c(RGDyk)環(huán)肽修飾的脂質(zhì)體包載量子點(diǎn)熒光成像腦膠質(zhì)瘤引導(dǎo)手術(shù)精準(zhǔn)切除效果評(píng)價(jià)

吳釗航，董偉杰，薛鵬鵬，左佳怡，王麗芬，袁健東，徐荷林

（1.溫州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 溫州 325035；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 骨外科，浙江 溫州 325015）

腦膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)中常見的疾病之一，易于轉(zhuǎn)移并且難以治療，表現(xiàn)出較高的復(fù)發(fā)率和病死率，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的功能具有很大的危害[1]。腦膠質(zhì)瘤的治療至今沿用傳統(tǒng)的外科手術(shù)+藥物治療+經(jīng)顱放療綜合治療模式。但由于腦膠質(zhì)瘤具有侵襲和轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)，手術(shù)時(shí)腫瘤邊界難以精確定位導(dǎo)致手術(shù)切除不徹底，致使微小病灶殘留[2]。術(shù)后微小病灶的殘留是導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)、預(yù)后不良的重要原因。因此準(zhǔn)確識(shí)別原發(fā)性神經(jīng)膠質(zhì)瘤邊界和轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞不僅是完全切除的主要因素，還是預(yù)防神經(jīng)膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素[3]。

術(shù)中MRI成像、近紅外熒光成像以及多種方式相結(jié)合的多模態(tài)成像可使原發(fā)性腫瘤病灶可視化，精準(zhǔn)定位轉(zhuǎn)移性微小腫瘤結(jié)節(jié)，引導(dǎo)腫瘤精準(zhǔn)切 除[4-5]。無論是發(fā)光腫瘤模型還是手術(shù)前造影劑標(biāo)記腫瘤模型，均證明成像引導(dǎo)的手術(shù)切除相比自然光下的標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)在提高腫瘤切除完全率，降低腫瘤復(fù)發(fā)率以及提高患者術(shù)后存活率等方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)，近年來受到廣泛關(guān)注。DOGLIETTO等[6]結(jié)合熒光物質(zhì)5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）和高清晰度的三維立體鏡，用于神經(jīng)膠質(zhì)瘤手術(shù)切除。盡管許多研究已經(jīng)使用諸如5-ALA和熒光素鈉之類的熒光物質(zhì)來指導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的切除，但是仍然存在一些問題如熒光穩(wěn)定性差和熒光效率低等[7]。

量子點(diǎn)（quantum dots，QDs）具有良好的熒光信號(hào)和穩(wěn)定性，較寬的激發(fā)光譜和較窄的發(fā)射光譜，并已應(yīng)用于標(biāo)記特異性細(xì)胞和組織以實(shí)現(xiàn)多色生物成像[8-10]。但QDs由于其理化特性容易受到環(huán)境影響從而導(dǎo)致細(xì)胞毒性，這使得其應(yīng)用受到限制[11]。研究發(fā)現(xiàn)將QDs與脂質(zhì)體相結(jié)合，不僅改善了QDs的穩(wěn)定性，使其能保持熒光，還大大降低了其生物毒性[12]，而且還可以對(duì)載體進(jìn)行修飾，使其能夠靶向作用在腫瘤區(qū)域，提高其成像精確度。神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞表達(dá)αvβ3整合素，可以與含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列短肽特異性結(jié)合[13]。相比之 下，RGDyk環(huán)肽對(duì)αvβ3整合素具有更強(qiáng)的親和力和更高的特異性，已被眾多研究用作靶向配基來修飾納米藥物載體[14-15]。本研究擬以靶向腦膠質(zhì)瘤的RGDyk環(huán)肽修飾脂質(zhì)體包載QDs，用于腦膠質(zhì)瘤的精準(zhǔn)成像，實(shí)現(xiàn)術(shù)中熒光成像引導(dǎo)的腫瘤精準(zhǔn)切除。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑 氫化大豆磷脂（HSPC）、二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇-氨基（DSPE-PEG-NH2）、膽固醇購自上海艾維特公司；c(RGDyk)環(huán)肽購自上海吉爾生化多肽公司；ZnCdSe/ZnS量子點(diǎn)購自武漢伽源量子點(diǎn)公司；N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）購自上海阿拉丁公司；2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽（CCK-8）購自日本株式會(huì)社同仁化學(xué)研究所；PC12和C6細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所；DMEM培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)液、胰酶、胎牛血清購自美國GIBCO公司。

1.2 方法

1.2.1 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體制備：稱取85 mg HSPC，5 mg DSPE-PEG-NH2和10 mg膽固醇至25 mL圓底燒瓶中，加入10 mL乙醚，600 r/min 攪拌使溶解后，至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40 ℃蒸除乙醚，形成均勻的脂質(zhì)膜后，將一定量的QDs添加到適量磷酸鹽緩沖液（PBS pH 7.4）加入上述脂質(zhì)膜中，旋轉(zhuǎn)洗膜，用超聲波發(fā)生器在300 W超聲30 min后，即可得到多室脂質(zhì)體混懸液，分別依次過400 nm和100 nm碳酸酯膜擠出整粒，得到平均粒徑100 nm以下的小單室脂質(zhì)體。c(RGDyk)環(huán)肽溶液在室溫下經(jīng)EDC/NHS活化后，加入至上述單室脂質(zhì)體混懸液中，輕輕攪拌反應(yīng)4 h，超濾除去縮合劑以及未反應(yīng)的c(RGDyk)環(huán)肽，即可得到c(RGDyk)環(huán)肽修飾的量子點(diǎn)脂質(zhì)體[QDs-c(RGDyk)-Lip]。

1.2.2 粒徑以及形態(tài)：動(dòng)態(tài)光散射激光粒度測(cè)定儀（LitesizerTM 500，奧地利安東帕公司）對(duì)游離的QDs以及c(RGDyk)環(huán)肽修飾的量子點(diǎn)脂質(zhì)體進(jìn)行粒徑和Zeta電位的測(cè)定。樣品經(jīng)過適當(dāng)稀釋后，于常溫條件下固定激光波長(zhǎng)為632.8 nm，散射角為90°測(cè)定其粒徑以及Zeta電位。透射電鏡（transmission electron microscope，TEM）檢測(cè)游離的QDs以及c(RGDyk)環(huán)肽修飾的量子點(diǎn)脂質(zhì)體形態(tài)。取樣品滴于鋪有碳膜的銅網(wǎng)上，以無纖維濾紙從銅網(wǎng)邊緣吸掉多余液體，滴入2%磷鎢酸染色，自然晾干2 d，以200 kV加速電壓，TEM（JEM1200EX，日本JEOL公司）檢視并拍照。

1.2.3 熒光光譜：熒光分光光度計(jì)（RF-6000，日本Shimadzu公司）對(duì)游離的QDs以及c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體進(jìn)行熒光發(fā)射光譜分析。激發(fā)波長(zhǎng)設(shè)置為450 nm，在500～800 nm發(fā)射波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，掃描間隔為1.0 nm，掃描速度為2 000 nm/min。 QDs-c(RGDyk)-Lip與含有10% FBS的pH 7.4 PBS在37 ℃孵育不同時(shí)間后，固定激發(fā)波長(zhǎng)為450 nm，檢測(cè)發(fā)射波長(zhǎng)610 nm處的熒光強(qiáng)度變化，檢測(cè)其在生理相關(guān)介質(zhì)中的熒光穩(wěn)定性。

1.2.4 細(xì)胞毒性：體外CCK-8法評(píng)估QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)正常PC12神經(jīng)細(xì)胞以及C6腫瘤細(xì)胞的毒性。C6細(xì)胞在含有10%胎牛血清、青霉素（100 U/mL）、 鏈霉素（100 μg/mL）以及谷氨酰胺（2 mmol/L）的RPMI 1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；PC12細(xì)胞則利用DMEM高葡萄糖培養(yǎng)液培養(yǎng)；細(xì)胞放入37 ℃、5% CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。將PC12細(xì)胞或C6細(xì)胞接種到裝有100 μL培養(yǎng)基的96孔板（每孔3×103）中培養(yǎng)過夜。然后，加入含有QDs-c(RGDyk)-Lip的培養(yǎng)基，進(jìn)一步培養(yǎng)24 h或48 h，PBS洗滌2次，加入10 μL CCK-8，置培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育2 h，酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度。按照如下公式計(jì)算細(xì)胞的存活率（%）。細(xì)胞存活率（%）=[（A加藥－A空白）÷（A0加藥－ A空白）]×100%。A加藥：具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度；A空白：具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度；A0加藥：具有細(xì)胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度。

1.2.5 腫瘤細(xì)胞靶向性：C6細(xì)胞以每孔1×106個(gè)細(xì)胞的密度接種在6孔板的蓋玻片上，培養(yǎng)箱內(nèi)孵育過夜。加入含有游離QDs（30 nmol/L）或 QDs-c(RGDyk)-Lip（相對(duì)應(yīng)QDs濃度為30 nmol/L）的培養(yǎng)基，孵育2 h，冷PBS沖洗，DAPI（1 mg/mL）染色，熒光顯微鏡（尼康，日本）觀察。為了證明QDs-c(RGDyk)-Lip的c(RGDyk)靶向性，貼壁C6細(xì)胞預(yù)先用游離的c(RGDyk)孵育2 h，后加入含有QDsc(RGDyk)-Lip（相對(duì)應(yīng)QDs濃度為30 nmol/L）的培養(yǎng)基孵育2 h，觀察細(xì)胞熒光強(qiáng)度變化。

1.2.6 體內(nèi)靶向性：按照文獻(xiàn)方法[16]建立C6腦膠質(zhì)瘤大鼠模型。荷瘤大鼠6只分為2組，每組3只，分別尾靜脈注射游離QDs溶液（50 nmol/L）和QDsc(RGDyk)-Lip（相當(dāng)于QDs濃度為50 nmol/L）。2 h 后，將荷瘤大鼠處死，0.9%氯化鈉溶液心臟灌流后，分離出荷瘤大腦，放置在活體成像儀內(nèi)進(jìn)行離體熒光成像。同時(shí)，荷瘤大腦進(jìn)行冰凍切片，DAPI染色 后，置熒光顯微鏡下觀察組織熒光分布。

1.2.7 熒光引導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤精準(zhǔn)切除：荷瘤大鼠6只分為2組，每組3只，分為熒光引導(dǎo)手術(shù)組和白光手術(shù)組。熒光引導(dǎo)手術(shù)組靜脈注射QDs-c(RGDyk)-Lip（相當(dāng)于QDs濃度為50 nmol/L）2 h后，麻醉大鼠，乙醇皮膚消毒，在腫瘤上方行一個(gè)約1.5 cm的切口，在暗室激光照射腦組織造成熒光手術(shù)環(huán)境，在顯微鏡下用顯微鏡的鑷子和剪刀手術(shù)切除。白光手術(shù)組荷瘤大鼠直接在白光下開顱，實(shí)行腫瘤切除。為了評(píng)估手術(shù)邊緣是否存在殘留的神經(jīng)膠質(zhì)瘤病變組織，從手術(shù)邊緣提取厚度為3 mm的活檢樣本，并用4%多聚甲醛固定以進(jìn)行HE染色。

2 結(jié)果

2.1 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體的制備與表征 ZnCdSe/ZnS的QDs具有較高的毒性，本實(shí)驗(yàn)以氫化大豆磷脂，二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基和膽固醇為材料，采用逆向蒸發(fā)法制備包載QDs的脂質(zhì)體。后經(jīng)EDC/NHS介導(dǎo)的縮合反應(yīng)，將RGDyk環(huán)肽與QDs-Lip表面氨基鍵合，制備c(RGDyk)環(huán)肽修飾的量子點(diǎn)脂質(zhì)體（QDs-c(RGDyk)-Lip）。動(dòng)態(tài)光散射（dynamic light scatting，DLS）以及TEM技術(shù)對(duì)QDs-(RGDyk)-Lip進(jìn)行了粒徑與形態(tài)表征，結(jié)果如圖1所示。DLS結(jié)果顯示，游離QDs的粒徑約為35 nm，而QDs-(RGDyk)-Lip粒徑增大為175 nm，且分布較為集中（PDI=0.12）。TEM結(jié)果顯示，游離QDs呈稀疏的點(diǎn)狀分布，其大小同DLS結(jié)果相近；而QDs-(RGDyk)-Lip則呈囊泡狀，且其中心可見數(shù)個(gè)微小QDs聚集，表明QDs有效包裹在脂質(zhì)體內(nèi)。

圖1 游離量子點(diǎn)（A、C）和QDs-(RGDyk)-Lip（B、D）粒徑分布與TEM形態(tài)

2.2 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體的穩(wěn)定性 RGDyk環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體在白光下，呈淺粉紅色渾濁液，而在405 nm紫外光照射下，則發(fā)射出強(qiáng)的紫紅色熒光，見圖2A。對(duì)其發(fā)射熒光進(jìn)行光譜掃描（見圖2B），游離QDs和QDs-(RGDyk)-Lip均顯示出在610 nm處的最大發(fā)射波長(zhǎng)，而且由于包裹后聚集誘導(dǎo)熒光發(fā)射效應(yīng)，QDs-(RGDyk)-Lip熒光強(qiáng)度較游離QDs略增強(qiáng)。這些特性表明QDs包載在脂質(zhì)體后，其熒光發(fā)射特性不受損害。為了考察QDs-(RGDyk)-Lip在生理相關(guān)介質(zhì)中的穩(wěn)定性，QDs-(RGDyk)-Lip與含有10% FBS的pH 7.4 PBS于37 ℃孵育不同時(shí)間后，檢測(cè)其在610 nm處熒光強(qiáng)度以及粒徑變化（見圖2C-D），游離QDs在孵育過程中，其熒光強(qiáng)度逐漸降低，48 h孵育后降低20%，而QDs-(RGDyk)-Lip則在整個(gè)檢測(cè)時(shí)間內(nèi)熒光強(qiáng)度沒有發(fā)生明顯改變，48 h 孵育后，熒光強(qiáng)度僅僅5%降低，這表明脂質(zhì)體包裹能提高量子點(diǎn)熒光穩(wěn)定性，同時(shí)，QDs-(RGDyk)-Lip整個(gè)孵育過程中未見明顯的粒徑及粒徑分布指數(shù)（particle distribution index，PDI）改變，進(jìn)一步說明QDs-(RGDyk)-Lip在生理相關(guān)介質(zhì)中的穩(wěn)定性。

2.3 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn) QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)正常PC12細(xì)胞以及C6腫瘤細(xì)胞株均展現(xiàn)出劑量依賴性的微弱細(xì)胞毒性，而且C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞相比PC12細(xì)胞具有更高的敏感性，見圖3。孵育24 h后，QDs-c(RGDyk)-Lip在5～60 μg/mL濃度范圍內(nèi)對(duì)PC12幾乎無細(xì)胞毒性，在濃度80～100 μg/mL展現(xiàn)出略微微弱的毒性。而QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)C6細(xì)胞，在濃度為40 μg/mL 時(shí)能觀察到對(duì)細(xì)胞的損傷，當(dāng)濃度為100 μg/mL時(shí)，細(xì)胞的存活率約為82%。孵育48 h后，QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)2種細(xì)胞株展現(xiàn)出相似的趨勢(shì)，但與24 h結(jié)果相比，沒有顯著增大。相比PC12細(xì)胞，QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有更高的細(xì)胞毒性可能是因?yàn)镃6細(xì)胞表面更高的αvβ3整合素受體表達(dá)，促進(jìn)更多的QDs攝取進(jìn)入細(xì)胞。

2.4 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體體對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的靶向性成像 C6細(xì)胞與QDs或QDs-(RGDyk)-Lip孵育2 h后，激光共聚焦顯微鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行顯像，見圖4。游離QDs處理細(xì)胞僅在細(xì)胞外緣顯示出微弱的紅色熒光，而QDs-c(RGDyk)-Lip處理的細(xì)胞周圍顯示出強(qiáng)的紅色熒光，而且能清晰顯示其細(xì)胞質(zhì)骨架，表明QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)C6細(xì)胞特異靶向性。C6細(xì)胞表面整合素受體預(yù)先用游離c(RGDyk)飽和后，評(píng)價(jià)其對(duì)QDs-c(RGDyk)-Lip攝取變化，結(jié)果顯示，與QDs-c(RGDyk)-Lip相比，游離c(RGDyk)+QDs-(RGDyk)-Lip處理組細(xì)胞熒光明顯降低，僅在細(xì)胞外緣表面顯示微弱紅色熒光，表明QDs-(RGDyk)-Lip的靶向性與C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞膜表面的整合素有關(guān)。

圖2 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的量子點(diǎn)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性

圖3 QDs-(RGDyk)-Lip對(duì)C6和PC12的細(xì)胞毒性

2.5 c(RGDyk)環(huán)肽修飾的QDs脂質(zhì)體體內(nèi)腫瘤靶向性 離體熒光成像結(jié)果顯示，游離QDs組大鼠的腦組織觀察到微弱的紅色背景信號(hào)，但腫瘤組織區(qū)域（黃色虛線標(biāo)注）熒光信號(hào)并未強(qiáng)于背景熒光，表明游離的QDs無法向膠質(zhì)瘤組織聚集。相比之下，QDsc(RGDyk)-Lip組大鼠腦組織腫瘤區(qū)域則顯示出強(qiáng)的熒光信號(hào)，明顯高于周邊正常組織產(chǎn)生的背景熒光，表明QDs-c(RGDyk)-Lip靜脈注射后特異分布在腦膠質(zhì)瘤組織，展現(xiàn)出體內(nèi)特異腫瘤靶向性。離體荷瘤大腦進(jìn)一步進(jìn)行冰凍切片，激光共聚焦觀察發(fā)現(xiàn)，游離QDs組腦組織無論在腫瘤區(qū)域（T）還是腦實(shí)質(zhì)區(qū)域（P）均無QDs有關(guān)的紅色熒光信號(hào)，與離體成像結(jié)果一致。相比之下，QDs-(RGDyk)-Lip組大腦組織僅僅在腫瘤區(qū)域（T）內(nèi)展示出強(qiáng)的QDs有關(guān)的紅色熒光，在腦實(shí)質(zhì)區(qū)域（P）未見有熒光，表明QDs-(RGDyk)-Lip能精確定位在膠質(zhì)瘤區(qū)域。見圖5。

2.6 熒光成像引導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤大鼠腫瘤精準(zhǔn)切除 術(shù)中腫瘤區(qū)域顯像如圖6所示，在手術(shù)切除前的明視野圖像中，熒光引導(dǎo)手術(shù)組和白光手術(shù)組均可觀察到明顯的神經(jīng)膠質(zhì)瘤區(qū)，但在白光下只能觀察到模糊的腫瘤區(qū)域，而在熒光下可以觀察到腫瘤與腦實(shí)質(zhì)間清晰的邊界。白光手術(shù)組的神經(jīng)膠質(zhì)瘤大鼠腫瘤實(shí)行經(jīng)驗(yàn)式切除，熒光引導(dǎo)手術(shù)組的神經(jīng)膠質(zhì)瘤大鼠進(jìn)行熒光引導(dǎo)腫瘤切除，直到在腫瘤區(qū)未觀察到熒光信號(hào)為止。手術(shù)切除后，取切口邊緣 3 mm厚的組織進(jìn)行切片，HE染色，評(píng)價(jià)手術(shù)切除的效果。結(jié)果顯示，白光手術(shù)組切除的活檢樣本在正常的腦實(shí)質(zhì)（P）邊緣觀察到了殘留的神經(jīng)膠質(zhì)瘤（T），能觀察到明顯的殘留腫瘤組織，而熒光引導(dǎo)手術(shù)組的活檢樣本在切口邊緣（黃色虛線所示）未見有殘留的腫瘤組織，表明QDs-c(RGDyk)-Lip對(duì)腦膠質(zhì)瘤熒光成像能引導(dǎo)術(shù)中腫瘤精準(zhǔn)切除。

3 結(jié)論

由于顱內(nèi)腫瘤的過度生長(zhǎng)及其邊界模糊，手術(shù)難以完全切除是導(dǎo)致腦膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的重要原因。準(zhǔn)確定位腫瘤邊界實(shí)行精準(zhǔn)切除是目前腦膠質(zhì)瘤手術(shù)治療成功與否的關(guān)鍵。有許多成像技術(shù)可以幫助最大程度地切除腫瘤。如手術(shù)前經(jīng)顱磁刺激和彌散張量成像檢查，以及手術(shù)中的超聲導(dǎo)航和直接皮層刺激導(dǎo)航等都能定位腫瘤邊界，引導(dǎo)手術(shù)切除[17]。但由于這些技術(shù)的成本高、可操作性差以及檢測(cè)靈敏性低等局限，尚未在臨床上廣泛使用。熒光成像引導(dǎo)的手術(shù)切除在提高腫瘤切除完全率，降低腫瘤復(fù)發(fā)以及提高患者術(shù)后存活率等方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)，近年來受到臨床外科醫(yī)師廣泛關(guān)注[18]。本研究構(gòu)建了c(RGDyk)環(huán)肽修飾的脂質(zhì)體包載QDs，并對(duì)其粒徑、形態(tài)以及熒光發(fā)射性質(zhì)進(jìn)行了表征，評(píng)價(jià)了其體內(nèi)外對(duì)腦膠質(zhì)瘤的成像可行性以及術(shù)中熒光成像引導(dǎo)腫瘤切除的精準(zhǔn)性。結(jié)果表明，QDsc(RGDyk)-Lip粒徑大小為175 nm，在生理相關(guān)介質(zhì)中具有良好的粒徑與熒光穩(wěn)定性；QDs-(RGDyk)-Lip體外不但對(duì)PC12腦神經(jīng)細(xì)胞具有低毒性，而且可以有效地靶向C6腫瘤使其熒光顯像。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明QDs-c(RGDyk)-Lip靜脈注射后能高效地靶向原位荷瘤大鼠腦膠質(zhì)瘤，使其發(fā)射強(qiáng)熒光引導(dǎo)手術(shù)精準(zhǔn)切除。

圖6 荷瘤大鼠靜脈注射QDs-(RGDyk)-Lip后實(shí)行熒光成像手術(shù)及術(shù)后切口邊緣HE染色（×200）