高效液相色譜法測定左炔諾孕酮片的溶出度方法分析

楊春媛，李金保

（1.吉林省白城市食品藥品檢驗所，吉林 白城 137000；2.吉林省白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，吉林 白城 137000）

左炔諾孕酮片作為比較常見的女性口服避孕藥物，該藥物具有較強抑制垂體分泌促性腺激素的作用，并抑制女性體內(nèi)的排卵情況[1]。左炔諾孕酮片可以讓女性宮頸內(nèi)的粘液變的濃稠起來，從而阻礙精子穿透進(jìn)入子宮，并讓女性的子宮內(nèi)膜萎縮，不利于孕卵著床，從而起到一定的避孕作用[2]。左炔諾孕酮片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)在收錄于我國《中國藥典》2015版本內(nèi)。溶出度作為質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一，早在幾十年之前曾有學(xué)者指出，藥物在人體內(nèi)的吸收速度取決于藥物的溶解快慢速度。固體制劑的藥物經(jīng)口服用進(jìn)入人體之后，藥物的吸收程度主要根據(jù)藥物從制劑中溶出、釋放以及胃腸道內(nèi)的滲透決定。所以，2015版本以及2010版本的《中國藥典》，均將溶出度作為左炔諾孕酮片的檢驗項目，從而保證藥物的質(zhì)量[3]。

1 儀器和試劑

1.1 檢驗儀器

安捷倫科技有限公司的高效液相色譜儀（1100）、盛鑫通達(dá)有限公司的智能溶出儀（ZRS-8G）、，賽多利斯儀器公司的電子分析天平（CP225D）、昆山超聲儀器公司的數(shù)控超聲波清洗儀（KQ-300DE）。

1.2 試劑、試藥

兩個不同種類的左炔諾孕酮片，乙腈為優(yōu)級純、鹽酸為分析純以及自制的純化水。

2 方 法

2.1 溶出度測定方法以及溶質(zhì)

由于本次檢測物品的規(guī)格比較小，所以使用溶出度測定法進(jìn)行溶出度的檢查，使用高效液相色譜法測定其的溶出量。隨機選取0.1 mol/L的鹽酸溶液溶出介質(zhì)，測量時間為30分鐘，本品的轉(zhuǎn)速在75 r/分鐘和100 r/分鐘下進(jìn)行，最終結(jié)果如表1。

表1 溶出度測定方法以及溶質(zhì)

2.2 色譜

選取本次研究的左炔諾孕酮片研磨后的細(xì)粉末，加流動相制作成每1 mL約含有7 μg的左炔諾孕酮溶液，并使用190～400 nm的波長對其進(jìn)行掃描。圖片顯示出，該溶液的最大吸收在240 nm部位，所以選擇240 nm作為測定的波長。

2.3 溶液配制

根據(jù)溶出度測量方法中的要求，使用0.1 mol/L的鹽酸溶液溶出介質(zhì)，并進(jìn)行轉(zhuǎn)速75 r/分鐘，30分鐘之后，取部分溶液進(jìn)行過濾，在過濾時候?qū)⑵渥鳛楣┰嚻返膶嶒炄芤骸＞芊Q取左炔諾孕酮對照物質(zhì)，使用流動相制成每1 mL含0.075 mg的溶液，搖勻之后使用微孔濾膜進(jìn)行過濾獲取對照溶液。

2.4 專屬性實驗

將上述兩種溶液以及溶出介質(zhì)根據(jù)色譜條件以及系統(tǒng)適應(yīng)性分別進(jìn)樣，對比兩組結(jié)果數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，檢驗波長在240 nm時，供試品溶液和對照溶液在同樣的位置顯示出主成分色譜峰，而溶出介質(zhì)在主成分位置并沒有出現(xiàn)色譜峰，該測量方法的專屬性比較好。

2.5 回收率實驗

根據(jù)藥品生產(chǎn)企業(yè)提供的處方，精密稱取部分空白輔料，并分別添加一定的左炔諾孕酮原料物質(zhì)，加流動相制作成為80%濃度、100%濃度以及120%濃度的實驗溶液，將每個溶液分成三個實驗樣品，使用專屬性實驗同樣的色譜進(jìn)行測定。最終計算左炔孕諾酮的回收率為99.53%。

3 討 論

由于早在2015年版本的藥典中，并沒有明確規(guī)定左炔諾孕酮片藥物的溶出度實際標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值指標(biāo)，且對于一些經(jīng)口服用的固體藥物制劑，其實際的溶出度也算作是對生物利用度進(jìn)行的一系列反應(yīng)，且屬于比較快捷的體外生物指標(biāo)，更是控制人體服用藥物劑量的關(guān)鍵評估數(shù)據(jù)指標(biāo)[4]。特別是對于一些很難溶劑的治療藥物而言，臨床生物藥劑學(xué)家認(rèn)為，這些難以溶解的藥物在被人體服用之后，其進(jìn)行溶解的一系列過程，也是人體吸收藥物被限制的相關(guān)因素以及步驟。因此，掌握藥物的實際溶解度也是控制藥物制劑質(zhì)量的實際判斷指標(biāo)[5]。此外，難以溶解的治療藥物在實際制備的過程中，藥物生產(chǎn)原料的實際生產(chǎn)企業(yè)、藥物制備的相關(guān)工藝以及使用的輔助藥物都存在部分的差異，這些差異都會導(dǎo)致藥物最終的溶解度不同，并對藥物的生物使用度產(chǎn)生直接的影響。因此，想要良好的控制并評價左炔諾孕酮片藥物，就需要建立合理的藥物溶解度檢測方法，通過使用科學(xué)、合理、操作性強的方法對藥物進(jìn)行驗證，從而反應(yīng)出藥物的實際品質(zhì)[6]。

與此同時，左炔諾孕酮藥物作為一種難溶度較高的臨床藥物，其可以依據(jù)生物藥劑學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)劃分為低溶解性高滲透性的藥物，其在實際溶出的過程中，常由于自身的特殊性限制人體吸收的速度。此外，左炔諾孕酮片藥物在人體內(nèi)72小時后，可以基本被人體完全代謝，所以該藥物的清洗周期為1周的時間。并且，左炔諾孕酮片作為國家的基本藥物，其被收載與中國藥典的2015年版本第二部中。而左炔諾孕酮藥物作為一種緊急避孕藥物，通常服用劑量為1-2片，所以需要充分重視藥物的品質(zhì)，并通過建立高效的溶解度檢測方法，充分保證藥物的實際有效性。

按照上述實驗方法，分別測量左炔諾孕酮藥物的實驗溶液，以及溶出度。實驗檢測人員需要充分結(jié)合實際情況分析，由于檢驗產(chǎn)品的規(guī)格比較小，再結(jié)合檢驗靈敏程度實驗。因此，實驗人員需要選擇籃法或漿法進(jìn)行溶出度的考量與觀察，而溶劑量在1000 mL也能滿足漏槽的相關(guān)條件。

根據(jù)2015年版本《中國藥典》第二部中對左炔諾孕酮片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，沒有溶出度檢查項目，而對于及經(jīng)口服用的固體藥物制劑，溶出度是檢測藥物質(zhì)量的重要指標(biāo)，也是藥物質(zhì)量掌控的一種方法。本次實驗研究過程建立的左炔諾孕酮溶出度檢測方法具有較高的可行性，且回收率良好，可以評價該藥物制劑的安全性以及有效性，為廣大研究人員提供一個有效的檢驗方法。