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    灰樹花發(fā)酵工藝的研究進展

    2020-09-22 22:57:55盛嘉俊鄒艾一何建輝
    食品安全導刊·中旬刊 2020年8期

    盛嘉俊 鄒艾一 何建輝

    該文簡要概述了近年來灰樹花發(fā)酵工藝的技術研究,以灰樹花菌種選育、液體發(fā)酵及固體發(fā)酵為切入點,闡明并總結了灰樹花發(fā)酵工藝的現(xiàn)狀,期望能給灰樹花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供理論指導和技術參考,促進該產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

    關鍵詞:灰樹花;菌種選育;液體發(fā)酵;固體發(fā)酵

    近年來,菌類作為功能性食品和有益健康的藥物來源變得很有吸引力?;覙浠ǎ℅rifola frondosa),又稱舞茸、云蕈、千佛菌,在日本、歐洲、北美和我國許多地區(qū)都有它的報道[1]。上世紀80年代初,日本率先開發(fā)出灰樹花人工栽培技術后,不斷有新的研究成果被報道,這些研究成果都表明灰樹花具有多種藥理作用[2-5],加之酥脆的口感和濃郁的香氣,被認為是十分珍貴的藥食用真菌,有著“菌中王子”的美稱。由此也導致了對灰樹花的需求量上漲。

    隨著發(fā)酵技術在灰樹花產(chǎn)業(yè)中的運用,關于灰樹花的發(fā)酵研究也被陸續(xù)報道,現(xiàn)今已發(fā)現(xiàn)灰樹花菌絲體與子實體在藥理和化學上的差異性較小[6],運用發(fā)酵技術開發(fā)灰樹花是可行的。為此,該文整理了近年來灰樹花發(fā)酵工藝的技術研究,并對其進行了歸納和總結,期望能給灰樹花的工業(yè)化生產(chǎn)與開發(fā)提供理論指導和技術參考,促進灰樹花產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

    灰樹花菌種選育

    優(yōu)良菌種是發(fā)酵工業(yè)的基礎和關鍵,也是顯著提高產(chǎn)品產(chǎn)量和質量的前提。目前獲取優(yōu)良菌種的方式主要有自然選育和誘變選育,誘變選育與自然選育相比,突變的頻率和變異的幅度要高很多[7]。正是如此,灰樹花的菌種選育大多采用誘變育種。

    據(jù)陳石良等[8]報道,對灰樹花實施連續(xù)紫外誘變后,得到的菌株能在液體培養(yǎng)基中快速生長,提高菌絲體含量和多糖總量的幅度分別有129.1%和75.6%。又有張建[9]經(jīng)過試驗得出灰樹花紫外誘變時間為30 s,微波誘變時間為10 s,在20 L發(fā)酵罐中培養(yǎng)后,多糖含量和菌絲體產(chǎn)量都大大提高。郭嘉瑞[10]也采用類似的方式,先對灰樹花菌絲進行70 s微波輻照,再進行15 min紫外線照射,選育了一株高產(chǎn)多糖的菌株,其胞內(nèi)外多糖產(chǎn)量與菌絲體生物量都有較大提高。還有Chen Zhao等[11]將灰樹花菌絲打碎后利用宇宙射線獲得了高產(chǎn)胞外多糖的菌株。

    此外,還有利用原生質體進行誘變的報道。全衛(wèi)豐[12]利用2%溶壁酶對灰樹花菌絲進行酶解,發(fā)現(xiàn)酶解溫度32 ℃,酶解3 h是制備灰樹花原生質體的最佳參數(shù),接著在距離樣品20 cm處,用15 W紫外燈管照射60 s,最終菌絲體干重和胞內(nèi)多糖含量都得到了很大提高。徐志祥[13]等也采用類似方法成功篩選出高產(chǎn)多糖的菌株。

    灰樹花液體發(fā)酵工藝

    液體發(fā)酵技術最早出現(xiàn)在20世紀40年代的美國,此后被廣泛運用于藥食用真菌的培養(yǎng),灰樹花也不例外。

    在搖床培養(yǎng)階段,一般以確定培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件為主。楊箐[14]和張醫(yī)芝[15]通過優(yōu)化培養(yǎng)基,都顯著提高了菌絲體和多糖含量。楊浣漪[16]也通過培養(yǎng)基優(yōu)化,提高了灰樹花菌絲體生物量1.9倍、胞內(nèi)多糖含量0.75倍以及β-葡萄糖苷酶活力2.71倍。具體搖床發(fā)酵工藝見表1。

    在小型發(fā)酵罐培養(yǎng)階段,Lee等[17]采用自定向優(yōu)化技術對5 L攪拌式發(fā)酵罐培養(yǎng)灰樹花進行了優(yōu)化,得出pH值 5.06、通氣量1.16 vvm、攪拌速度166 rpm為最佳條件。繼續(xù)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)pH值、溶氧和流體力學對菌絲形態(tài)有顯著影響,進而會抑制胞外多糖產(chǎn)生。當菌絲形狀為羽狀菌絲團時,在最佳培養(yǎng)條件下,能得到最大生物量16.8 g/L,胞外多糖5.3 g/L。在5 L氣升式發(fā)酵罐中進一步培養(yǎng),也發(fā)現(xiàn)菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量均低于攪拌式發(fā)酵罐。對于發(fā)酵罐類型如何選擇,李炳功等[18]也有類似報道。Shih等[19]對5 L攪拌式發(fā)酵罐補料分批發(fā)酵和分批發(fā)酵進行了研究。結果顯示,當培養(yǎng)基中葡萄糖濃度低于5 g/L時,進行葡萄糖分批補料,可大大增強灰樹花菌絲生物量和胞外多糖的積累,且兩者高于分批發(fā)酵。

    有時添加一定量果蔬汁、中藥提取物、植物油、滑石粉和氧化鋁等也可以提高產(chǎn)物含量。吳林秀[20]向灰樹花液體培養(yǎng)基中加入果蔬汁,提高了菌絲體生物量。侯曉梅[21]等發(fā)現(xiàn)一定量的中藥提取物可以顯著提高灰樹花胞外多糖。雷德柱等[22]往灰樹花液體培養(yǎng)基中加入多種植物油,發(fā)現(xiàn)較低濃度的橄欖油可促使胞外多糖的形成,而較低濃度的豆油則可提高菌絲體含量。Hsieh等[23]證實在不同氧濃度下,添加橄欖油可提高菌絲生物量和多糖含量。在2008年,Hsieh等[24]又報道紅花籽油、大豆油、葵花籽油都有利于灰樹花菌絲生長,而紅花籽油和葵花籽油卻會抑制胞外多糖產(chǎn)生。然而Shih等[19]發(fā)現(xiàn)所有植物油都不能提高灰樹花胞外多糖產(chǎn)量。楊箐[14]也于2009年提出1%的葵花籽油不利于形成灰樹花多糖。還有報道通過滑石粉和氧化鋁來提高灰樹花菌絲體和多糖的[25,26]。這些都說明一定量的不同添加物對產(chǎn)物存在不同程度的影響。

    此外,通過磁場輔助、改進發(fā)酵設備來提高灰樹花液體發(fā)酵工藝也被證明是有效的[27,28]。

    灰樹花固體發(fā)酵工藝

    相比液體發(fā)酵,固體發(fā)酵基本不含游離水并且微生物在接近自然狀態(tài)的情況下生長,可產(chǎn)生一些在液體發(fā)酵中不產(chǎn)生的酶或者其它代謝產(chǎn)物。Huang等[29]通過固態(tài)發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)灰樹花含有很高的植酸酶活性。當利用糙米作為培養(yǎng)基質時,顯著的抗氧化特性會體現(xiàn)出來,同時黃酮類化合物和總酚含量也會提高。因此,利用菌類分解植酸,可以增加肌醇含量,提高發(fā)酵產(chǎn)物的生理活性。2008年,Svagelj等[30]提出濕度大于70%有利于灰樹花菌絲在固體基質上的生長和多糖產(chǎn)生。劉偉民等[31]在2010年也提出水分和pH值對灰樹花固體發(fā)酵的有很大影響。此外,根據(jù)Vaher等[32]的研究,Postemsky等[33]發(fā)現(xiàn)利用固態(tài)發(fā)酵含灰樹花菌絲的麥麩可增強麥麩的抗氧化活性,這也說明利用固態(tài)發(fā)酵灰樹花可產(chǎn)生高附加值的產(chǎn)品。

    灰樹花作為一種珍貴的藥食用真菌,其藥食用價值已得到認可。但灰樹花產(chǎn)業(yè)在發(fā)酵工藝方面還有很多地方亟需完善,比如提高優(yōu)良菌種選育的概率,發(fā)酵放大工藝、發(fā)酵過程技術等。不管何種方式,都是為了盡可能地開發(fā)灰樹花的藥食用價值。隨著消費者健康意識不斷加強,已有很多灰樹花產(chǎn)品被開發(fā)出來或者正在被開發(fā),如灰樹花保健飲料[34],抗腫瘤藥膳等[35],這都表明該產(chǎn)業(yè)良好的發(fā)展趨勢,相信該產(chǎn)業(yè)的前景一定是光明的。

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    作者簡介:盛嘉俊,男,碩士研究生,研究方向為應用生物技術。

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