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    豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物分子結(jié)構(gòu)分析及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)

    2020-09-18 03:48:54馬占霞田雨佳盧冬亞張學(xué)煒
    中國(guó)畜牧雜志 2020年9期
    關(guān)鍵詞:菜粕分子結(jié)構(gòu)飼料原料

    馬占霞,田雨佳,盧冬亞,張學(xué)煒

    (天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,天津市農(nóng)業(yè)動(dòng)物繁育與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384)

    隨著我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)集約化、規(guī)?;潭炔粩嗵岣?,飼養(yǎng)水平不斷提高,養(yǎng)殖業(yè)對(duì)優(yōu)質(zhì)的蛋白來(lái)源需求量不斷增加。豆粕是餅粕類飼料原料中營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最佳的一類,但由于中美貿(mào)易戰(zhàn)等原因,其價(jià)格一直居高不下;油菜是我國(guó)重要的油料作物,其加工后的副產(chǎn)物菜粕含有豐富的蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),因此也常用于奶牛日糧中[1-2]。但是由于普通菜粕中含有較高的芥酸、硫代葡糖苷及其衍生物異硫氰酸酯以及惡唑烷硫酮等抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì),會(huì)影響動(dòng)物適口性及消化率,限制了其在動(dòng)物日糧中的添加量[3-5];相反,雙低油菜因其芥酸、硫代葡糖苷含量很低(芥酸含量<2%,硫代葡糖苷含量<30 μmol/g)在世界范圍得到普遍推廣,雙低菜粕也得到廣泛應(yīng)用[6],現(xiàn)已有不少有關(guān)雙低菜粕替代豆粕飼喂畜禽的試驗(yàn)報(bào)道[7-9]。

    近年來(lái),國(guó)內(nèi)對(duì)奶牛飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的評(píng)定雖有所進(jìn)展,而國(guó)外則已經(jīng)深入到模型評(píng)估、飼料降解動(dòng)力學(xué)測(cè)定和分子結(jié)構(gòu)研究階段[10-12]。目前,國(guó)內(nèi)針對(duì)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕有關(guān)碳水化合物營(yíng)養(yǎng)模型評(píng)估較少,其分子結(jié)構(gòu)的研究鮮有報(bào)道?;诖耍狙芯客ㄟ^(guò)測(cè)定豆粕、雙低菜粕和普通菜粕中碳水化合物的分子結(jié)構(gòu),結(jié)合常規(guī)化學(xué)分析、康奈爾凈碳水化合物和蛋白質(zhì)體系(CNCPS)和NRC 模型估測(cè),比較3 種飼料原料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,以期為奶牛場(chǎng)合理利用此3 種原料提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料 分別從天津市、黑龍江省和河北省采集豆粕樣品3 份;從遼寧省、福建省采集雙低菜粕樣品3 份;從四川省、安徽省和江蘇省采集普通菜粕樣品3 份。所有樣品風(fēng)干處理、粉碎后過(guò)0.45 mm 篩,密封袋封存置于4℃冰箱備用;同時(shí),以四分法取出部分樣品,經(jīng)進(jìn)一步粉碎后過(guò)0.25 mm 篩,用于分子結(jié)構(gòu)分析。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 ATR-FT/IR 分析蛋白質(zhì)和碳水化合物分子結(jié)構(gòu)使用FTIR-7600 傅里葉變換紅外光譜儀(天津港東科技有限公司)采集所有樣品完整的光譜圖,每一個(gè)樣品平行10 次,儀器掃描參數(shù):波段4 000~800 cm-1,掃描頻次為64 次/min。為消除空氣中CO2及水蒸氣等的影響,每次采集圖譜前先進(jìn)行空白圖譜采集。將所采集樣品圖譜保存為CSV 格式,利用OMNIC 8.2 軟件(Thermo Nicolet,Madison,WI,US)對(duì)碳水化合物分子結(jié)構(gòu)圖譜進(jìn)行解析。

    1.2.2 濕化學(xué)分析 依據(jù)美國(guó)官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)標(biāo)準(zhǔn)方法分別測(cè)定豆粕、雙低菜粕及普通菜粕中的干物質(zhì)(Dry Matter,DM)、粗灰分(Ash)、粗蛋白質(zhì)(Crude Protein,CP)和粗脂肪(Ether Extract,EE)等營(yíng)養(yǎng)成分[13]。使用Megazyme 淀粉檢測(cè)試劑盒(Bray,Co.Wicklow,Ireland)測(cè)定樣品中的淀粉(Starch)含量[14];可溶性糖(Sugar)含量利用紫外分光光度計(jì)蒽酮比色法進(jìn)行測(cè)定[15]。中性洗滌纖維(Neutral Detergent Fiber,NDF)、酸性洗滌纖維(Acid Detergent Fiber,ADF)和酸性洗滌木質(zhì)素(Acid Detergent Lignin,ADL)含量測(cè)定依據(jù)Van Soest 方法進(jìn)行[16],使用ANKOM 2000i 全自動(dòng)纖維分析儀測(cè)定完成。測(cè)定NDF 和ADF 成分之后的殘樣分別用于測(cè)定中性洗滌不溶蛋白(Neutral Detergent Insoluble Crude Protein,NDICP)和酸性洗滌不溶蛋白(Acid Detergent Insoluble Crude Protein,ADICP) 含量。

    1.2.3 CNCPS 對(duì)飼料原料碳水化合物組分的剖分 根據(jù)CNCPS 6.5[17]將飼料原料碳水化合物剖分為8 個(gè)組分:揮發(fā)性脂肪酸(CA1)、乳酸成分(CA2)、其他有機(jī)酸(CA3)、糖類(CA4)、淀粉(CB1)、可溶性纖維(CB2)、可利用的中性洗滌纖維(CB3)和不可利用的中性洗滌纖維(CC),由于豆粕、雙低菜粕及普通菜粕內(nèi)均不含或只含有極少量的揮發(fā)性脂肪酸、乳酸及其他有機(jī)酸成分,故本研究?jī)H分析其中的糖類、淀粉、可溶性纖維、可利用的中性洗滌纖維及不可利用的中性洗滌纖維。計(jì)算公式:

    1.2.4 NRC 模型估測(cè)真可消化養(yǎng)分與能值 使用NRC(2001)[18-19]奶牛模型中公式估測(cè)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕在奶牛瘤胃的真可消化脂肪酸(Truly Digestible Fatty Acid,tdFA)、真可消化中性洗滌纖維(Truly Digestible Neutral Detergent Fiber,tdNDF)、真可消化非纖維碳水化合物(Truly digestible Non-Fiber Carbo hydrate,tdNFC),然后計(jì)算維持水平下的消化能(Digestible Energy Maintenance Level,DE1×),生產(chǎn)水平下(3 倍維持需要的采食量)的消化能(Digestible Energy At 3 Times Maintenance Level,DEp 或 DE3×)、生產(chǎn)水平下的(3 倍維持需要的采食量)代謝能(Meta bolic Energy At 3 Times Maintenance Level,MEp 或ME3×)和生產(chǎn)水平下的(3 倍維持需要的采食量)泌乳凈能(Net Energy For Lactation At 3 Times Maintenance Level,NELp或NEL3×);采用NRC(1996)[20]肉牛模型估測(cè)各樣品的維持凈能(Net Energy for Maintenance Level,NEm)和增重凈能(Net Energy for Growth Level,NEg)。計(jì)算公式:

    式中,PAF 為加工校正因子,在NRC(2001)模型中,PAF 假設(shè)為1,NDFn 為校正中性洗滌纖維,Discount為折扣系數(shù)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)分析 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物分子結(jié)構(gòu)試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007 軟件整理分析后,使用SAS 9.2[21]軟件中的MIXED 程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。分析所用模型:

    式中,Yij是根據(jù)變量(i、j)所得的因變量,μ 是變量(i、j)的平均值,Ti是飼料原料類型的差異,是一個(gè)固定因素,S(T)j是運(yùn)行效果,是一個(gè)隨機(jī)因素,eij是與變量ij相關(guān)的隨機(jī)誤差。

    Tukey-Karmaer 多重比較檢驗(yàn)用于比較不同處理組之間的差異。P<0.05 作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

    豆粕、雙低菜粕及普通菜粕化學(xué)成分和碳水化合物CNCPS 組分剖分、NRC 模型估測(cè)真可消化養(yǎng)分與能值,試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007 軟件整理分析后,使用SAS 9.2[21]軟件中的PROC MIXED 程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。分析所用模型:

    式中,Yij是根據(jù)變量(i、j)所得的因變量,μ 是變量(i、j)的平均值,F(xiàn)i是飼料原料類型的差異,是一個(gè)固定因素,eij是與變量ij 相關(guān)的隨機(jī)誤差。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的碳水化合物分子結(jié)構(gòu) 由于豆粕、雙低菜粕及普通菜粕中的淀粉和糖類含量均較少,故本研究?jī)H重點(diǎn)采集了與碳水化合物相關(guān)的β-聚葡萄糖峰高、峰面積,纖維素復(fù)合物峰高、峰面積以及總碳水化合物3 個(gè)亞峰的峰高、峰面積。由表1 可知,豆粕的β-聚葡萄糖峰高、峰面積均極顯著高于普通菜粕和雙低菜粕,雙低菜粕的β-聚葡萄糖峰面積顯著高于普通菜粕(0.207vs.0.099 IR unit);豆粕的纖維素復(fù)合物峰高、峰面積均極顯著高于普通菜粕和雙低菜粕,同時(shí)雙低菜粕纖維素復(fù)合物峰高極顯著高于普通菜粕(0.003vs.0.002 IR unit),但雙低菜粕與普通菜粕的纖維素復(fù)合物峰面積無(wú)顯著差異;豆粕的CHO峰1 區(qū)峰面積極顯著高于普通菜粕CHO 峰1 區(qū)峰面積(0.650vs.0.533 IR unit);雙低菜粕的CHO 峰2 區(qū)峰面積顯著高于普通菜粕(3.004vs.2.537 IR unit);豆粕的CHO 峰3 區(qū)峰高極顯著高于普通菜粕(0.062vs.0.051 IR unit),雙低菜粕的CHO 峰3 區(qū)峰高、峰面積均顯著高于普通菜粕(0.061vs.0.051 IR unit、4.836vs.4.031 IR unit)。

    2.2 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物相關(guān)營(yíng)養(yǎng)成分 由表2 可看出,豆粕中的ADF 極顯著低于普通菜粕;豆粕內(nèi)的ADL 顯著低于普通菜粕。

    2.3 CNCPS 對(duì)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的碳水化合物組分的剖分 由表3 可見(jiàn),豆粕內(nèi)CHO 含量極顯著低于雙低菜粕和普通菜粕,而其CB2 含量極顯著高于雙低菜粕和普通菜粕,雙低菜粕與普通菜粕內(nèi)的CHO 和CB2 含量無(wú)顯著差異;普通菜粕內(nèi)的CC 含量顯著高于豆粕。

    2.4 NRC 模型估測(cè)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的可消化養(yǎng)分含量和能值 由表4 可知,豆粕、雙低菜粕和普通菜粕三者之間的tdNFC、tdNDF、tdFA 均無(wú)顯著差異;豆粕的DE1×顯著高于普通菜粕,其 MEp、NELp均極顯著高于普通菜粕的MEp、NELp(2.93 vs.2.60 MJ/kg DM,1.86 vs.1.63 MJ/kg DM),而豆粕與雙低菜粕以及雙低菜粕與普通菜粕之間DE1×、MEp、NELp均無(wú)顯著差異;豆粕、雙低菜粕和普通菜粕三者之間的NEm、NEg 均無(wú)顯著差異。

    表1 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物分子結(jié)構(gòu)圖譜特征

    3 討 論

    3.1 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的碳水化合物分子結(jié)構(gòu)及化學(xué)指標(biāo)的對(duì)比分析 本研究中,豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的ADF 和ADL 含量依次逐漸增加,而三者纖維素復(fù)合物的峰面積卻依次減小,這與李欣新[22]以及Chen 等[23]以不同品種雙低菜粕和豆粕為分析樣本的試驗(yàn)結(jié)果一致。本研究結(jié)果進(jìn)一步表明,飼料原料中ADF 和ADL 含量與纖維素復(fù)合物的峰面積呈負(fù)相關(guān)。綜上,對(duì)于餅粕類飼料原料,纖維素復(fù)合物的峰面積越小,ADF 和ADL 含量越高,品質(zhì)越差。因此,本研究中二級(jí)分子結(jié)構(gòu)結(jié)果顯示,就碳水化合物而言,豆粕的品質(zhì)較優(yōu),雙低菜粕次之,普通菜粕的品質(zhì)最差。

    生產(chǎn)應(yīng)用中,評(píng)價(jià)飼料原料內(nèi)碳水化合物的質(zhì)量,除了分析碳水化合物組分外,還需分析飼料原料內(nèi)的分子結(jié)構(gòu)。3 種飼料原料內(nèi)不同碳水化合物官能團(tuán)吸收值不同,故其相應(yīng)的內(nèi)部分子結(jié)構(gòu)存在差異,分子結(jié)構(gòu)的差異在理論上會(huì)造成飼料原料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的區(qū)別[24],進(jìn)而影響飼料養(yǎng)分在瘤胃內(nèi)的降解率[10]以及小腸內(nèi)的吸收率[25]。Yu[26]研究表明,碳水化合物的分子結(jié)構(gòu)與其相對(duì)應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)成分以及CNCPS 所剖分的各個(gè)組分均呈一定的相關(guān)性,而且相應(yīng)組分分子結(jié)構(gòu)的峰值或峰面積可以作為預(yù)測(cè)飼料原料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的參數(shù)。

    表2 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物相關(guān)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)

    表3 CNCPS 對(duì)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物組分的剖分

    表4 NRC 模型估測(cè)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕可消化養(yǎng)分含量和能值

    3.2 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物相關(guān)營(yíng)養(yǎng)成分的對(duì)比分析 本研究發(fā)現(xiàn)豆粕中的ADF、ADL 含量低于雙低菜粕與普通菜粕,這與許文斌[27]以及孫振華[28]的研究結(jié)果一致。而雙低菜粕的ADF 與ADL 含量與普通菜粕無(wú)顯著差異;ADF 含量及其可消化水平與能量的消化率有關(guān)[29],ADL 是不被動(dòng)物消化利用的。由此表明,豆粕中纖維和能量的消化率高于雙低菜粕和普通菜粕,而后兩者間無(wú)差異。

    3.3 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的碳水化合物組分的對(duì)比分析 CNCPS 體系能夠反映出豆粕、雙低菜粕及普通菜粕中的碳水化合物和蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)的降解率和消化道內(nèi)的消化率等情況,可以評(píng)定3 種餅粕飼料原料的品質(zhì),從而更好地指導(dǎo)反芻動(dòng)物日糧的配制。本課題組已測(cè)得CNCPS 劃分的CP 亞組分在豆粕、雙低菜粕及普通菜粕間無(wú)差異,但豆粕的CP 含量高于雙低菜粕和普通菜粕,且豆粕的氨基酸含量和組分高于雙低菜粕和普通菜粕[30]。

    本試驗(yàn)中,豆粕、雙低菜粕及普通菜粕碳水化合物組分之間存在差異。豆粕的可溶性纖維組分 CB2(92.33%CHO)高于雙低菜粕(44.68%CHO)和普通菜粕(33.22%CHO),并且不可利用纖維 CC 組分很低(0.01%CHO)。唐春梅[31]和許文斌[27]研究表明,豆粕的可溶性纖維組分 CB2 和可利用中性洗滌纖維組分 CB3 都高于雙低菜粕,并且不可利用纖維 CC 組分很低,與本研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)中普通菜粕和雙低菜粕的CC 組分高于豆粕,且普通菜粕內(nèi)CC 含量達(dá)到29.28%CHO,表明普通菜粕和雙低菜粕的瘤胃不可降解碳水化合物含量較高,可降解碳水化合物相對(duì)較低,不利于飼料原料在瘤胃內(nèi)降解消化。然而,飼料原料的實(shí)際瘤胃降解特性還需經(jīng)瘤胃尼龍袋法做進(jìn)一步的驗(yàn)證。

    3.4 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的可消化養(yǎng)分含量和能值的對(duì)比分析 豆粕、雙低菜粕及普通菜粕中tdNDF含量雖然未達(dá)到顯著差異,但仍有豆粕最高、雙低菜粕次之、普通菜粕含量最低的趨勢(shì);雙低菜粕的tdNFC、tdFA 含量相對(duì)略高于豆粕和普通菜粕;一般地,飼料原料中碳水化合物含量與其能值有密切的正相關(guān)關(guān)系。就本研究結(jié)果而言,其DE1×、MEp、NELp值呈現(xiàn)出豆粕> 雙低菜粕> 普通菜粕的趨勢(shì),這與其相應(yīng)的纖維含量變化規(guī)律一致。

    4 結(jié) 論

    本試驗(yàn)對(duì)豆粕、雙低菜粕及普通菜粕的碳水化合物的營(yíng)養(yǎng)成分含量、CNCPS 組分剖分、可消化養(yǎng)分含量和能值等指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)分析和比較,結(jié)果顯示豆粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最佳,雙低菜粕次之,普通菜粕最差,同時(shí)揭示出這與其分子結(jié)構(gòu)的不同有密切關(guān)系。

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