王東輝,曹麗萍,湯彤國
(1.張掖市甘州區(qū)畜牧獸醫(yī)工作站,甘肅 張掖 734000;2.甘肅省動物疫病預(yù)防控制中心,甘肅 蘭州 730046;3.張掖市甘州區(qū)黨寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,甘肅 張掖 734000)
2019年9月30日-10月22日,選擇張掖市甘州區(qū)農(nóng)區(qū)某鄉(xiāng)鎮(zhèn)1戶舍飼養(yǎng)羊戶飼養(yǎng)的1群綿羊,除去種公羊和出生3月齡以內(nèi)的羔羊,將剩余的53只母羊作為試驗羊只;試驗所用3種疫苗均為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準的正規(guī)企業(yè)生產(chǎn),其中:小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗(Clone9株+AV41株)批號c0919013,山羊痘活疫苗批號19115009,小反芻獸疫疫苗批號2018023-1;試驗所用羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn),批號為20190919119,小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒由青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心生產(chǎn),批號020171907;試驗所用酶標儀為深圳雷杜公司生產(chǎn),型號RT6100。
將試驗羊只隨機分為4組。試驗1組(小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗免疫組),分配試驗羊20只;對照1組(山羊痘活疫苗免疫組),分配試驗羊15只;對照2組(小反芻獸疫疫苗免疫組),分配試驗羊15只;試驗2組(山羊痘活疫苗與小反芻獸疫疫苗同時分點免疫組),剩余的試驗羊3只,用油漆對各組試驗羊做了明顯的區(qū)分標記,對各組分別按照各種疫苗說明書規(guī)定劑量和部位進行免疫注射。
表1 小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)苗免疫效果實驗室檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計
按照試驗指標設(shè)置了試驗期羊只采食、精神狀態(tài)及發(fā)病死亡等不良反應(yīng)記錄表,由畜主每天記錄,以取得安全性評價數(shù)據(jù);免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d分別對各組羊只采血,分離出羊血清后統(tǒng)一編號集中保存,用于實驗室抗體檢測,以取得免疫性評價數(shù)據(jù)。
第8 d、第15 d試驗1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽羊只增加數(shù)量與對照1、對照2組增加數(shù)量的差異顯著性采用生物統(tǒng)計均數(shù)差異性T檢驗方法進行檢驗。
根據(jù)畜主記錄,在整個試驗期,試驗羊群均未表現(xiàn)出食欲減退、免疫過敏、流產(chǎn)和死亡等不良反應(yīng)。
在實驗室對免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d各組羊只采集的血清,應(yīng)用酶標儀按照羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒和小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒檢測方法進行免疫抗體效價檢測,并對第8 d、第15 d試驗1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽羊只增加量與對照1、對照2組增加量的顯著性采用生物統(tǒng)計均數(shù)差異性T檢驗,結(jié)果見表1。
在試驗過程中,試驗羊群未出現(xiàn)過敏、流產(chǎn)和死亡,也沒有其他不良反應(yīng),表明該二聯(lián)苗具有較好的安全性。
從實驗室抗體檢測結(jié)果看,該二聯(lián)苗在注射后第8 d產(chǎn)生免疫抗體,其中:羊痘抗體轉(zhuǎn)陽個體增加數(shù)與對照1組相比無顯著差異,小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽個體增加數(shù)與對照2組相比差異極顯著;第15 d抗體水平達到高峰,二聯(lián)苗與單苗比較羊痘抗體轉(zhuǎn)陽個體增加數(shù)與對照1組相比差異顯著,小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽個體增加數(shù)與對照2組相比差異極顯著,說明該二聯(lián)苗在抗體產(chǎn)生速度上優(yōu)于對照組,具有較好的免疫效果。
鑒于試驗條件所限,沒有做攻毒和抗體消減實驗,缺乏對該二聯(lián)疫苗保護性及免疫抗體維持時間等實驗數(shù)據(jù),有待進一步驗證。
試驗2組系附帶試驗兩種疫苗同時免疫之效果,與本試驗關(guān)系不大,可忽略。
本試驗表明,該小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗用于綿羊小反芻獸疫和羊痘兩種疫病的預(yù)防免疫,具有較好的安全性和較強的免疫效果,僅從免疫安全性、免疫后抗體產(chǎn)生快慢和抗體水平以及疫苗和人工成本等經(jīng)濟性綜合考慮,該二聯(lián)苗對小反芻獸疫疫苗和山羊痘疫苗具有一定的可替代性。