制備冷沉淀凝血因子的新鮮冰凍血漿的質(zhì)量優(yōu)化

張福　涂源泉　陳均　杜霞

【摘 要】目的：對比全血采集后于不同儲存時間內(nèi)完成制備的新鮮冰凍血漿中纖維蛋白原（FIB）以及Ⅷ因子（FⅧ）的變化，探索制備新鮮冰凍血漿的最佳條件。方法：從采血起算，選取60例于4℃條件儲存并分別于6～8h、8～10h、10～12h、12～14h、14～16h、16～18h內(nèi)完成制備的新鮮冰凍血漿，檢測其FIB、FⅧ水平。結(jié)果：4℃條件下，儲存時間延長，血漿中FIB、FⅧ水平不斷降低，F(xiàn)Ⅷ下降在12～14h變化開始明顯（P<0.05），F(xiàn)IB在14～16h開始發(fā)生顯著變化（P<0.05）。結(jié)論：4℃條件下儲存時間在12h內(nèi)完成制備的新鮮冰凍血漿中FIB、FⅧ水平更高，適合制備冷沉淀凝血因子。

【關(guān)鍵詞】冷沉淀凝血因子;新鮮冰凍血漿;質(zhì)量優(yōu)化

【中圖分類號】R446.11 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-6851（2020）10--02

冷沉淀凝血因子，是通過特殊方式，將新鮮血漿（在保存期中）融化（溫度為1～6℃），促使大多數(shù)血漿得以分離，并將其他未能溶解的物質(zhì)，通過速凍，在1h中形成固態(tài)成分血，其能夠治療由于缺乏纖維蛋白原以及Ⅷ因子而導(dǎo)致的出血不止以及血友病。冷沉淀凝血因子主要適用于兒童以及成人輕型甲型血友病、血管性血友病等。冷沉淀凝血因子制備過程復(fù)雜，其影響因素較多，為優(yōu)化冷沉淀凝血因子質(zhì)量，需對影響血漿不穩(wěn)定性凝血因子活性的因素進(jìn)行分析[1]。本研究就制備冷沉淀凝血因子的新鮮冰凍血漿的質(zhì)量優(yōu)化做出如下研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究按照GB18469-2012要求采集全血樣本。采集時長：400ml不超過13分鐘。采集血液后4000r/min 離心處理6分鐘，分離血漿至轉(zhuǎn)移袋，離心溫度與實驗組儲存溫度相同，血液保存液為CPDA。

1.2 儀器與試劑

本次研究中采用的儀器主要包括：低溫KJX-IA型冰凍血漿解凍箱、美國儀器實驗室公司（Instrumentation Laboratory）ACL ELITE全自動凝血分析儀。試劑：美國儀器實驗室公司（Instrumentation Laboratory）因子Ⅷ缺乏血漿測定試劑盒（凝固法）、活化部分凝血活酶時間測定試劑盒（凝固法）、纖維蛋白原測定試劑盒（凝固法）、正常值血凝試劑質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、凝血分析用稀釋液、清洗液。

1.3 方法

隨機(jī)留取全血采集后于4℃條件儲存并分別于6～8h、8～10h、10～12h、12～14h、14～16h、16～18h內(nèi)完成制備的新鮮冰凍血漿各10份，分為6組，分別測量FIB、FⅧ水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 21.0分析，計量資料t檢驗，計數(shù)資料 檢驗，P<0.05為顯著性差異。

2 結(jié)果

4℃條件下，隨儲存時間延長，血漿FIB、FⅧ水平不斷降低，F(xiàn)Ⅷ下降在12～14h開始發(fā)生顯著變化（t=1.713，P=0.045），F(xiàn)IB在14～16h開始發(fā)生顯著變化（t=1.745，P=0.042）。見表1。

3 討論

冷沉淀凝血因子技術(shù)在幾年來得到了廣泛應(yīng)用，且冷沉淀凝血因子近年來在臨床中應(yīng)用不斷增多，其制備工作也得到人們的普遍重視，制備量呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。新鮮冰凍血漿，指的是在采集值周，于冷藏環(huán)境中儲存，屬于全血狀態(tài)，在臨床中，最好能夠在6～8h之內(nèi)，最長在18h之內(nèi)，對血漿進(jìn)行分離，獲取速凍固態(tài)成分血。在實施冷沉淀凝血因子的制作之前，需進(jìn)行全血分離，其有效成分內(nèi)，F(xiàn)Ⅷ含量容易波動，極易受到保存溫度、保存時間等因素的影響。因此，需對上述因素進(jìn)行分析，選擇出更適合制備冷這一物質(zhì)最適宜的時間以及溫度[2-3]。本研究結(jié)果指出，4℃條件下，儲存時間延長，血漿FIB、FⅧ水平不斷降低，F(xiàn)Ⅷ下降在12～14h開始發(fā)生顯著變化，F(xiàn)IB在14～16h開始發(fā)生顯著變化，這提示不同儲存時間下血漿FIB、FⅧ水平不一，需選取合適時間以及溫度制備冷沉淀凝血因子。

綜上所述，全血采集后于4℃條件儲存，12h內(nèi)完成制備的新鮮冰凍血漿中FIB、FⅧ水平更高，適合制備冷沉淀凝血因子。

參考文獻(xiàn)

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陳國成，尹寧北，李海東.自體富血小板血漿在齒槽嵴裂修復(fù)中的應(yīng)用[J].中華整形外科雜志，2019，35（7）：706-709.

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