姜帥先,田 野
(1.吉林體育學(xué)院,吉林 長春 130000;2.長春建筑學(xué)院,吉林 長春 130000)
猴頭菇(Hericium erinaceus) 又名猴頭菌,因其子實(shí)體圓而厚,基部狹窄或略有短柄而上部胖大,外形酷似猴頭而得名[1]。猴頭菇菌肉味香鮮嫩,香醇可口,素有“山珍猴頭、海味燕窩”“素中葷”的說法,是我國著名的八大山珍之一,在古代只有皇家貴族才能享用。猴頭菇不僅營養(yǎng)美味,還具有一定的藥用價(jià)值,對(duì)于脾胃氣虛、腹脹痛等胃腸病有很好的療效[2]。目前已經(jīng)有許多的猴頭菇多糖片、猴頭菇粉、猴頭菇膠囊和口服液等藥品,還有猴頭菇餅干、猴頭菇飲料等保健品。這主要利用猴頭菇提取液含有的多糖、多肽類物質(zhì)和豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸和磷、維生素等營養(yǎng)元素[3]。
職業(yè)運(yùn)動(dòng)員應(yīng)該是健康、強(qiáng)壯的代表,但對(duì)于運(yùn)動(dòng)員來說,日常的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練讓他們的身體和心理都長期處理一個(gè)疲勞狀態(tài)。一方面,身體的免疫系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生壓迫,造成“免疫抑制”,而運(yùn)動(dòng)員在劇烈運(yùn)動(dòng)后會(huì)有一個(gè)疲勞窗口期,很容易導(dǎo)致免疫力下降,反而更容易受到病菌的感染[4]。同時(shí),過度的運(yùn)動(dòng)會(huì)對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生短暫的抑制作用;另一方面,長時(shí)間運(yùn)動(dòng)身體的肌肉骨骼時(shí)常會(huì)有疲勞損傷,引起的抗炎癥反應(yīng)也削弱了抵抗細(xì)菌或病毒的能力,這種疲勞就是運(yùn)動(dòng)性疲勞。而猴頭菇提取液中含有的有效成份,可以有效清除人體內(nèi)多余的自由基,修復(fù)受損運(yùn)動(dòng)細(xì)胞,減輕運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的抗炎癥反應(yīng)[5]。已有研究表明,猴頭菇提取液具有很強(qiáng)的抗氧化和抗疲勞作用,可以抵御因運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的炎癥和疲勞,促進(jìn)身體自身免疫力的提升,加速運(yùn)動(dòng)組織的修復(fù)和再生[6]。通過對(duì)猴頭菇在抗運(yùn)動(dòng)性疲勞方面的研究,進(jìn)一步探討猴頭菇的食藥用功效。
猴頭菇干品,古田縣勝峰食用菌有限公司(勝峰品牌;猴頭菇菇體直徑≥9 cm;水分≤85%;雜質(zhì)≤0.1%)。無水乙醇、丙酮、蒸餾水(分析純),開封東大化工有限公司試劑廠;丙二醛(MDA)試劑盒、超氧化物岐化酶(SOD)試劑盒均,上海哈靈生物科技有限公司。
FW100實(shí)驗(yàn)室高速微型粉碎機(jī),天津市泰斯特儀器有限公司;TGL16M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),湖南凱達(dá)離心機(jī)廠;202-00BA電熱恒溫干燥箱,南京曉曉儀器設(shè)備有限公司;RHTQ-G型超聲波輔助提取設(shè)備,濟(jì)寧榮匯超聲波設(shè)備有限公司;AU680全自動(dòng)生化分析儀,貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司。
猴頭菇有效成份主要是多糖、多酚、多肽等大分子結(jié)構(gòu)物質(zhì),屬于水溶性成分,因此常用的提取方法有熱水浸提、回流、超聲浸提、乙醇提取等[7]。具體的操作方法如下。
猴頭菇干品清洗后60℃烘干30 min,粉碎過80目篩后與蒸餾水按料液比為1∶10充分混合,制成猴頭菇干粉懸浮液,放入超聲波輔助提取設(shè)備,在80 KHz聲頻下80℃連續(xù)提取3 h,上離心機(jī)在4 000 r·min-1下離心15 min,取上清液在60℃下濃縮至5倍體積。繼續(xù)在濃縮液中加入3倍體積的95%的乙醇靜置24 h后收集乙醇沉淀物,再依次用75%乙醇、無水乙醇、丙酮濾洗兩次后,60℃下烘干直到呈干燥粉末狀,得猴頭菇有效成份提取物。
試驗(yàn)選用同一批次鼠齡一致的SPF級(jí)小鼠40只,由常州卡文斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供,生產(chǎn)許可證編號(hào):SCXK(蘇) 2016-0010。分籠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,自由飲食和飲水、動(dòng)物房飼育室溫度25℃、相對(duì)濕度50%、12 h交替照明。適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后稱重記錄分組,每組10只小鼠。高劑量組每日定時(shí)經(jīng)口給小鼠灌胃1次劑量為400 mg·kg-1BW的猴頭菇提取液;中劑量組每日定時(shí)經(jīng)口給小鼠灌胃1次劑量為200 mg·kg-1BW的猴頭菇提取液;低劑量組每日定時(shí)經(jīng)口給小鼠灌胃1次劑量為100 mg·kg-1BW的猴頭菇提取液;空白對(duì)照組灌胃同樣體積生理鹽水,連續(xù)灌胃30 d。每周記錄小鼠的體重變化。
1.3.1 小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)
在末次灌胃前一天對(duì)每組小鼠進(jìn)行力竭游泳試驗(yàn)。小鼠放入水槽中迫使其游泳,觀察并記錄小鼠從入水到沉入水面下10 s后的時(shí)間,作為小鼠力竭游泳時(shí)間。剔除力竭游泳時(shí)間差異過大的小鼠,在末次灌胃1 h后,將每組篩選出的小鼠進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)。在小鼠尾部系5%~10%體重的重物,先將小鼠全身放入水槽浸濕后松開記錄時(shí)間。記錄到小鼠沉入水面下7 s~10 s的時(shí)間即為負(fù)重游泳時(shí)間,水槽水溫控制在25℃左右。
1.3.2 小鼠抗氧化試驗(yàn)
小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)結(jié)束后,將小鼠擦干,摘取小鼠眼球后在眼眶處采血并分離血清。采用分光光度法測定按照丙二醛(MDA)試劑盒和超氧化物歧化酶(SOD) 試劑盒說明,測定丙二醛含量和總超氧化物歧化酶活力。
1.3.3 小鼠血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮檢測
將采集的血樣用生化分析儀進(jìn)行血液指標(biāo)檢測,主要進(jìn)行血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮含量檢測。
小鼠體重變化結(jié)果見表1。
表1 猴頭菇提取液對(duì)小鼠體重的影響Tab.1 Effect of Hericium erinaceus extract on body weight of mice
由表1可知,經(jīng)過4周的飼養(yǎng),灌胃高劑量、中劑量、低劑量猴頭菇提取液的小鼠體重與對(duì)照組相比均有明顯的增加。3個(gè)劑量組小鼠平均增重44.12 g,與灌胃生理鹽水的對(duì)照組相比增加了14.84%;試驗(yàn)結(jié)果顯示,小鼠增加的重量與灌胃的劑量并沒有量價(jià)關(guān)系,增重幅度相差不大。
小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2 猴頭菇提取液對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響Tab.2 Effect of Hericium erinaceus extract on weight-bearing swimming time in mice
由表2可知,灌胃3種劑量猴頭菇提取液的試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,小鼠的平均負(fù)重游泳時(shí)間都有增加,其中高劑量組對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響最大,與對(duì)照組相比提升了40.28%。灌胃3種劑量猴頭菇提取液的小鼠平均負(fù)重游泳時(shí)間為111.87 min,與對(duì)照組相比提升了26.16%;猴頭菇提取液的灌胃劑量與負(fù)重游泳時(shí)間呈一定的正比量價(jià)關(guān)系。
小鼠抗氧化試驗(yàn)結(jié)果見表3。
表3 猴頭菇提取液對(duì)小鼠抗氧化能力的影響Tab.3 Effect of Hericium erinaceus extract on antioxidant capacity of mice
由表3可知,低劑量組、中劑量組與對(duì)照組相比,丙二醛含量均有所上升,中劑量組略高于低劑量組;但高劑量組的丙二醛含量下降明顯,高劑量組與對(duì)照組相比丙二醛含量下降了17.77%。高劑量組、中劑量組、低劑量組與對(duì)照組相比超氧化物歧化酶含量均有所上升,中劑量組上升幅度為27.78%;而高劑量組上升幅度達(dá)59.36%,并且猴頭菇提取液的灌胃劑量與超氧化物歧化酶含量呈一定的正比量價(jià)關(guān)系。
小鼠血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮檢測結(jié)果見表4。
表4 猴頭菇提取液對(duì)小鼠血乳酸含量的影響Tab.4 Effect of Hericium erinaceus extract on LD content in mice
由表4可知:1)3個(gè)劑量組小鼠血乳酸含量與對(duì)照組相比均有明顯的下降,分別下降了46.50%、27.90%和16.87%,并且猴頭菇提取液的灌胃劑量與血乳酸含量呈一定的反比量價(jià)關(guān)系。2) 3個(gè)劑量組小鼠肌酸激酶含量與對(duì)照組相比均有明顯的下降,其中高劑量組與對(duì)照組相比下降了32.74%;而中劑量組、低劑量組與對(duì)照組相比分別下降了18.26%和19.63%,相差不大。3)3個(gè)劑量組小鼠血尿素氮含量與對(duì)照組相比均有明顯的上升,而低劑量組反而出現(xiàn)下降。其中高劑量組、中劑量組與對(duì)照組相比分別上升了41.87%和13.23%,而低劑量組與對(duì)照組相比反而下降了19.09%。
通過連續(xù)30 d給小鼠灌胃猴頭菇提取液,小鼠的體重均有明顯的增加。分析其原因是猴頭菇提取液中含有的豐富蛋白質(zhì)和氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì),可以有效補(bǔ)充小鼠的運(yùn)動(dòng)營養(yǎng)需求。運(yùn)動(dòng)會(huì)燃燒機(jī)體的糖等能量,一旦運(yùn)動(dòng)量過大,機(jī)體就會(huì)消耗蛋白質(zhì)來彌補(bǔ)糖類消費(fèi)量,就會(huì)造成蛋白質(zhì)流失引起體重下降。而額外補(bǔ)充蛋白質(zhì),可以為機(jī)體提供更多的能量來源。同時(shí),蛋白質(zhì)是肌肉細(xì)胞生長和修復(fù)的重要物質(zhì)。補(bǔ)充足量的蛋白質(zhì)可以有效增加肌肉生長速度;同時(shí),猴頭菇提取液中含有的維生素和礦物質(zhì)也可以提高進(jìn)食的營養(yǎng)物質(zhì)利用率,讓機(jī)體吸收更好的營養(yǎng)。消減運(yùn)動(dòng)疲勞給機(jī)體帶來的肌肉流失,提高機(jī)體的免疫力和抗疲勞能力。