規(guī)方式育苗遠遠不能滿足生產(chǎn)的需要,因此開展百里香組織培養(yǎng)和快速繁殖具有十分重要的意義。我們以百里香幼嫩莖段為外植體,對各種誘導(dǎo)因子在不同培養(yǎng)水平上的培養(yǎng)誘導(dǎo)進行了試驗,以獲得其優(yōu)化快繁的最佳效果。

    1? ?材料和方法

    1.1? ?材料

    供試百里香采自甘肅省小隴山林區(qū)。

    1.2? ?試驗方法

    1.2.1? ?外植體材料的處理與接種? ?5月初選晴朗的上午采集當年生幼嫩莖立即運回實驗室,剪去葉片,用清水將表面塵埃沖去,用5 g/kg的洗衣粉溶液浸泡5 min,用清水將表面的洗衣粉液沖洗干凈。然后在超凈工作臺上切成長2~3 cm的莖段,放入廣口瓶中。無菌條件下在廣口瓶中先倒入75%酒精滅菌,搖動30 s,用無菌水沖洗3~5次,加入1 g/kg的升汞溶液分別滅菌120、180、300 s,或用飽和漂白粉上浸液分別滅菌180、300、420 s[4 ],然后用無菌水沖洗5~8次,將處理后的莖段取出放入鋪有無菌濾紙的接種盤中備用。將消毒滅菌后的百里香莖段切去兩端褐化部分,將剩余部分切割成長1.0~1.5 cm的莖段,接種到無激素的MS培養(yǎng)基上,共設(shè)6個處理,每處理10瓶,每瓶接種1塊外植體,重復(fù)3次。接種14 d后檢查污染率與褐變率。

    1.2.2? ?培養(yǎng)條件? ?鑒于百里香組織培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)較嚴重的玻璃化現(xiàn)象[5 ],在初代誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng)基中均加蔗糖5%[5 ],生根培養(yǎng)階段加入蔗糖3%[6 ],各培養(yǎng)基中均加8 g/L瓊脂[5 ],pH 5.6~5.8。培養(yǎng)室溫度為(22±2) ℃,誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)階段,光周期12 h/12 h (光/暗),生根階段16 h/8 h(光/暗);光照強度約2 000 lx,有利于不定芽分化和生根[7 - 9 ]。

    1.2.3? ?不定芽誘導(dǎo)? ? ?將初試培養(yǎng)所得無菌材料剪去粘有原培養(yǎng)基的底部,接種到不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。以MS+0.3 mg/L GA3為基本培養(yǎng)基,采用6-BA與NAA兩因素3水平(6-BA、IBA 各設(shè)計0.1、0.3、0.5 mg/L 3個濃度水平)隨機設(shè)計,共9個處理,每處理10瓶,每瓶接種1個外植體,重復(fù)3次。培養(yǎng)30 d后觀察誘導(dǎo)率和不定芽數(shù)。

    1.2.4? ? 繼代增殖培養(yǎng)? ? ?將初代誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽分割成小芽或小段,轉(zhuǎn)接到不同激素濃度配比的繼代增殖培養(yǎng)基中,進行繼續(xù)分化與增殖培養(yǎng)。試驗選用內(nèi)源激素6-BA和IBA促進不定芽的增殖和生長,6-BA、IBA 各設(shè)計0.1、0.3、0.5 mg/L 3個濃度水平,9個處理組合,每處理10瓶,每瓶接種5個初代不定芽,重復(fù)3次。每7 d觀察記載生長情況1次,40 d后統(tǒng)計不定芽增殖倍數(shù)和生長情況。

    1.2.5? ?生根培養(yǎng)? ?選取繼代增殖培養(yǎng)所得無根芽苗,進行生根誘導(dǎo)試驗。以1/2 MS為基本培養(yǎng)基,選用NAA、IBA和IAA等3種植物生長調(diào)節(jié)劑,NAA、IBA、IAA各設(shè)計0.1、0.2 mg/L 2個濃度水平,共6個處理組合,每處理10瓶,每瓶接種3個無根幼苗,重復(fù)3次。每7 d觀察生根情況1次,30 d后統(tǒng)計生根率和平均生根數(shù)。

    2? ?結(jié)果與分析

    2.1? ?滅菌劑及處理時間對外植體滅菌效果的影響

    結(jié)果表明:75 %酒精滅菌30 s + 飽和漂白粉上浸液滅菌300 s是百里香細嫩莖段外植體較理想的消毒滅菌組合,其褐變率(6.3%)和污染率(5.9 %)均相對較低(表1)。

    2.2? ?生長調(diào)節(jié)劑配比對不定芽誘導(dǎo)的影響

    經(jīng)過消毒處理的嫩莖切段接種于分化培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),不定芽誘導(dǎo)的激素配比見表2。百里香芽苗分化和生長過程中會產(chǎn)生玻璃化現(xiàn)象,在各處理培養(yǎng)基中均加入GA 30.3 mg/L,以抑制玻璃化的產(chǎn)生[5 ]。結(jié)果(表2)表明,6-BA和NAA對不定芽的分化率和平均芽數(shù)有明顯影響,且呈正相關(guān)。但當6-BA大于2.0 mg/L、NAA大于0.3 mg/L時平均芽數(shù)減少,分化時間推遲,不定芽節(jié)間變短??梢姡琈S+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA3 0.3 mg/L為百里香最適合的從生芽分化培養(yǎng)基,分化率達95.25%,平均芽數(shù)10.8個(圖1)。

    2.3? ?生長調(diào)節(jié)劑配比對叢生芽增殖的影響

    將初代培養(yǎng)所得的簇生嫩莖切成長1.0~1.5 cm的小段,轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)28 d后增殖的結(jié)果因激素配比不同而異(表3)。增殖倍數(shù)隨6-BA濃度的增高而增大,但濃度過高會影響芽苗的株高增長,且基部會出現(xiàn)玻璃化苗。綜合分析試驗結(jié)果,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.4 mg/L GA3為百里香增殖培養(yǎng)較理想的培養(yǎng)基組合,增殖倍數(shù)相對較高,為15.11倍,平均株高為4.61 cm(圖2)。

    2.4? ?不同生長調(diào)節(jié)劑配比對叢生芽苗生根的影響

    將叢生芽苗增殖培養(yǎng)繼代后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d后的統(tǒng)計結(jié)果(表4)表明,NAA、IBA和IAA均影響芽苗的生根,但IBA和IAA組合更適合于百里香的生根培養(yǎng),1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L IAA 培養(yǎng)基上的生根率為100%,平均生根數(shù)10.03條(圖3),明顯高于其他處理。將生根試管苗移栽,20 d后成活率達95%。

    3? ?結(jié)論與討論

    在組培快繁試驗中,外植體的選擇和滅菌是整個試驗順利進行的基礎(chǔ)。試驗表明,以百里香當年生幼嫩莖段為外植體時,75%酒精滅菌30 s+飽和漂白粉上浸液滅菌300 s為最佳消毒滅菌組合,其褐變率和污染率都相對較低,分別為6.3%和5.9%。6-BA與NAA對百里香不定芽誘導(dǎo)具有明顯影響。當培養(yǎng)基中6-BA濃度為2.0 mg/L、NAA濃度為0.3 mg/L時,分化率高達95.25 %,平均芽數(shù)10.8個。初代誘導(dǎo)試驗篩選的最佳培養(yǎng)基是MS+2.0 mg/L 6-BA + 0.3 mg/L NAA + 0.3 mg/L GA3(加入0.3 mg/L GA3可有效抑制芽苗玻璃化的產(chǎn)生)。增殖培養(yǎng)較理想的培養(yǎng)基組合是MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L IBA + 0.4 mg/L GA3,增殖倍數(shù)相對較高,為15.11倍,平均株高為4.61 cm。百里香叢生芽苗生根培養(yǎng)的理想培養(yǎng)基為1/2 MS + 0.2 mg/L IBA + 0.1 mg/L IAA,其生根率為100 %,平均生根數(shù)10.03條,再生后的完整植株苗形美觀,色澤深綠,移栽后生長良好,移栽20 d后成活率達95%。

    參考文獻:

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    [8] 裴懷弟,林玉紅,李淑潔,等.? 蘭州百合組培小鱗莖誘導(dǎo)技術(shù)研究[J].? 甘肅農(nóng)業(yè)科技,2019(7):29-32.

    [9] 王春華,孫世海,郭? ?茹,等.? ZT濃度對4個藍莓品種莖段初代培養(yǎng)的影響[J].? 甘肅農(nóng)業(yè)科技,2019(8):4-7.

    (本文責編:鄭立龍)

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