莖直黃芪亞急性毒性對(duì)藏豬血細(xì)胞影響研究

劉忠艷 西洛白瑪 董海龍 吳慶俠

（西藏農(nóng)牧學(xué)院，西藏林芝 860000）

莖直黃芪（Astragalus strictus Grahex Benth）在西藏俗稱“通查、通扎”（藏音譯），屬瘋草類豆科黃芪屬有毒植物，主要分布于西藏東部及南部、云南西北部（德欽）等地，是我國(guó)西部草地瘋草主要優(yōu)勢(shì)種之一[1-2]。瘋草（locoweed）是豆科黃芪屬和棘豆屬有毒植物的統(tǒng)稱，是世界范圍內(nèi)分布最為廣泛、危害畜牧業(yè)發(fā)展最為嚴(yán)重的有毒植物之一，也是我國(guó)主要有毒植物優(yōu)勢(shì)種。瘋草主要毒性成分是吲哚里西啶類生物堿——苦馬豆素，能競(jìng)爭(zhēng)性抑制機(jī)體α-甘露糖苷酶的活性，從而導(dǎo)致出現(xiàn)甘露糖貯積癥[3]。主要危害馬和羊，較少關(guān)于豬瘋草中毒的報(bào)道。

藏豬（Sussscrofa）屬于高原型地方豬種，主要分布在中國(guó)西南部青藏高原，是林芝市主要?jiǎng)游锲贩N。本試驗(yàn)將莖直黃芪干草粉按比例混入藏豬基礎(chǔ)飼料進(jìn)行亞急性毒性試驗(yàn)，通過(guò)觀察莖直黃芪對(duì)藏豬生長(zhǎng)發(fā)育、主要血液學(xué)指標(biāo)的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)藏豬的亞急性毒性作用，將為深入探討黃芪屬植物毒性及作用機(jī)制、以及科學(xué)合理的開發(fā)利用供重要理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 樣品材料

莖直黃芪地上部分全草，2019年9月采于西藏林芝市米林縣，風(fēng)干并粉碎后備用。試驗(yàn)動(dòng)物為5～6周齡藏豬6只，購(gòu)于林芝市藏豬養(yǎng)殖場(chǎng)。

1.1.2 主要儀器

XFA6130動(dòng)物血液細(xì)胞分析儀（南京普朗醫(yī)用設(shè)備有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組與攻毒

將6只藏豬窩重隨機(jī)分為2組，分籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水。Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼料（玉米粉）；Ⅱ?yàn)樵囼?yàn)組，飼喂60%莖直黃芪+40%基礎(chǔ)飼料。

1.2.2 臨床癥狀觀察

每天記錄藏豬每天的采食量，每周末稱量各組藏豬體重，通過(guò)平均周增重計(jì)算公式平均周增重=（末重－始終）/飼喂時(shí)間，計(jì)算各組藏豬平均周增重。

觀察并記錄各試驗(yàn)組藏豬的飲食、行為活動(dòng)及其它臨床癥狀等變化。

1.2.3 主要血液學(xué)指標(biāo)的測(cè)定

分別于第7d，14d，21d，28d，30d，隨機(jī)取各組藏豬，前腔靜脈采血2ml，測(cè)定紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性t檢驗(yàn)和一維方差統(tǒng)計(jì)分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 藏豬采食量及體重測(cè)定

試驗(yàn)組藏豬前4 d采食量均呈下降趨勢(shì)，4 d后采食量開始回升。Ⅱ組采食量波動(dòng)較大外，Ⅰ組在試驗(yàn)期間采食量變化不大，Ⅱ組在第2周采食量下降明顯。

攻毒第1周各兩組藏豬體重均顯著上升，其中Ⅱ組藏豬體重上升最明顯。第2周后Ⅱ組藏豬體重直線下降，Ⅰ組藏豬體重持續(xù)增加，至第5周試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Ⅱ組藏豬體重均低于試驗(yàn)前體重（圖1）。

如表1所示，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組藏豬平均日增重量隨飼料中莖直黃芪含量的升高而體重增加，Ⅰ組則呈線性增長(zhǎng)，Ⅱ組藏豬體重負(fù)增長(zhǎng)。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均有顯著差異（P＜0.05）；但組間差異不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)組出現(xiàn)明顯中毒跡象。

表1 莖直黃芪對(duì)藏豬體重的影響

圖1 莖直黃芪對(duì)藏豬體重影響

2.2 臨床癥狀

飼喂期間Ⅰ組無(wú)明顯癥狀。飼喂前5 d，Ⅱ組藏豬采食量明顯下降，后逐步恢復(fù)。第27 d，Ⅱ組出現(xiàn)輕微中毒癥狀，表現(xiàn)為間歇性精神沉郁和躁動(dòng)不安，頭部及四肢呈神經(jīng)性震顫。試驗(yàn)組藏豬伴有不同程度的精神沉郁、被毛倒立、無(wú)光澤、喜歡扎堆、反應(yīng)遲鈍等現(xiàn)象，直至試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)組藏豬中毒癥狀未加重。

2.3 血液學(xué)指標(biāo)的變化

2.3.1 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）

試驗(yàn)結(jié)果見圖2，莖直黃芪能顯著引起藏豬血液紅細(xì)胞數(shù)量顯著降低，與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。前三周Ⅱ組均在正常范圍之內(nèi)，第三周之后直線下降與對(duì)照組及其他試驗(yàn)組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；第2周試驗(yàn)組和對(duì)照組均在正常范圍內(nèi)，與對(duì)照組及其他試驗(yàn)組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；第4周均在正常范圍內(nèi)，與對(duì)照組比較有顯著性差異（P＜0.05）；至第5周，試驗(yàn)組均顯著下降，試驗(yàn)組和對(duì)照組各組血液紅細(xì)胞總數(shù)程曲線變化，且組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3.2 白細(xì)胞總數(shù)（WBC）

試驗(yàn)結(jié)果見圖3，莖直黃芪能顯著引起藏豬血液白細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)，第4周為上升幅度最大，與對(duì)照組比較有顯著性差異（P＜0.05），其次是第3周、四周和五周變化較顯著，越接近正常值范圍內(nèi)；第2周后各試驗(yàn)組白細(xì)胞數(shù)量呈降低趨勢(shì)，直至第5周試驗(yàn)結(jié)束。

圖2 莖直黃芪對(duì)藏豬RBC的影響

圖3 莖直黃芪對(duì)藏豬WBC的影響

2.3.3 血紅蛋白濃度的變化

試驗(yàn)結(jié)果見圖4，莖直黃芪對(duì)藏豬血紅蛋白濃度有顯著的影響，第1周實(shí)驗(yàn)組血紅蛋白濃度下降，第2周、第3周上升至正常范圍之內(nèi)，第4周和第5周試驗(yàn)組的血紅和蛋白濃度上升之正常范圍之上；對(duì)照組在正常范圍內(nèi)浮動(dòng)。

3 討論

莖直黃芪主要毒性成分是苦馬豆素，由于其結(jié)構(gòu)與α-甘露糖苷酶椅形結(jié)構(gòu)相似，故能競(jìng)爭(zhēng)性抑制其生物活性，從而使中毒機(jī)體細(xì)胞甘露糖聚集而發(fā)生空泡變性。動(dòng)物采食莖直黃芪后出現(xiàn)慢性中毒，主要表現(xiàn)為站立不穩(wěn)、轉(zhuǎn)圈、共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀，并伴隨有流產(chǎn)、死胎，甚至死亡[4-5]，本試驗(yàn)中，試驗(yàn)藏豬在飼喂第27d出現(xiàn)中毒癥狀，相較于其它動(dòng)物出現(xiàn)臨床癥狀較輕微，未表現(xiàn)出典型的共濟(jì)失調(diào)等中毒癥狀，表明藏豬對(duì)莖直黃芪具備一定的耐受性。試驗(yàn)過(guò)程中，試驗(yàn)組藏豬體重在前期明顯增加，這可能與莖直黃芪具備較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有關(guān)[6]。從血液學(xué)指標(biāo)來(lái)看，莖直黃芪在前期對(duì)試驗(yàn)藏豬紅細(xì)胞計(jì)數(shù)影響較小，后期導(dǎo)致紅細(xì)胞計(jì)數(shù)下降。同時(shí)能顯著降低試驗(yàn)藏豬白細(xì)胞總數(shù)水平，其作用機(jī)制還需進(jìn)一步試驗(yàn)分析。

圖4 莖直黃芪對(duì)藏豬血紅蛋白影響