薛 陽
(甘肅隆宇檢測科技有限公司,甘肅 蘭州 730070)
茶樹是山茶科山茶屬的一種灌木類植物,分布于熱帶及溫暖地區(qū)。我國是茶葉盛產大國,種植和飲茶歷史悠久,茶葉已經是人們日常生活的一部分。醫(yī)學和茶葉生物化學研究表明,茶葉是一種對人體健康有益的功能性飲品,茶葉里含有的茶多酚、茶氨酸、茶多糖和茶色素(茶黃色、茶紅素和茶褐素等)等生化活性物質,對人體有不同的生理調節(jié)作用。如茶多酚有抗氧化、抗齲齒等方面的保健作用;茶氨酸能使人放松鎮(zhèn)靜,可促進大腦的學習和記憶,具有神經保護的作用;茶多糖在糖尿病等方面具有顯著的預防效果;茶色素(茶黃素等)則能起到調節(jié)血脂的功效[1]。
近年來,國內茶行業(yè)前景良好,各個茶生產地區(qū)、生產基地種茶面積逐年增加,政府財政投入和參與人數逐年增加。甘肅省是我國茶葉生產的最北端區(qū)域之一,主要產區(qū)分布在隴南市文縣、武都、康縣等二縣,與陜南、川北茶區(qū)相毗鄰[2]。該區(qū)域地處海拔600~1200m林緣地帶,植被茂盛而水質潔凈,日照短而多霧,氣候溫暖濕潤,沙質土壤,有機質豐富,排水通暢,非常適合茶樹的種植。自20世紀50年代開始引種試種,到現(xiàn)在已有較大的種植規(guī)模,同時也開發(fā)出龍神翠竹、碧峰龍井、龍池雀舌等多個名優(yōu)茶產品[3]。但是由于隴南茶由于種植歷史較短,加上宣傳力度不夠,在國內并沒有很高的知名度,南方的知名茶葉如西湖龍井人們對之活性成分研究較多,但對隴南茶的研究主要集中在茶樹的栽培技術及管理模式方面,而對于隴南茶葉中各種活性成分含量的測定未見報道[4-5]。而且,目前的茶葉市場,人們對春茶的認可度較高,而夏茶和秋茶因低廉的價格使很多茶區(qū)都不再采摘,這造成茶葉資源的極度浪費。因此,對不同采摘季節(jié)的隴南茶中主要活性成分和微量元素的含量進行測定并與南方同等級茶葉進行比較,即可以更直觀的顯示隴南茶的品質,有利于隴南茶葉的推廣宣傳和甘肅省特色產業(yè)的發(fā)展,也有利于夏秋茶葉的綜合利用,提高茶葉的產值[6]。
隴南龍井,西湖龍井(均買自市場),用粉碎機粉碎成為茶粉,備用。
試劑:pH值8.0磷酸緩沖液,2%茚二酮溶液,茶氨酸標準溶液,乙腈,甲醇,碳酸鈉,福林酚試劑,沒食子酸,濃硫酸,葡萄糖標準溶液等。
儀器:恒溫干燥箱,恒溫水浴鍋,粉碎機,分光光度計,離心機,抽濾機,分析天平。
2.3.1 水浸出物的測定
稱取2g磨碎試樣于500mL錐形瓶中,加沸蒸餾水300mL,立即移入沸水浴中,浸提45min(每隔10min搖動一次)。浸提完畢后立即趁熱減壓過濾。用約150mL沸蒸餾水洗滌茶渣數次。將茶渣連同已知質量的濾紙移入玻璃皿中,移入120±2℃的恒溫干燥箱內烘1h,取出冷卻1h,再烘1h,立即移入干燥器內冷卻至室溫,稱量。
2.3.2 茶多酚的測定
茶多酚測定采用酒石酸亞鐵比色法,按GB/T8313-2002執(zhí)行,具體操作如下:
稱取0.2g均勻磨碎的試樣于10mL離心管中,加入在70℃水浴中預熱過的70%甲醇溶液,移入70℃水浴中,浸提10min。冷卻至室溫,離心,取上清液制成母液及工作液。加入福林酚,碳酸鈉等,用10mm比色皿,在765nm波長下測定吸光度A。
2.3.3 茶氨酸的測定
茶氨酸測定采用紫外分光光度法,按 GB/T8312-2002執(zhí)行,具體操作如下:
稱取3g磨碎試樣于500mL錐形瓶,加沸蒸餾水450mL,沸水浴浸提45min,趁熱減壓過濾。移入500mL容量瓶定容。用移液管吸取2mL移入50mL容量瓶,加入0.5 mL pH8.0磷酸鹽緩沖液和0.5 mL2%茚二酮溶液,在沸水浴中加熱15min。待冷卻后加水定容至50mL。放置10min后,用5mm比色杯,在570nm處,以試劑空白溶液為參比,測定吸光度A。
2.3.4 咖啡堿的測定
咖啡堿測定采用紫外分光光度法,按GB/T8312-2002執(zhí)行,具體操作如下:
稱取3g磨碎試樣于500mL錐形瓶,加沸蒸餾水450mL,沸水浴浸提45min,趁熱減壓過濾。移入500 mL容量瓶定容。用移液管吸取10 mL移入100.00mL容量瓶,加入4mL0.01mol/L鹽酸和1mL堿式乙酸鉛,定容,靜置至澄清,再吸取濾液25mL,注入50mL容量瓶,加入0.1mL4.5mol/L硫酸,定容,靜置至澄清,過濾。用10mm比色杯,在274nm處測定吸光度A。
2.3.5 多糖的測定
多糖的測定采用蒽酮比色法,具體操作如下:準確稱取3g試樣置于錐形瓶中,加入80mL沸蒸餾水,放入沸水浴。不時搖動,提取半小時。取出立即過濾,濾渣用沸蒸餾水反復洗滌并過濾,合并濾液。冷卻至室溫,用蒸餾水定容至100mL。抽取1mL溶液后迅速置于冰浴中,待加入蒽酮試劑后同時置于沸水浴中,準確加熱7min,立即取出置于冰浴中迅速冷卻。待達到室溫后,用1cm厚度的比色皿,在620nm處,以試劑空白溶液為參比,測定吸光度A。
隴南龍井與西湖龍井春夏秋二季度茶葉水浸出物測定結果見表1。從表中可以看出春夏秋二季的隴南龍井水浸出物與西湖龍井茶的水浸出物差別不大,都在44%~45%之間。水浸出物含量反映的是決定茶葉品質的各種化合物的量的綜合結果,但并不能反映出決定茶葉品質的各種化合物的質的關系。一般來說,水浸出物的含量越高,茶葉的品質會越好。
表1 隴南龍井與西湖龍井茶葉水浸出物含量測定
表1數據顯示,這兩種茶單從水浸出物的含量來說,西湖龍井要略優(yōu)于隴南龍井。隴南龍井春茶的水浸出物低于夏茶和秋茶,這也表明水浸出物并不能與傳統(tǒng)茶葉等級的評定一致,而只能作為茶葉評定時的一種輔助指標。
以酒石酸亞鐵比色法,根據GB/T8313-2002建立的茶多酚標準曲線如圖1所示:
圖1 茶多酚標準曲線
茶多酚是茶葉中的主要澀味物質,隴南龍井與西湖龍井春夏秋二季度茶葉中茶多酚含量測定結果見表2。
從表2中可以看出,在兩種不同季節(jié)采摘的茶葉中茶多酚含量占干茶重量約23%,隴南龍井茶二個季度分別與西湖龍井二個季度比較則每個季度的茶多酚含量均高于西湖龍井。隴南龍井和西湖龍井的春茶多酚含量均高于夏茶和秋茶。
根據GB/T8312-2002建立的茶氨酸標準曲線如圖2。
圖2 茶氨酸標準曲線
茶氨酸是茶葉中特有的游離氨基酸,有甜味,是茶葉中的主要鮮爽味物質。隴南龍井與西湖龍井春夏秋二季度茶葉中茶氨酸含量測定結果見表3。從表3中可以看出,隴南龍井茶二個季度的茶氨酸含量均明顯高于西湖龍井,隴南龍井茶的茶氨酸含量1.7%~1.8%,而西湖龍井的為0.8%~1.0%,西湖龍井茶的茶氨酸僅為隴南龍井的一半。茶氨酸對茶湯的口感質量具有特殊意義,一般在貯藏過程中呈直線下降趨勢,貯存時間會進一步影響茶葉的質量。
表3 隴南龍井與西湖龍井茶葉茶氨酸含量測定
從測定結果來看,生長季節(jié)的不同也對茶氨酸含量有較大影響,氨基酸含量不論是隴南龍井還是西湖龍井都隨著春、夏、秋季節(jié)變換逐漸減少。
根據GB/T8312-2002建立的咖啡堿標準曲線如圖3所示。
圖3 咖啡堿標準曲線
茶堿是茶葉中的甲基嘌呤類藥物,具有強心、利尿、擴張冠狀動脈、興奮中樞經系統(tǒng)等作用。
表4 隴南龍井與西湖龍井茶葉咖啡堿含量測定
從表4可以看出,隴南龍井茶的咖啡堿含量高于西湖龍井,而且兩種茶也是隨著生長季節(jié)的不同含量發(fā)生變化,即春夏秋二季的咖啡堿含量逐漸降低。
根據蒽酮比色法建立的葡萄糖標準曲線如圖4所示。
圖4 葡萄糖標準曲線
茶多糖是一種酸性糖蛋白,具有降血糖、降血脂、增強免疫力、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗凝血、抗血栓和耐缺氧等作用,近些年來發(fā)現(xiàn)茶多糖還具有治療糖尿病的功效。糖類是構成茶湯甜味的主要物質,能增進茶湯濃度和“味厚感”。
表5 隴南龍井與西湖龍井茶葉多糖含量測定
從表5可以看出,隴南龍井與西湖龍井的多糖含量差別不大,隴南龍井略高于西湖龍井,春茶明顯高于夏茶和秋茶。
本研究對2014年產的春季、夏季、秋季隴南龍井和西湖龍井茶樣品進行活性成分的測定和比較分析,從結果來看,除了水浸出物隴南龍井茶略低外,隴南龍井的其他各活性成分含量均高于西湖龍井,且二者的春季茶均優(yōu)于夏秋季節(jié)的茶葉。隴南龍井與西湖龍井活性成分的差異可能主要與茶樹生長的環(huán)境有關系,隴南茶種植地的植被茂盛,日照短而多霧,沙質土壤,有機質更豐富,生態(tài)條件十分優(yōu)越,生長的茶葉在早春回溫較快快,內含物也比較豐富,這一點與測定結果一致。盡管理化指標并不能用來簡單判斷茶的優(yōu)劣,但可以從一定程度上反映茶的好壞,也可以通過測定理化指標來確定茶葉的生產時間。從實驗結果來看,甘肅省的隴南龍井茶具有較好的不亞于西湖龍井茶的品質,該結果可以促進甘肅省地區(qū)的隴南龍井茶的推廣,推動其發(fā)展為甘肅省的特色產業(yè),甚至成為我國的知名茶葉,也可以為茶葉的鑒別提供參考。