艷山姜提取物對急性胃潰瘍模型小鼠的保護(hù)作用研究

魏晴 梁珊珊 熊瑞 魏娜 薛娟

摘 要 目的：探討艷山姜提取物對急性胃潰瘍模型小鼠的保護(hù)作用。方法：取小鼠48只，隨機分為空白組、模型組、陽性組（三九胃泰顆粒，20 mg/kg）和艷山姜提取物高、中、低劑量組（2.34、1.17、0.59 g/kg，按生藥量計），每組8只，每天灌胃生理鹽水或相應(yīng)藥物1次，連續(xù)給藥7 d后，除空白組外的其余組小鼠均一次性灌胃無水乙醇0.1 mL/10 g，以建立急性胃潰瘍模型。另取小鼠48只，同法分組，連續(xù)給藥15 d，并于給藥第10天起對除空白組外的其余組小鼠連續(xù)6 d灌胃阿司匹林（20 mg/kg），以建立急性胃潰瘍模型。在乙醇誘導(dǎo)模型實驗中，觀察各組小鼠胃潰瘍形成情況并測定胃潰瘍指數(shù);采用蘇木精-伊紅染色法觀察胃組織病理變化;采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清中胃泌素（GAS）和胃組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的水平。在阿司匹林誘導(dǎo)模型實驗中，同法觀察并測定各組小鼠胃潰瘍形成情況、胃潰瘍指數(shù);采用ELISA法檢測血清中GAS、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和胃組織中前列腺素E2（PGE2）、環(huán)氧合酶2（COX-2）的水平。結(jié)果：與空白組比較，模型組小鼠胃組織均出現(xiàn)了明顯的潰瘍病變;血清中GAS、TNF-α、IL-1β和胃組織中MDA、NO水平均顯著升高，胃組織中SOD、PGE2、COX-2水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。與模型組比較，給藥組小鼠的胃組織病變程度有不同程度減輕;胃潰瘍指數(shù)有不同程度降低，血清和胃組織中上述指標(biāo)水平均有不同程度改善，大部分指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：艷山姜提取物對無水乙醇和阿司匹林誘導(dǎo)的小鼠急性胃潰瘍均有保護(hù)作用;其機制可能是通過抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，從而減輕胃黏膜損傷。

關(guān)鍵詞 艷山姜;提取物;急性胃潰瘍;無水乙醇;阿司匹林;保護(hù)作用;小鼠

中圖分類號 R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）18-2190-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.18.03

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To explore the protective effect of Alpinia zerumbet extract on acute gastric ulcer model mice. METHODS： Totally 48 mice were collected and randomly divided into blank group， model group， positive group （Sanjiu weitai granules， 20? mg/kg）， A. zerumbet extract high-dose， medium-dose and low-dose groups （2.34， 1.17， 0.59 g/kg， by crude drug）， with 8 mice in each group. They were given normal saline or relevant medicine intragastrically， once a day， for consecutive 7 d. Then， except for blank group， other groups were given disposable intragastric administration of absolute ethanol 0.1 mL/10 g to establish acute gastric ulcer model. Another 48 mice were collected and grouped with same method， and then given relevant medicine for consecutive 15 d. From the 10th day of administration， except for blank group， other groups were given intragastric administration of aspirin （20 mg/kg） for consecutive 6 d to establish acute gastric ulcer model. In ethanol induction model experiment， the formation of gastric ulcer and the index of gastric ulcer were observed in each group; HE staining was used to observe the pathological changes of gastric tissue; the levels of gastrin （GAS） in serum， and the levels of SOD， MDA and NO in gastric tissue were determined by ELISA. In the aspirin induced model experiment， the formation of gastric ulcer and the index of gastric ulcer? were observed and measured by the same method; the levels of GAS， TNF-α， IL-1β in serum， and the levels of PGE2 and COX-2 in gastric tissue were determined by ELISA. RESULTS： Compared with model group， obvious ulcer lesions were found in gastric tissue of rats in model group; the levels of GAS， TNF-α， IL-1β in serum， and MDA，NO in gastric tissue were increased significantly， while the levels of SOD， PGE2， COX-2 in gastric tissue were decreased significantly （P<0.05 or P<0.01）. Compared with model group， the degree of gastric lesions in administration groups was alleviated to some extent; gastric ulcer index was decreased to some extent， while the levels of the above indexes in serum and gastric tissue were improved in varying degrees， with statistical significance in most indexes （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： A. zerumbet extract exerts its protective effect on absolute ethanol and aspirin-induced acute gastric ulcer model mice， the mechanism of which may be relieving gastric mucosal injury through inhibiting oxidative stress and inflammatory response.

KEYWORDS? ?Alpinia zerumbet; Extract; Acute gastric ulcer; Absolute ethanol; Aspirin; Protective effect; Mice

潰瘍是一種消化系統(tǒng)常見病，隨著社會老齡化和人們生活壓力的增加，胃潰瘍的發(fā)病率顯著上升[1]。胃潰瘍?nèi)糁委煵患皶r，患者胃部可發(fā)生出血、穿孔、梗阻甚至癌變等并發(fā)癥[2]。幽門螺桿菌感染、非甾體抗炎藥的使用、吸煙和飲酒均為胃潰瘍主要的危險因素[3]。

艷山姜是姜科山姜屬植物艷山姜[Alpinia zerumbet（Pers.）Burttet Smith]的干燥根，其味辛、澀，性溫，具有溫中燥濕、行氣止痛、截瘧的功效，主治心腹冷痛、胸腹脹滿、消化不良、嘔吐腹瀉等癥，已被收錄于2003版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》[4]。艷山姜作為貴州地產(chǎn)特色民族藥材，是貴州各少數(shù)民族的常用藥，水族常用艷山姜治療胃潰瘍，且效果良好[5]。國外有關(guān)艷山姜的研究多集中在葉的化學(xué)成分及藥理作用上[6-8];而近年來國內(nèi)研究主要集中在其抗心肌缺血、抗動脈粥樣硬化、抗炎、鎮(zhèn)痛和降壓作用上[9-11]，但對其傳統(tǒng)功效抗胃潰瘍作用的研究較少。

基于民族藥艷山姜的傳統(tǒng)功效，本研究分別以無水乙醇和阿司匹林建立小鼠急性胃潰瘍模型，通過測定小鼠潰瘍指數(shù)和潰瘍組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、環(huán)氧合酶2（COX-2）、前列腺素E2（PGE2），以及血清中胃泌素（GAS）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）等指標(biāo)，來評價艷山姜提取物對小鼠急性胃潰瘍的保護(hù)作用，為艷山姜相關(guān)新藥的開發(fā)和利用提供實驗基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器

VictorTM X3型多標(biāo)記微孔板檢測儀、Victor X3型酶標(biāo)儀（美國PekinElmer公司）;TDZ5-WS離心機（湖南湘儀離心機儀器有限公司）;SHZ-D（Ⅲ）型舜宇解剖顯微鏡（河南予華儀器有限公司）;BSA224S型分析天平（德國Sartorius公司）;R-200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本Buchi公司）;Vert.A1型倒置顯微鏡（德國Zeiss公司）。

1.2 藥品與試劑

艷山姜藥材由廣州弘聯(lián)醫(yī)藥藥材有限公司提供，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院孫慶文教授鑒定為姜科山姜屬植物艷山姜[A. zerumbet（Pers.）Burttet Smith]的干燥根，標(biāo)本存放于貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院炮制與產(chǎn)地加工實驗室（標(biāo)本號：GY20191005001）。

三九胃泰顆粒（陽性藥物，華潤三九醫(yī)藥股份有限公司，批號：Z44020705，規(guī)格：20 g）;阿司匹林腸溶片（拜耳醫(yī)藥保健有限公司，批號：J20171021，規(guī)格：100 mg）;小鼠GAS、PGE2、COX-2、TNF-α、IL-1β、SOD酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒（武漢華聯(lián)科生物工程有限公司，批號：20190618、A190879、A190719、A1910069、A190613、20190128）;小鼠MDA、NO ELISA試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20190127、20190126）;甲醛、鹽酸、無水乙醇等其余試劑均為分析純或?qū)嶒炇页Ｓ靡?guī)格，水為蒸餾水。

1.3 動物

SPF級昆明種小鼠，雌雄各半，8周齡，體質(zhì)量18～22 g，由長沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，動物生產(chǎn)合格證號：SCXK（湘）2019-0014。所有小鼠均飼養(yǎng)于12 h/12 h明暗交替的房間內(nèi)，室內(nèi)溫度為（25.0±1.0）℃、相對濕度為（50.0±10.0）%，均給予標(biāo)準(zhǔn)飼料和飲用水喂養(yǎng)。

2 方法

2.1 藥物溶液的制備

取艷山姜藥材，粉碎成粗粉，取粗粉100 g，加95%乙醇1 000 mL加熱回流提取3次，每次回流2 h;濾過，合并3次濾液，在45 ℃水浴條件下減壓旋蒸濃縮，制得浸膏（浸膏得率為20.79%）。實驗時，取該提取物浸膏適量，用水溶解制成100 mg/mL（按生藥量計）的艷山姜提取物溶液。

阿司匹林以生理鹽水配制質(zhì)量濃度為1.3 mg/mL的溶液，陽性藥三九胃泰顆粒以水配制成質(zhì)量濃度為2.6 mg/mL的溶液。

2.2 艷山姜提取物對無水乙醇誘導(dǎo)急性胃潰瘍模型小鼠的影響考察

2.2.1 分組、給藥與造模 參考文獻(xiàn)方法[12]，取小鼠48只，隨機分為空白組、模型組、陽性組和艷山姜提取物高、中、低劑量組，每組8只，雌雄各半。其中，陽性組小鼠灌胃三九胃泰顆粒溶液（20 mg/kg;劑量根據(jù)藥品說明書規(guī)定并經(jīng)人/小鼠等效劑量折算后設(shè)置）;艷山姜各劑量組小鼠分別灌胃艷山姜提取物溶液（2.34、1.17、0.585 g/kg，按生藥量計;劑量依據(jù)《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中艷山姜人用劑量[4]的8、4、2倍并經(jīng)人/小鼠等效劑量折算后設(shè)置）;模型組、空白組灌胃生理鹽水（0.1 mL/10 g）。每天給藥1次，連續(xù)給藥7 d。末次給藥前禁食不禁水24 h，末次給藥后1 h，除空白組外，其余組小鼠均一次性灌胃無水乙醇（0.1 mL/10 g）以誘導(dǎo)胃潰瘍。

2.2.2 取材 灌胃無水乙醇后，各組小鼠繼續(xù)禁食不禁水1 h，然后摘眼球取血，以4 000 r/min離心15 min，取上層血清，于-20 ℃保存，備測。小鼠采血后均脫頸椎處死，剖腹取全胃，沿胃大彎剪開，用生理鹽水洗凈，備測。

2.2.3 胃潰瘍形成情況觀察及胃潰瘍指數(shù)測定 將各組小鼠洗凈后的全胃自然展開，胃內(nèi)面朝上平鋪于白色潔凈濾紙上，肉眼觀察胃黏膜面潰瘍形成情況，并采用解剖顯微鏡（10倍）拍照并計算胃潰瘍指數(shù)。潰瘍指數(shù)計算方法：解剖顯微鏡下觀察胃黏膜出血、潰瘍面的多少、大小及其分布部位，測量各個潰瘍面的長徑，長徑≤1 mm者計為1分;>1～2 mm者計為2分;>2～3 mm者計為3分;>3～4 mm者計為4分;>4 mm者計為5分，各潰瘍面計分之和即為潰瘍指數(shù)[13]。

2.2.4 血清和胃組織中相關(guān)指標(biāo)檢測 取各組小鼠血清，按相應(yīng)ELISA試劑盒說明書操作檢測GAS水平。另稱取各組小鼠胃潰瘍組織約100 mg，剪碎，按5 mL/g的量加入預(yù)冷的生理鹽水，冰浴中進(jìn)行組織勻漿，在4 ℃下以4 000 r/min離心10 min，取上清液，按相應(yīng)ELISA試劑盒說明書操作檢測胃組織中MDA、SOD、NO的水平。

2.2.5 胃組織病理學(xué)檢查 取各組小鼠約6 mm×6 mm大小的潰瘍面部位組織，浸泡于10%甲醛溶液中固定24 h以上，再進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，采用倒置顯微鏡進(jìn)行病理組織學(xué)檢查[14]。

2.3 艷山姜提取物對阿司匹林誘導(dǎo)急性胃潰瘍模型小鼠的影響考察

2.3.1 分組、給藥與造模 參考文獻(xiàn)方法[13]，取小鼠48只，按“2.2”項下方法分組、給藥，每天給藥1次，連續(xù)給藥15 d。從第10天起，除空白組外，其余組小鼠均灌胃阿司匹林溶液（20 mg/kg），連續(xù)灌胃6 d，以誘導(dǎo)胃潰瘍。末次給藥前禁食不禁水24 h，末次灌胃藥物溶液或生理鹽水0.5 h后，再末次灌胃阿司匹林溶液。

2.3.2 取材 末次灌胃阿司匹林溶液后，各組小鼠繼續(xù)禁食不禁水4 h，然后按“2.2.2”項下方法取血并制備血清，于-20 ℃保存，備測;脫頸椎處死小鼠后取全胃、剪開、洗凈，備測。

2.3.3 胃潰瘍形成情況觀察及胃潰瘍指數(shù)測定 按“2.2.3”項下方法觀察各組小鼠胃黏膜面潰瘍形成情況，測定并計算胃潰瘍指數(shù)。

2.3.4 血清和胃組織中相關(guān)指標(biāo)檢測 取各組小鼠血清，按相應(yīng)ELISA試劑盒說明書操作檢測GAS、TNF-α和IL-1β水平。另稱取各組小鼠胃潰瘍組織約100 mg，按“2.2.4”項下方法制備組織勻漿后，按相應(yīng)ELISA試劑盒說明書操作檢測胃組織中PGE2和COX-2水平。

2.3.5 胃組織病理學(xué)檢查 按“2.2.5”項下方法取各組小鼠胃潰瘍面部位組織，固定后行HE染色，并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)均以x±s表示，兩組間比較采用t檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 艷山姜提取物對無水乙醇誘導(dǎo)急性胃潰瘍模型小鼠的影響

3.1.1 胃潰瘍形成情況及潰瘍指數(shù) 肉眼可見，空白組小鼠胃黏膜組織顏色正常，無潰瘍面或出血點;模型組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)大量出血點，形成了連片的出血面，有嚴(yán)重糜爛和潰瘍現(xiàn)象;陽性組小鼠胃內(nèi)壁有極少量出血點，無潰瘍面或糜爛現(xiàn)象;艷山姜高劑量組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)少量出血點，有較少潰瘍面，無糜爛現(xiàn)象;艷山姜中劑量組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)較多出血點，有潰瘍面和輕微糜爛現(xiàn)象;艷山姜低劑量組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)大量出血點，局部潰瘍面面積較大，糜爛現(xiàn)象明顯。與模型組比較，陽性組和艷山姜高、中劑量組小鼠潰瘍指數(shù)均顯著降低（P<0.05或P<0.01），詳見表1。

3.1.2 血清和胃組織中相關(guān)指標(biāo) 與空白組比較，模型組小鼠血清中GAS水平和胃組織中MDA、NO水平均顯著升高，胃組織中SOD水平顯著降低（P<0.01）。與模型組比較，陽性組和艷山姜高、中劑量組小鼠血清中GAS水平，胃組織中NO水平以及各給藥組小鼠胃組織中MDA水平均顯著降低，各給藥組小鼠胃組織中SOD水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），詳見表1、表2。

3.1.3 胃組織病理學(xué)變化 鏡下觀察可見，空白組小鼠胃壁組織結(jié)構(gòu)致密，黏膜結(jié)構(gòu)完整。模型組小鼠胃黏膜破損、不完整，可見慢性炎癥細(xì)胞浸潤、核固縮、腺體結(jié)構(gòu)消失，胃竇部胃黏膜可見多灶性凝固性壞死，并伴有較嚴(yán)重的炎癥、出血和水腫。陽性組小鼠胃黏膜充血和黏膜下水腫減輕，損傷較輕。艷山姜高、中劑量組小鼠胃黏膜結(jié)構(gòu)的破壞和腺體結(jié)構(gòu)的消失等現(xiàn)象均有不同程度改善，但核固縮以及炎癥細(xì)胞浸潤現(xiàn)象改善不明顯。艷山姜低劑量組小鼠胃黏膜結(jié)構(gòu)破壞較嚴(yán)重，可見核固縮及炎癥細(xì)胞浸潤，詳見圖1。

3.2 艷山姜提取物對阿司匹林誘導(dǎo)急性胃潰瘍模型小鼠的影響

3.2.1 胃潰瘍形成情況及潰瘍指數(shù) 肉眼可見，空白組小鼠胃黏膜組織顏色正常，無潰瘍面和出血點;模型組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)大量出血點，有嚴(yán)重潰瘍和糜爛現(xiàn)象;陽性組小鼠胃內(nèi)壁出血點極少，且無潰瘍和糜爛現(xiàn)象;艷山姜高劑量組小鼠胃內(nèi)壁出現(xiàn)少量出血點，潰瘍面較少，但無糜爛現(xiàn)象;艷山姜中劑量組小鼠胃內(nèi)壁出血點較多，有潰瘍和輕微糜爛現(xiàn)象;艷山姜低劑量組小鼠胃內(nèi)壁可見大量出血點，局部潰瘍面面積較大且有粘連現(xiàn)象，同時糜爛現(xiàn)象明顯。與模型組比較，陽性組和艷山姜高、中劑量組小鼠潰瘍指數(shù)均顯著降低（P<0.05或P<0.01），詳見表3。

3.2.2 血清和胃組織中相關(guān)指標(biāo) 與空白組比較，模型組小鼠血清中GAS、TNF-α和IL-1β水平均顯著升高，胃組織中PGE2、COX-2水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。與模型組比較，陽性組和艷山姜高、中劑量組小鼠血清中GAS、TNF-α水平均顯著降低，胃組織中COX-2水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）;陽性組和艷山姜高劑量組小鼠血清中IL-1β水平均顯著降低，胃組織中PGE2水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），詳見表3、表4。

3.2.3 胃組織病理學(xué)變化 鏡下觀察可見，空白組小鼠胃黏膜層、固有層、肌層結(jié)構(gòu)完整，腺體排列緊密;模型組小鼠胃黏膜可見多灶性凝固性壞死，伴有較嚴(yán)重的炎癥、出血、水腫;陽性組和艷山姜高劑量組小鼠胃組織炎癥、出血明顯減輕;艷山姜中、低劑量組小鼠胃黏膜損傷嚴(yán)重，上皮不完整，黏膜充血，腺體排列不整齊，詳見圖2。

4 討論

艷山姜為貴州各少數(shù)民族常用的民族藥，在民間常用于治療胃潰瘍。目前，從艷山姜中分離得到的化學(xué)成分已有200多種，包括揮發(fā)油類、黃酮類、甾體類以及有機酸類等[15]。揮發(fā)油類化合物是艷山姜中報道最多的一類化學(xué)成分，近期研究發(fā)現(xiàn)，艷山姜揮發(fā)油類中以有機酸類、碳烯類及醇類化合物為主要成分[16]。除揮發(fā)油之外，艷山姜的黃酮類成分主要有蘆丁、槲皮素和山柰酚等，這些成分具有降血壓、利尿和抗?jié)兊幕钚訹6]。有研究者從艷山姜中分離出二氫-5，6-脫氫香豆素、5，6-脫氫卡因、二氫-5，6-去氫醉椒素、5，6-去氫醉椒素等化合物，并發(fā)現(xiàn)這些化合物具有抗?jié)兊淖饔肹17-18]。此外，山柰酚也具有明顯的抗?jié)冏饔?，其機制可能與影響白三烯C4和PGE的水平有關(guān)[19]。

胃潰瘍主要是指胃黏膜因胃消化液自身消化等因素造成的超過黏膜肌層的組織損傷。當(dāng)胃黏膜的黏液-黏膜屏障受到破壞后，會造成上皮細(xì)胞受損并引發(fā)黏膜炎癥，進(jìn)而可逐漸發(fā)展為潰瘍[20]?，F(xiàn)代人在飲食、飲酒、吸煙等方面的不良習(xí)慣會對胃黏膜及其屏障造成物理性或化學(xué)性損害，進(jìn)而破壞黏膜屏障，引發(fā)胃潰瘍，故本研究選取無水乙醇建立模型以模擬飲酒等刺激誘導(dǎo)的胃潰瘍。此外，由于現(xiàn)代人的工作和生活壓力過大，經(jīng)常服用如阿司匹林、腎上腺皮質(zhì)激素等藥物進(jìn)行疼痛或炎癥緩解，這些藥物可削弱胃黏膜屏障或增加胃酸分泌從而促進(jìn)潰瘍發(fā)生，故本研究同時選取阿司匹林建立模型以模擬藥物誘導(dǎo)的胃潰瘍。上述兩種模型所對應(yīng)的發(fā)病機制也有所不同，乙醇誘導(dǎo)的胃潰瘍會引發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，氧化應(yīng)激損傷會破壞胃黏液層進(jìn)而破壞胃的防御系統(tǒng)，還能夠活化某些氧化還原敏感的轉(zhuǎn)錄因子從而加重機體的炎癥反應(yīng)[21];而阿司匹林能夠刺激免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子如IL-6、IL-1β和TNF-α的釋放，引起細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)[22]。本研究采用兩種不同機制的模型，旨在多角度闡明艷山姜提取物對胃黏膜的保護(hù)作用。同時，考慮到艷山姜是一味傳統(tǒng)中藥，故本研究選擇經(jīng)典胃藥三九胃泰顆粒作為陽性藥，該藥主要成分均為中藥，具有清熱祛濕、消炎止痛、理氣除脹、養(yǎng)胃益腸之效，應(yīng)用廣泛、療效確切，具有很好的類比性。

本研究結(jié)果顯示，在兩種模型下采用艷山姜提取物進(jìn)行預(yù)處理后，均可有效減少小鼠胃內(nèi)壁的出血點、縮小潰瘍面積并降低潰瘍指數(shù);組織病理學(xué)觀察結(jié)果顯示，艷山姜提取物可減輕小鼠胃黏膜充血和黏膜下水腫，不同程度地減輕胃黏膜結(jié)構(gòu)破壞和腺體結(jié)構(gòu)消失等現(xiàn)象。GAS是一種胃腸類激素，能夠維持胃腸道分泌功能的正常運作，同時還可刺激胃壁細(xì)胞分泌胃酸，通常在機體發(fā)生炎癥時該指標(biāo)水平會呈升高趨勢，進(jìn)而加快胃酸分泌速度，因此其可以作為判斷潰瘍模型是否成功建立的一個指標(biāo)[23]。本研究結(jié)果顯示，采用無水乙醇和阿司匹林分別刺激后，小鼠血清中GAS水平均顯著升高，證明模型建立成功;而給予艷山姜提取物預(yù)處理，能有效降低血清中GAS水平。

乙醇誘導(dǎo)胃潰瘍發(fā)生時，會引發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，并導(dǎo)致脂質(zhì)衍生的自由基（如MDA）的產(chǎn)生，引起線粒體和溶酶體的損傷，從而加速了潰瘍的形成[24]。MDA是氧化應(yīng)激的標(biāo)志物，其在胃組織發(fā)生損傷后會大量生成，打破氧化與抗氧化平衡體系，加劇局部氧化應(yīng)激[25]。SOD是機體重要的抗氧化酶，可通過將有害的超氧化物轉(zhuǎn)化分解為無害成分，從而保護(hù)胃免受氧化應(yīng)激損傷[25]。疾病情況下，大量產(chǎn)生的NO可與氧自由基結(jié)合，使細(xì)胞脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，從而引起炎性損傷[26]。因此，本研究在乙醇誘導(dǎo)模型實驗中選取MDA、SOD、NO等3個指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，艷山姜提取物預(yù)處理能升高模型小鼠SOD水平，降低MDA和NO水平。這提示該提取物可以通過促進(jìn)SOD的產(chǎn)生，保護(hù)胃黏膜免受氧化損傷;同時通過抑制MDA和NO的產(chǎn)生，減少過氧化反應(yīng)引發(fā)的潰瘍形成。

阿司匹林能夠刺激免疫系統(tǒng)，引起炎癥反應(yīng);能夠抑制COX-1，干擾PGE2的合成，減弱PGE2對胃腸黏膜的保護(hù)作用[27]。促炎細(xì)胞因子TNF-α是多種組織中炎癥損傷和癌變發(fā)展的攻擊性因素之一，可在早期免疫應(yīng)答和炎癥的各個階段調(diào)節(jié)多種因子，如IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12、iNOS和COX-2等[27]。IL-1β是另一種誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞積聚的細(xì)胞因子，可最終導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的釋放[28]。IL-6、IL-1β和TNF-α水平與胃黏膜炎癥的嚴(yán)重程度有關(guān)。PGE2是炎性部位COX-2的主要產(chǎn)物，可通過改善血流、刺激黏液和碳酸氫根的分泌并增強上皮細(xì)胞對刺激的抵抗力，從而在胃黏膜防御中起重要作用[29- 30]。因此，本研究在阿司匹林誘導(dǎo)模型實驗中選取IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2等4個指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，艷山姜提取物預(yù)處理能降低小鼠血清中促炎因子IL-1β、TNF-α水平，升高潰瘍組織中COX-2和PGE2水平。這提示該提取物可以通過抑制IL-1β和TNF-α分泌、抑制炎癥因子釋放，促進(jìn)潰瘍愈合;同時可通過提高COX-2和PGE2水平，增強上皮細(xì)胞的抵抗能力，抵抗炎癥損傷，保護(hù)受損胃黏膜。

綜上所述，艷山姜提取物對無水乙醇和阿司匹林誘導(dǎo)的小鼠急性胃潰瘍均有保護(hù)作用，其機制可能是通過抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，從而減輕無水乙醇/阿司匹林造成的胃黏膜損傷。

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（收稿日期：2020-02-19 修回日期：2020-08-02）

（編輯：段思怡）