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    復(fù)方小兒退熱栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究

    2020-09-21 08:46謝思敏陳家儀湯迎湛顧利紅栗建明侯惠嬋
    中國藥房 2020年17期
    關(guān)鍵詞:鑒別質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測定

    謝思敏 陳家儀 湯迎湛 顧利紅 栗建明 侯惠嬋

    摘 要 目的:提高復(fù)方小兒退熱栓的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:在原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,建立處方中人工牛黃和南板藍(lán)根的薄層色譜(TLC)鑒定方法;建立膽酸、豬去氧膽酸、對乙酰氨基酚含量測定的高效液相色譜(HPLC)法。結(jié)果:復(fù)方小兒退熱栓中人工牛黃和南板藍(lán)根的TLC 圖譜均與相應(yīng)的對照品或?qū)φ账幉脑谙嗤恢蒙巷@現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn),且相應(yīng)的陰性樣品無干擾。HPLC法采用色譜柱分別為Welch Xtimate C18柱(膽酸、豬去氧膽酸)、Agilent ZORBAX SB-C18柱(對乙酰氨基酚);流動(dòng)相分別為乙腈-0.5%甲酸溶液(梯度洗脫,膽酸、豬去氧膽酸)、甲醇-水溶液(20 ∶ 80,V/V,對乙酰氨基酚);流速為1.0 mL/min;蒸發(fā)光散射檢測器的漂移管溫度為105 ℃,載氣流速為2.0 L/min(膽酸、豬去氧膽酸);紫外檢測波長為244 nm(對乙酰氨基酚)。膽酸、豬去氧膽酸、對乙酰氨基酚進(jìn)樣量分別在0.150 0~4.500 0、0.212 5~6.375 0、0.081 9~1.638 5 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r均大于0.999 2);精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)的RSD均小于3%(n=6或n=7);平均加樣回收率分別為100.35%、101.39%、98.81%,RSD均小于3%(n=6)。結(jié)論:本研究在復(fù)方小兒退熱栓原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,增加了人工牛黃和南板藍(lán)根的TLC鑒別方法,并采用HPLC法測定膽酸、豬去氧膽酸、對乙酰氨基酚的含量,能有效地提高該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

    關(guān)鍵詞 復(fù)方小兒退熱栓;薄層色譜;高效液相色譜法;鑒別;含量測定;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

    ABSTRACT? ?OBJECTIVE: To improve the quality standard of Compound child antifebrile suppository. METHODS: Based on the previous quality standard, TLC identification methods were established for artificial cow-bezoar and Baphicacanthis Cusiae Rhizoma et Radix. HPLC method was established for content determination of choleic acid (CA), hyodeoxycholic acid (HDCA) and paracetamol. RESULTS: TLC chromatogram of artificial cow-bezoar and Baphicacanthis Cusiae Rhizoma et Radix all showed the same color spots in the same position as the corresponding substance control or reference medicinal material, while the negative samples had no interference. HPLC was performed on Welch Xtimate C18 column (CA, HDCA) or Agilent ZORBAX SB-C18 column (paracetamol) with mobile phase consisted of acetonitrile-0.5% formic acetic acid (by gradient elution, CA and HDCA) or methanol-water (20 ∶ 80,V/V,paracetamol) at the flow rate of 1.0 mL/min. ELSD was used with a nitrogen flow-rate of 2.0 L/min at a drift tube temperature of 105 ℃(CA, HDCA). The detection wavelength was set at 244 nm(paracetamol). The linear ranges of CA, HDCA, paracetamol were 0.150 0-4.500 0, 0.212 5-6.375 0, 0.081 9-1.638 5 μg(all r>0.999 2). RSDs of precision,reproducibility and stability tests were all lower than 3% (n=6 or n=7). The average recoveries were 100.35%, 101.39%, 98.81%(all RSD<3%, n=6). CONCLUSIONS: Based on previous quality standard of Compound child antifebrile suppository, TLC method is used to identify artificial cow-bezoar and Baphicacanthis Cusiae Rhizoma et Radix, and the contents of CA, HDCA and paracetamol are determined by HPLC, which can effectively improve the quality control standard of the preparation.

    KEYWORDS? ?Compound child antifebrile suppository; TLC; HPLC; Identification; Content determination; Quality standard

    復(fù)方小兒退熱栓由對乙酰氨基酚、人工牛黃、南板藍(lán)根組成,具有解熱鎮(zhèn)痛、利咽解毒、祛痰定驚的功效,在治療小兒發(fā)熱、上呼吸道感染、支氣管炎、驚悸不安、咽喉腫痛、肺熱痰多、咳嗽等癥方面,具有較好的療效[1-4],特別是針對小兒高熱驚厥癥,其臨床療效顯著[5-7]。

    本品現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑(第14冊)》[8]及企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)。各標(biāo)準(zhǔn)中均采用紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚含量,采用高效液相色譜法(HPLC)測定人工牛黃中膽紅素的含量。但紫外分光光度法的專屬性較差,不能完全排除處方中其他成分對測定結(jié)果的干擾,具有一定的局限性;另外,膽紅素的含量低且性質(zhì)不穩(wěn)定,測定其含量來控制人工牛黃的質(zhì)量意義不大[9-11]。膽酸和豬去氧膽酸為人工牛黃的主要成分,且性質(zhì)比較穩(wěn)定[12-14],因此本研究擬以這兩種成分作為人工牛黃的質(zhì)控成分?;诖?,本研究在復(fù)方小兒退熱栓原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,優(yōu)化人工牛黃和南板藍(lán)根的薄層色譜(TLC)鑒別方法,建立處方中人工牛黃中膽酸、豬去氧膽酸、對乙酰氨基酚的HPLC含量測定方法,以期為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高提供參考。

    1 材料

    1.1 儀器

    1260 Ⅱ型HPLC儀(包括G7111A型四元泵、G7129A型自動(dòng)進(jìn)樣器、G7117C型二極管陣列檢測器)、Alltech 6000 型蒸發(fā)光散射檢測器、OpenLab CDS 2.2型色譜工作站均購自美國Agilent公司;XS 204型電子天平、XP26型電子天平(瑞士Mettler-Toledo公司);DigistoreⅡ型薄層色譜數(shù)碼成像儀(瑞士Camag公司);P300H 型超聲波儀(德國Elma公司);TW20型水浴鍋(德國Julabo公司)。

    1.2 藥品與試劑

    17批復(fù)方小兒退熱栓樣品(生產(chǎn)企業(yè)A,批號(hào)分別為:20180301、20181005、20190301、20190604,規(guī)格:1.0 g/粒;生產(chǎn)企業(yè)B,批號(hào)分別為:B05001、B05002、B05003,規(guī)格:0.7 g/粒;生產(chǎn)企業(yè)C,批號(hào)分別為:180301、180302、180303、180401、180402、180403、180601、180602、180603、180604,規(guī)格:0.7 g/粒);膽酸對照品(批號(hào):100078-201415,純度:98.9%)、豬去氧膽酸對照品(批號(hào):100087-201411,純度:99.7%)、對乙酰氨基酚對照品(批號(hào):100018-201610,純度:99.9%)、人工牛黃對照藥材(批號(hào):121197-201204)、南板藍(lán)根對照藥材(批號(hào):120971-201507)均購自中國食品藥品檢定研究院;甲醇、乙睛為色譜醇,水為超純水。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 TLC鑒別

    2.1.1 人工牛黃的TLC鑒別 取復(fù)方小兒退熱栓樣品,研勻,取適量(約含對乙酰氨基酚450 mg),精密稱定,精密加入甲醇100 mL,稱定質(zhì)量,置于50 ℃水浴中超聲(功率:380 W,頻率:37 kHz)10 min,取出,放冷至室溫,用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量,于0~4 ℃放置1.5 h后,以? ? ? 3 000 r/min離心5 min,取上清液放至室溫。精密量取該上清液50 mL,水浴蒸干,殘?jiān)枚燃淄?甲醇(1 ∶ 1,? ?V/V)10 mL溶解后,上中性氧化鋁柱(100~200目,柱內(nèi)徑為10 mm);先用二氯甲烷20 mL洗脫,棄去洗脫液;再用甲醇30 mL洗脫,棄去洗脫液;繼用含20%濃氨液的甲醇溶液80 mL洗脫,收集洗脫液,水浴蒸干,殘?jiān)蛹状既芙夂?,轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得供試品溶液。取缺人工牛黃陰性樣品(由生產(chǎn)企業(yè)C提供,下同),按上述制備方法操作,制得缺人工牛黃陰性對照溶液。取人工牛黃對照藥材15 mg,加甲醇2 mL,振搖5 min,靜置,取上清液作為人工牛黃對照藥材溶液。分別取膽酸、豬去氧膽酸對照品適量,加甲醇制成每1 mL分別含膽酸0.5 mg、豬去氧膽酸0.5 mg的對照品溶液。取上述供試品溶液、缺人工牛黃陰性對照溶液各4 μL,人工牛黃對照藥材溶液、膽酸對照品溶液、豬去氧膽酸對照品溶液各2 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G預(yù)制薄層板上,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(20 ∶ 25 ∶ 3 ∶ 2,V/V/V/V)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃條件下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,分別置于日光燈及紫外光燈(365 nm)下檢視。結(jié)果,在與人工牛黃對照藥材、膽酸對照品、豬去氧膽酸對照品色譜相應(yīng)的位置上,17批樣品均呈現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)和熒光斑點(diǎn),且缺人工牛黃陰性樣品無干擾,詳見圖1。

    2.1.2 南板藍(lán)根的TLC鑒別 取缺南板藍(lán)根陰性樣品,按“2.1.1”項(xiàng)下供試品溶液的制備方法操作,制得缺南板藍(lán)根陰性對照溶液。取南板藍(lán)根對照藥材2 g,加乙醇50 mL,加熱回流1 h,濾過,濾液水浴蒸干,殘?jiān)眉状? mL溶解,以3 000 r/min離心5 min,取上清液作為南板藍(lán)根對照藥材溶液。取“2.1.1”項(xiàng)下供試品溶液和上述缺南板藍(lán)根陰性對照溶液、南板藍(lán)根對照藥材溶液各6 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G預(yù)制薄層板上,以乙酸乙酯-甲醇-水(13 ∶ 7 ∶ 5,V/V/V)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%茚三酮乙醇溶液,在105 ℃條件下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,置于日光燈下檢視。結(jié)果,在與南板藍(lán)根對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,17批樣品均呈現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn),且缺南板藍(lán)根陰性樣品無干擾,詳見圖 2。

    2.2 人工牛黃中膽酸、豬去氧膽酸的含量測定采用HPLC-蒸發(fā)光散射法進(jìn)行測定。

    2.2.1 色譜條件 色譜柱為Welch Xtimate-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相為乙腈(A)-0.5%甲酸溶液(B),梯度洗脫(0~20 min,30%A → 60%A; 20~21 min,60%A→ 95%A;21~26 min,95%A;26~27 min,95%A→30%A);流速為1.0 mL/min;柱溫為35 ℃;進(jìn)樣量為10 μL。采用蒸發(fā)光散射檢測器,漂移管溫度為105 ℃,載氣流速為2.0 L/min。

    2.2.2 溶液的制備 稱取膽酸對照品2.919 mg、豬去氧膽酸對照品3.555 mg,置于同一25 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL分別含膽酸0.12 mg、豬去氧膽酸0.14 mg的混合溶液,即混合對照品溶液1。稱取膽酸對照品3.607 mg、豬去氧膽酸對照品4.233 mg和對乙酰氨基酚對照品1.774 g,置于同一200 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL分別含膽酸17.84 μg、豬去氧膽酸21.10 μg、對乙酰氨基酚8.86 mg的混合溶液,即混合對照品溶液2。

    2.2.3 專屬性試驗(yàn) 分別取“2.2.2”項(xiàng)下混合對照品溶液1和“2.1.1”項(xiàng)下供試品溶液、缺人工牛黃陰性對照溶液適量,按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄色譜圖。結(jié)果,膽酸、豬去氧膽酸與相鄰色譜峰分離良好,理論板數(shù)按膽酸峰計(jì)不低于5 000,且缺人工牛黃陰性樣品無干擾,表明本方法專屬性良好,詳見圖3。

    2.2.4 線性關(guān)系考察 稱取膽酸對照品30.113 mg、豬去氧膽酸對照品42.462 mg,置于50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL分別含膽酸0.60 mg、豬去氧膽酸0.85 mg的混合對照品母液。分別精密吸取該母液0.5、1、2、5、8、10、15 mL,置于20 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得系列混合對照品溶液。分別精密吸取上述系列混合對照品溶液各10 μL,按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。分別以膽酸、豬去氧膽酸峰面積對數(shù)值(y)為縱坐標(biāo)、進(jìn)樣量對數(shù)值(x, μg)為橫坐標(biāo),繪制回歸曲線。結(jié)果,膽酸的回歸方程為y=1.696x+3.091 0(r=0.999 9),豬去氧膽酸的回歸方程為y=1.679 2x+3.053 2(r=0.999 3),表明膽酸、豬去氧膽酸進(jìn)樣量分別在0.150 0~4.500 0、0.212 5~6.375 0? ?μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好

    2.2.5 檢測限與定量限考察 取“2.2.2”項(xiàng)下混合對照品溶液1適量,用甲醇逐級稀釋,按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,分別以信噪比3 ∶ 1、10 ∶ 1計(jì)算檢測限和定量限。結(jié)果,膽酸、豬去氧膽酸的檢測限分別為36、42 ng,定量限分別為72、84 ng。

    2.2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對照品溶液1適量,按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次,記錄峰面積。結(jié)果,膽酸、豬去氧膽酸峰面積的 RSD分別為0.84%、0.69%(n=6),表明儀器精密度良好。

    2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.1.1”項(xiàng)下同一供試品溶液(批號(hào):20190301),于室溫下放置0、2、4、6、8、12、24 h 后,按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果,膽酸、豬去氧膽酸峰面積的RSD分別為2.59%、0.27%(n=6),表明供試品溶液在室溫下放置24 h 內(nèi)基本穩(wěn)定。

    2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取復(fù)方小兒退熱栓樣品(批號(hào):20190301)共6份,每份約3.0 g,按“2.1.1”項(xiàng)下“精密稱定,……,取續(xù)濾液”方法制備供試品溶液,再按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,以外標(biāo)對數(shù)法計(jì)算膽酸、豬去氧膽酸含量。結(jié)果,膽酸、豬去氧膽酸平均含量分別為0.29、0.36 mg/g,RSD分別為2.49%、2.99%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。

    2.2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知膽酸、豬去氧膽酸含量的樣品(批號(hào):20190301)共6份,每份約1.5 g,精密加入25 mL “2.2.2”項(xiàng)下混合對照品溶液2和75 mL甲醇,按“2.1.1”項(xiàng)下“稱定質(zhì)量,……,取續(xù)濾液”方法制備供試品溶液,再按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,并計(jì)算加樣回收率,結(jié)果見表1。

    2.2.10 樣品含量測定 分別取17批復(fù)方小兒退熱栓樣品適量,按“2.1.1”項(xiàng)下“精密稱定,……,取續(xù)濾液”方法制備供試品溶液,再按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,按外標(biāo)對數(shù)法計(jì)算膽酸、豬去氧膽酸含量,平行2份操作,取平均值,結(jié)果見表2。

    2.3 對乙酰氨基酚的含量測定采用HPLC-紫外法進(jìn)行測定。

    2.3.1 色譜條件 色譜柱為Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相為甲醇-水(20 ∶ 80,? ? ?V/V);流速為1.0 mL/min;柱溫為30 ℃;檢測波長為244 nm;進(jìn)樣量為10 μL。

    2.3.2 溶液的制備 稱取對乙酰氨基酚對照品3.605 mg,置于50 mL量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL含72.03 μg對乙酰氨基酚的溶液,即得乙酰氨基酚對照品溶液。取復(fù)方小兒退熱栓樣品適量,按“2.1.1”項(xiàng)下“研勻,取適量……于0~4 ℃放置1.5 h后,以3 000 r/min離心5 min,取上清液放至室溫”方法處理。然后取該上清液5 mL,置于25 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻;再精密量取該稀釋溶液2 mL,置于25 mL量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得供試品溶液。取缺對乙酰氨基酚陰性樣品,按上述供試品溶液制備方法處理,即得缺對乙酰氨基酚陰性對照溶液。

    2.3.3 專屬性試驗(yàn) 取“2.3.2”項(xiàng)下對乙酰氨基酚對照品溶液、供試品溶液和缺對乙酰氨基酚陰性對照溶液適量,按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄色譜圖。結(jié)果,對乙酰氨基酚色譜峰對稱,基線分離良好,理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰計(jì)應(yīng)不低于2 000,且陰性對照無干擾,表明本方法專屬性良好,詳見圖4。

    2.3.4 線性關(guān)系考察 稱取對乙酰氨基酚對照品20.502 mg,置于100 mL量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL含對乙酰氨基酚204.81 μg的對照品母液;分別精密吸取該母液1、2、5、10、15、20 mL,置于25 mL量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,即得系列對照品溶液。分別精密吸取上述系列對照品溶液適量,按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定。以對乙酰氨基酚峰面積(y)為縱坐標(biāo)、進(jìn)樣量(x,μg)為橫坐標(biāo),繪制回歸曲線。結(jié)果,對乙酰氨基酚的回歸方程為y=22 589x-64.731(r=0.999 5),表明對乙酰氨基酚進(jìn)樣量在0.081 9~1.638 5 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.3.5 檢測限與定量限考察 取“2.3.2”項(xiàng)下對乙酰氨基酚對照品溶液適量,以流動(dòng)相逐級稀釋,按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,分別以信噪比3 ∶ 1、10 ∶ 1計(jì)算檢測限和定量限。結(jié)果,對乙酰氨基酚的檢測限和定量限分別為0.86、2.88 pg。

    2.3.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.3.2”項(xiàng)下對乙酰氨基酚對照品溶液適量,按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣 6 次,記錄峰面積。結(jié)果,對乙酰氨基酚峰面積的 RSD 為0.05%(n=6),表明儀器精密度良好。

    2.3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3.2”項(xiàng)下供試品溶液(批號(hào):20190301),于室溫條件下放置0、2、4、6、8、12、24 h 后,按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果,對乙酰氨基酚峰面積的RSD為 0.08%(n=7),表明供試品溶液在室溫放置 24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.3.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取復(fù)方小兒退熱栓樣品(批號(hào):20190301)適量,共6份,按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,以外標(biāo)法計(jì)算對乙酰氨基酚含量。結(jié)果,對乙酰氨基酚的平均含量為154.65 mg/g,RSD為1.03%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。

    2.3.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知對乙酰氨基酚含量的復(fù)方小兒退熱栓樣品(批號(hào):20190301)共6份,每份約1.5 g,分別置于錐形瓶中,精密加入25 mL “2.2.2”項(xiàng)下混合對照品溶液2和75 mL甲醇,按“2.1.1”項(xiàng)下“稱定質(zhì)量……上清液放至室溫”方法處理后,精密吸取上清液5 mL,按“2.3.2”項(xiàng)下“置于25 mL量瓶中用甲醇稀釋至刻度……取續(xù)濾液”方法制備供試品溶液,再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,并計(jì)算加樣回收率,結(jié)果見表3。

    2.3.10 樣品含量測定 分別取17批復(fù)方小兒退熱栓樣品適量,精密稱定,按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,按外標(biāo)法計(jì)算對乙酰氨基酚的含量,平行2份操作,取平均值,結(jié)果見表2。

    3 討論

    3.1 TLC鑒別方法的改進(jìn)

    為了評價(jià)TLC法的適用性,本研究前期對TLC法進(jìn)行了耐用性試驗(yàn),分別從溫度(4 ℃和室溫)、相對濕度(32%~72%)以及不同品牌硅膠G預(yù)制板(廠家分別為青島海洋化工廠、煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究所、德國Merck公司)等3個(gè)方面進(jìn)行考察。結(jié)果發(fā)現(xiàn),本品各項(xiàng)TLC鑒別結(jié)果不受溫度、相對濕度以及不同品牌硅膠G預(yù)制板等條件改變的影響。

    本試驗(yàn)前期在進(jìn)行人工牛黃TLC鑒別時(shí),采用企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中膽酸的處理方法,即樣品用適量乙醇在60 ℃水浴中加熱融化,放冷后濾過,濾液蒸干后用乙酸乙酯溶解作為供試品溶液;然后取適量供試品溶液、膽酸對照品溶液和豬去氧膽酸對照品點(diǎn)樣,以10%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑,以異辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸(15 ∶ 7 ∶ 5,V/V/V)為展開劑展開,并于紫外光燈(365 nm)下觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn),可檢出與膽酸對照品相應(yīng)的斑點(diǎn),但未檢出與豬去氧膽酸對照品相應(yīng)的斑點(diǎn)。采用本文改進(jìn)后的方法處理后,則同時(shí)檢出膽酸和豬去氧膽酸斑點(diǎn),且斑點(diǎn)更為清晰,色譜分離效果更好,陰性無干擾。在進(jìn)行南板藍(lán)根TLC鑒別時(shí),按企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)中南板藍(lán)根的處理方法,即樣品中加適量三氯甲烷使基質(zhì)溶解,濾過,殘?jiān)鼡]盡三氯甲烷后,將濾紙和殘?jiān)黄鹬糜跓袚v碎,加乙醚冷浸1 h,振搖,濾過,濾液置水浴鍋上濃縮至1 mL作為供試品溶液,然后進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),南板藍(lán)根陰性對照有干擾。采用本文改進(jìn)后的方法處理后,TLC斑點(diǎn)清晰,且陰性對照無干擾。

    3.2 含量測定方法的改進(jìn)

    人工牛黃由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、?;撬?、膽紅素、膽固醇、微量元素等組成,2015年版《中國藥典》(一部)人工牛黃“含量測定”項(xiàng)下采用紫外可見分光光度法測定膽酸和膽紅素含量,并規(guī)定以干燥品計(jì)算,膽酸含量不得低于13.0%,膽紅素含量不得低于0.63%[12]。但復(fù)方小兒退熱栓中膽紅素的含量較低,且性質(zhì)不穩(wěn)定,制備過程中遇光、熱易分解;另外,本品為栓劑,基質(zhì)干擾較大,前處理方法復(fù)雜;而豬去氧膽酸也是人工牛黃中的主要成分,且性質(zhì)比較穩(wěn)定[13-14]。因此,筆者通過測定成品中膽酸、豬去氧膽酸的含量來對人工牛黃的質(zhì)量進(jìn)行控制。本研究采用甲醇在50 ℃進(jìn)行超聲提取,可將樣品中各成分及基質(zhì)有效地溶解,進(jìn)一步對提取液進(jìn)行冷凍處理,可使基質(zhì)析出,同時(shí)采用中性氧化鋁柱對待測化合物進(jìn)行富集純化,避免了基質(zhì)對樣品測定及色譜柱柱效的影響。

    3.3 含量測定結(jié)果分析

    對不同生產(chǎn)企業(yè)來源的17批復(fù)方小兒退熱栓樣品的含量測定結(jié)果顯示,3家生產(chǎn)企業(yè)的樣品中膽酸含量分別為0.30~0.33、0.28~0.29、0.36~0.37 mg/粒,豬去氧膽酸含量分別為0.39~0.43、0.34~0.35、0.59~0.62 mg/粒,對乙酰氨基酚的含量分別為147.28~149.57、152.11~155.25、153.00~158.72 mg/粒。各企業(yè)產(chǎn)品的批間差異較小,但企業(yè)間產(chǎn)品存在一定的差異,這可能與復(fù)方小兒退熱栓的藥材組方原料以及生產(chǎn)工藝有一定的關(guān)系。

    綜上所述,本研究在復(fù)方小兒退熱栓原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,增加了人工牛黃和南板藍(lán)根的TLC鑒別方法,并采用HPLC法測定了膽酸、豬去氧膽酸和對乙酰氨基酚的含量,能有效地提高該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

    參考文獻(xiàn)

    [ 1 ] 侯小瑞.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒感冒發(fā)熱的療效及其安全性[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2014,20(26):116.

    [ 2 ] 克有麗.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒感冒發(fā)熱的療效和安全性[J].心血管病防治知識(shí),2014(8):132-133.

    [ 3 ] 秦瑞娟,李?,?,張霞.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒上呼吸道感染發(fā)熱療效安全性觀察[J].臨床合理用藥雜志,2014,7(2A):51-52.

    [ 4 ] 王茂平.復(fù)方小兒退熱栓治療傷風(fēng)性感冒引起的發(fā)熱癥70例臨床觀察[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,19(11):54-56.

    [ 5 ] 蘇家輝.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒高熱驚厥的臨床療效及其安全性[J].臨床合理用藥雜志,2019,12(5C):61-62.

    [ 6 ] 李華蓉,李長金.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒高熱驚厥56例療效及安全性觀察[J].中國藥業(yè),2014,23(23):109- 110.

    [ 7 ] 王維.復(fù)方小兒退熱栓治療小兒高熱驚厥的臨床效果分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2019,19(2):110-112.

    [ 8 ] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑:第14冊[S]. 1997:116.

    [ 9 ] 許江紅,溫琰,陳華敏. HPLC法測定復(fù)方小兒退熱栓中膽紅素的含量[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,17(2):41- 59.

    [10] 文為,曾嶸.復(fù)方小兒退熱栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].山西醫(yī)藥雜志,2008,37(8):720-721.

    [11] 曾嶸,文為.高效液相色譜法測定復(fù)方小兒退熱栓中膽紅素的含量[J].中國藥師,2009,12(5):616-617.

    [12] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典:一部[S]. 2015年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:5-8.

    [13] 徐陸忠,嚴(yán)鶯,周學(xué)琴. HPLC-ELSD 法測定人工牛黃甲硝唑膠囊中膽酸和豬去氧膽酸的含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2015,34(5):658-660.

    [14] 石巖,孫冬梅,熊婧,等.人工牛黃多組分測定及其質(zhì)量差異標(biāo)志物的研究[J].中國中藥雜志,2018,43(4):659- 664.

    (收稿日期:2020-05-07 修回日期:2020-06-28)

    (編輯:唐曉蓮)

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