氣相色譜法測定乙酰氨基酚原料乙酸酐中雜質丙酸酐殘留量研究

黃佳雯，梁佳威，景曉寧，鄭楓

（1.中國藥科大學，江蘇南京211198；2.南京卡文迪許生物工程技術有限公司，江蘇南京210033）

乙酰氨基酚，又名撲熱息痛，是一種有效的乙酰苯胺類解熱鎮(zhèn)痛藥。乙酰氨基酚的經典工業(yè)生產工藝為鐵粉還原對硝基苯酚后使用乙酸和乙酸酐?；?/p>

乙酸酐，又名醋酐、無水乙酸，是一種重要的有機化工生產原料，多應用于醋酸纖維、農藥、醫(yī)藥、染料、香料等生產行業(yè)。目前,乙酸酐的工業(yè)制備方法主要為乙醛氧化法、乙烯酮法和醋酸甲酯羰基合成法三種[1]。由于生產工藝的差異，乙酸酐中的雜質也多種多樣，常見的有：乙酸、丙酸、丙酸酐、乙丙酸酐、乙腈、亞乙基二乙酸酯等[2]。

在乙酰氨基酚合成工藝中發(fā)現(xiàn)乙酸酐中微量的丙酸酐雜質參與酰化反應，生成丙酰氨基酚。企業(yè)根據(jù)原料實際情況，按照ICH 指導原則中未知雜質的要求對丙酰氨基酚進行控制，不考慮富集作用，丙酸酐以1∶1 轉化為丙酰氨基酚，因此在原料乙酸酐中控制丙酸酐含量，將限度擬定為0.1%?，F(xiàn)行GB/T 10668-2000 工業(yè)乙酸酐標準未對雜質丙酸酐含量作出要求，基于現(xiàn)狀，急需開發(fā)一種測定乙酸酐中丙酸酐殘留量的方法。

1 實驗部分

1.1 儀器

氣相色譜儀：Agilent6890，Agilent 色譜工作站。

1.2 試劑

乙酸酐（分析純，上海凌峰化學試劑有限公司，批號：20170301、20180124；國藥集團化學試劑有限公司，批號：20180705）、二氯甲烷（農殘級，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）、丙酮（色譜純，TEDIA）、乙腈（色譜純，Merk）、丙酸酐（上海阿拉丁生化科技股份有限公司，純度：98.5%，批號：B1915168）

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：DB-1（60m×0.53mm×3.0μm）；進樣口溫度：150℃；檢測器溫度：180℃；載氣：氮氣；柱流量：3mL/min；程序升溫：初始柱溫80℃，保持5min，以10℃/min 升溫至140℃，保持10min；分流比為20∶1；進樣量為1μL。

2.2 溶液配制

2.2.1 對照品貯備液的配制

精密稱取丙酸酐對照品50mg，置于10mL 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻，作為對照品貯備液。

2.2.2 對照品溶液的配制

精密移取貯備液0.1mL，置于10mL 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.3 混合對照品溶液的配制

精密稱取乙酸酐50mg、丙酸酐50mg、乙酸50mg、丙酸50mg，置于同一10ml 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻，作為混合對照品貯備液，再精密移取該貯備液0.1mL，置于10mL 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.2.4 供試品溶液的配制

精密稱定乙酸酐0.5g，置于10mL 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻，作為供試品溶液。

2.3 專屬性試驗

考察在此色譜條件下空白溶劑以及乙酸酐樣品中可能存在的雜質如乙酸、丙酸對丙酸酐的測定是否有干擾。取混合對照品溶液，按照擬定色譜條件進行檢測分析，記錄色譜圖（圖1）。結果表明，空白溶劑不干擾檢測，乙酸酐中其它殘留溶劑均不干擾丙酸酐的檢測，本方法專屬性良好。

圖1 專屬性試驗氣相色譜圖

2.4 進樣精密度試驗

取丙酸酐對照品溶液，按照擬定色譜條件，連續(xù)進樣6 次，記錄色譜圖。計算結果得到連續(xù)6 次進樣丙酸酐峰面積的RSD 為1.3%，表明進樣精密度良好。

2.5 對照溶液穩(wěn)定性試驗

取丙酸酐對照品溶液，按照擬定色譜條件，在0h、2h、4h、6h、8h、10h 進樣，記錄色譜圖。計算結果得到0～10h 內丙酸酐峰面積的RSD 為2.9%，表明丙酸酐對照品溶液在10h 內穩(wěn)定性良好。

2.6 線性試驗

精 密 移 取 對 照 品 貯 備 液0.2、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5mL，各置于100mL 量瓶中，加入二氯甲烷定容，搖勻。分別相當于限度質量分數(shù)20%、50%、80%、100%、120%、150%，每份線性溶液進一針，按照擬定色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以質量分數(shù)C 為橫坐標，丙酸酐峰面積A 為縱坐標進行回歸分析，試驗結果見表1 和圖2。結果表明丙酸酐在10.09～75.68μg/mL 范圍峰面積與質量分數(shù)呈良好的線性關系。

表1 線性試驗結果

圖2 丙酸酐標準曲線

2.7 定量限與檢測限試驗

取“2.5”項下20%對照溶液，按信噪比為10∶1的要求逐級稀釋配制定量限溶液，擬定色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。按信噪比為3∶1 的要求逐級稀釋配制檢測限溶液，擬定色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。結果表明：定量限質量分數(shù)為2.08μg/mL，靈敏度為4.16%；檢測限質量分數(shù)為0.62μg/mL，靈敏度為1.25%。

2.8 準確度試驗

分別精密稱定9 份乙酸酐0.5g，置于10mL量瓶中，分加入對照品貯備液0.03mL、0.1mL、0.13mL，加入二氯甲烷定容，搖勻，即獲得30%回收率溶液、100%回收率溶液、130%回收率溶液（其中每個水平的回收率溶液配制3 份），按照擬定色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。結果表明丙酸酐的總平均回收率為100.3%，RSD 為0.8%。數(shù)據(jù)見表2。

表2 準確度試驗結果（n=9）

2.9 耐用性試驗

取對照溶液，進樣分析，分別考察不同載氣流速（±0.2mL/min）、進樣口溫度（±5℃）對耐用性的影響。結果表明，各條件下丙酸酐的精密度均符合要求，RSD ≤5%。

2.10 樣品測定

取三批乙酸酐（上海凌峰：20170301，上海凌峰：20180124，國藥滬試：20180705），按照“2.2.4”項下配制供試品溶液，按照擬定色譜條件進樣分析，記錄色譜圖，測定丙酸酐殘留量。結果表明，三批供試品中均未檢出丙酸酐。

3 討論

3.1 色譜柱的選擇

分別在DB-1（60m×0.53mm×3.0μm）、DB-FFAP（30m ×0.53mm ×1.5μm）、HP -5 （30m ×0.32mm ×0.25μm）、DB-5 （30m×0.53mm×1.00μm）、SE-30（30m×0.53mm×0.5μm）色譜柱上進行試驗，分析比較試驗結果后得出在DB-1 色譜柱上分離效果好，因此選擇該毛細管色譜柱進行試驗。

3.2 溶劑的選擇

乙酸酐、丙酸酐易溶于丙酮、乙腈、二氯甲烷等有機試劑，考慮到乙酸酐、丙酸酐遇水分解，應選擇含水量少的溶劑。使用870 卡氏水分儀測定溶劑含水量，得到丙酮含水量0.46%，乙腈含水量0.02%，二氯甲烷含水量0.01%。因此采用二氯甲烷作為溶劑。

3.3 樣品質量分數(shù)的選擇

考 察30mg/mL、40mg/mL、50mg/mlL、60mg/mL樣品質量分數(shù)時，對應0.1%限度質量分數(shù)目標物響應大小。結果表明：樣品質量分數(shù)為50mg/mL，對照質量分數(shù)為50μg/mL 時丙酸酐響應達到要求，且峰對稱度高。因此選擇50mg/mL 樣品質量分數(shù)進行試驗。數(shù)據(jù)見表3。

表3 樣品質量分數(shù)選擇