附子理中丸對脾虛型2型糖尿病患者腸道菌群的影響*

陳威妮，段素靜，譚 薇，曾利儂，崔國禎，劉志龍

(1.珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，廣東 珠海 519020；2.遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū))

進(jìn)入新時代以來，人們的生活方式發(fā)生了巨大變化，糖尿病的發(fā)病率逐年提高，是目前威脅人類健康的世界性的慢性疾病，就我國而言糖尿病的發(fā)病率已經(jīng)達(dá)到11.6 %。有研究顯示：腸道菌群結(jié)構(gòu)與2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，尤其是肥胖及相關(guān)疾病患者，腸道菌群結(jié)構(gòu)與健康人群差異顯著[1]。附子理中丸屬于中醫(yī)溫中健脾方劑，在治療2型糖尿病方面已被證實優(yōu)勢顯著，但是其調(diào)節(jié)患者菌群結(jié)構(gòu)方面尚未有相關(guān)報道[2]。本文旨在探討分析附子理中丸對脾虛型2型糖尿病患者腸道菌群的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院門診及住院病人中收集2型糖尿病脾虛證患者80例作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會·中國2型糖尿病防治指南(2007年版)》[3]診斷標(biāo)準(zhǔn)(空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L(126 mg/dl)；或糖耐量試驗(OGTT)中服糖后2 h血糖(2HPG)≥11.1 mmol/L(200 mg/dl)；或隨機(jī)血糖≥11.1 mmol/L(200 mg/dl)，空腹血糖<10 mmol/L，年齡40～70歲，脾虛證：形體肥胖、頭身困重、神疲懶言、肢體倦怠、乏力、渴喜溫飲、胃納欠佳、大便稀溏或排便無力，舌淡、苔白膩、脈沉或弱。符合其中三點，結(jié)合舌象、脈象，可診斷脾虛證，排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡小于40周歲或大于70周歲者，合并嚴(yán)重心、肝、腎功能損害者，妊娠或哺乳期婦女，1月內(nèi)發(fā)生過糖尿病急性并發(fā)癥者，認(rèn)知功能障礙不能配合檢查和治療者，采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為治療組和對照組，各40例，治療組男21例，女18例，年齡45～68歲，平均年齡(59.81 ± 5.44)歲，病程2～12年，平均病程(8.15 ± 2.95)年，對照組男19例，女21例，年齡44～69歲，平均年齡(59.79 ± 5.39)歲，病程2～15年，平均病程(8.23 ± 2.83)年，同時選取健康體檢中心的健康人群40例，男20例，女20例，年齡44～66歲，平均年齡(59.66 ± 5.21)歲，三組人群基本信息無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性，患者均簽署知情同意書，符合倫理學(xué)要求。

1.2治療方法 對照組：給予格列齊緩釋片治療(生產(chǎn)廠家：施維雅(天津)制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字J20150121，規(guī)格：60 mg×30 s)60 mg/次，1次/d；治療組：在對照組治療的基礎(chǔ)上給予附子理中丸治療(生產(chǎn)廠家：北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z11020053，規(guī)格：9 g×10 s)，9 g/次，2次/d，早晚餐后服用，兩組患者均連續(xù)治療4周。

1.3觀察指標(biāo) 臨床療效[4]顯效：臨床癥狀和體征完全消失，中醫(yī)癥狀積分減少70 %以上，血糖值恢復(fù)正常，或下降40 %以上。有效：臨床癥狀和體征改善，中醫(yī)癥狀積分減少30 % 以上，血糖值下降20 %以上。無效：臨床癥狀和體征無改善，血糖值未明顯變化?？傆行?顯效率+有效率。

生化指標(biāo)：空腹血糖、血脂(總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C))，樣本：抽取患者空腹靜脈血5 mL，儀器：全自動生化分析儀器邁瑞B(yǎng)S-220貝登。

炎性指標(biāo)：單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、腫瘤壞死因子a(TNF-a)、白介素-10(IL-10)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，方法：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒測。

菌群測定：制備腸道細(xì)菌的DNA及實時定量PCR檢測。先稱取0.2 g糞便樣品。用細(xì)菌基因組DNA試劑盒提取糞便細(xì)菌基因組DNA和0.05 g雙歧桿菌、糞腸球菌凍干粉的標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA，-20 ℃凍存?zhèn)溆?。設(shè)計PCR引物，由大連寶生物公司設(shè)計合成。將待檢糞便樣品中提取的DNA分別進(jìn)行兩種細(xì)菌的熒光定量PCR反應(yīng)。

2 結(jié)果

2.1臨床療效比較 治療組臨床療效總有效率為95.00 %，較對照組80.00 %顯著提高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1

表1 臨床療效比較[n( %)]

2.2治療前后血糖及血脂指標(biāo)水平變化 治療前兩組患者FPG及血脂水平無顯著性差異(P>0.05)，治療后兩組患者FPG、TC、TG、LDL-C均顯著下降，HDL-C均顯著上升，且治療后治療組患者血糖及血脂改善更顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 治療前后血糖及血脂指標(biāo)水平變化

2.3治療前后炎性因子水平變化 治療前兩組患者炎性因子水平無顯著性差異(P>0.05)，治療后兩組患者M(jìn)CP-1、TNF-a、hs-CRP水平均顯著下降，IL-10水平均顯著上升，且治療后治療組患者M(jìn)CP-1、IL-10、TNF-a、hs-CRP水平改善更顯著，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 治療前后炎性因子水平變化

2.4治療前后及與健康組雙歧桿菌、糞腸球菌菌群數(shù)量比較 治療前，治療組與對照組患者雙歧桿菌、糞腸球菌菌群數(shù)量無顯著性差異(P>0.05)，但是與健康組人群相比兩組患者雙歧桿菌數(shù)量降低，糞腸球菌菌群數(shù)量升高，治療后治療組患者較對照組雙歧桿菌菌群數(shù)量顯著上升，糞腸球菌菌群數(shù)量顯著下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且與健康人群相比無顯著性差異(P>0.05)，治療后對照組患者雙歧桿菌、糞腸球菌菌群數(shù)量無顯著性變化(P>0.05)，與健康人群相比仍舊有顯著差異(P<0.05)。見表4。

表4 治療前后及與健康組雙歧桿菌、糞腸球菌菌群數(shù)量比較

3 討論

2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展與患者腸道菌群結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，健康人群的腸道菌群與機(jī)體維持平衡狀態(tài)，保護(hù)患者的腸道健康及身體健康，參與到生物拮抗，促進(jìn)腸道營養(yǎng)吸收、代謝、免疫應(yīng)答等，若機(jī)體的腸道菌群失衡，則會誘發(fā)2型糖尿病等疾病[5]，動物模型試驗已經(jīng)證實：腸道菌群發(fā)生改變后機(jī)體脂質(zhì)、能量代謝均會發(fā)生異常，進(jìn)而出現(xiàn)胰島素抵抗，并且糖尿病動物模型的腸道內(nèi)酵母菌、腸球菌、腸桿菌數(shù)量均顯著上升，而乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌數(shù)量均顯著下降[6-7]，本研究也顯示：2型糖尿病患者的糞腸球菌菌群數(shù)量較健康人群顯著提高，雙歧桿菌菌群數(shù)量較健康人群顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與劉佳[8]等學(xué)者研究一致，進(jìn)一步證實腸道菌群失衡是2型糖尿病的一個重要表現(xiàn)。

糖尿病屬于我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)“消渴病”的范疇，本為陰虛，標(biāo)為燥熱，臨床上多數(shù)2型糖尿病患者為脾虛證患者，陽氣虧損兼加痰瘀癥，《素問·經(jīng)脈別論》解釋為：飲至于胃，游溢精氣，輸于脾，脾氣散精，《靈樞·五變》解釋為：五臟柔弱，善病消癉，消渴病乃五臟虧虛所致，氣化虧損至水谷精液運化不暢，2型糖尿病與患者飲食不節(jié)相關(guān)，損傷脾胃，情志不暢傷及肝臟，正常機(jī)體陰陽平衡，陰伴隨陽，機(jī)體生命活動之根本乃陽氣，陽氣足則五臟運行正常，陽氣虧虛則五臟運行不暢，脾乃主運化，水精四步、五經(jīng)并行，全身營養(yǎng)，脾氣不足則運化失常，痰濕內(nèi)滯[9]，故治療2型糖尿病當(dāng)以健脾補(bǔ)氣，撫陽益氣為主要原則。

本研究顯示：附子理中丸聯(lián)合格列齊緩釋片治療的患者臨床療效顯著提高，總有效率高達(dá)95.00 %，血糖和血脂指標(biāo)改善優(yōu)于單純西藥治療的患者，患者M(jìn)CP-1、IL-10、TNF-a、hs-CRP水平改善更顯著，說明附子理中丸聯(lián)合格列齊緩釋片治療2型糖尿病可提高臨床療效，改善其血糖和血脂指標(biāo)，降低機(jī)體炎癥反應(yīng)，提高患者的生活質(zhì)量，分析原因：附子理中湯源自于《三因極一病證方論》：主要由附子、黃芪、半夏、人參、炙甘草、陳皮、白術(shù)、黃岑和干姜等組成[10]，隨著制藥水平的不斷提高，目前臨床上主要是采取的丸劑治療，附子具有祛寒止痛，助陽壯火，回陽補(bǔ)逆之功效，黃芪解表固本，利尿排毒，半夏止嘔降逆，散結(jié)消瘀，白術(shù)健脾補(bǔ)氣，利尿燥濕與丹參和炙甘草合用可以起到健脾益氣之功效，與陳皮合用燥濕、健脾顯著，黃岑清熱解毒，干姜溫和祛寒，回陽補(bǔ)氣，溫肺補(bǔ)血，黃岑聯(lián)合干姜起到寒熱平衡之效，人參健脾補(bǔ)肺，溫肺通脈，陳皮補(bǔ)氣健脾，調(diào)和燥濕，丹參化瘀止痛，調(diào)和經(jīng)絡(luò)，炙甘草健脾和胃，調(diào)和諸藥，諸藥合用共湊健脾益氣、補(bǔ)氣助陽之效。

本研究顯示：附子理中丸治療的患者雙歧桿菌菌群數(shù)量顯著上升，糞腸球菌菌群數(shù)量顯著下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，說明附子理中丸在治療2型糖尿病時可以調(diào)節(jié)患者的腸道菌群，中醫(yī)健乃因陰平陽秘的平衡狀態(tài)，《素問·生氣通天論》解釋為：陰平陽秘乃精神佳也，腸道內(nèi)的益生菌、共生菌在機(jī)體的腸道黏膜形成菌膜，影響機(jī)體的營養(yǎng)代謝、免疫功能、抵御有害病菌、分解有害物質(zhì)[11]，因此，正常的腸道菌群乃屬于“正氣”，腸道菌群失衡也是菌群失衡的重要表現(xiàn)，附子理中丸在調(diào)節(jié)陰陽平衡的時候也是在調(diào)節(jié)菌群的失衡。

綜上所述，附子理中丸聯(lián)合格列齊緩釋片治療2型糖尿病可提高臨床療效，改善其血糖和血脂指標(biāo)，降低機(jī)體炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)腸道菌群，提高生活質(zhì)量，值得在臨床上推廣。