VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中的表達及意義

盧志賢，王亞萍，謝敏瑚

(無錫市第三人民醫(yī)院 檢驗科,江蘇 無錫214041)

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VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中的表達及意義

盧志賢，王亞萍，謝敏瑚

(無錫市第三人民醫(yī)院 檢驗科,江蘇 無錫214041)

摘要：目的探討血管內皮生長因子-C(vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)、環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase 2，COX-2)、組織蛋白酶-D(cathepsin-D，Cath-D)在骨髓增生異常綜合癥(myelodysplastic syndromes,MDS)患者血清中的表達水平及意義。方法采用酶聯免疫吸附法(ELISA)定量檢測44例MDS患者、50例正常健康人血清中的VEGF-C、COX-2、Cath-D含量并進行比較。結果MDS患者血清中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達水平明顯高于正常健康對照組，差異有顯著統計學意義(均P<0.01)。VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達在不同性別、年齡比較中無統計學意義(均P>0.05)，而在不同臨床分型比較中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達與MDS分型呈正相關性。結論聯合檢測血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達對MDS疾病的發(fā)展、治療、預后有重要的作用。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0780)

骨髓增生異常綜合征(MDS) 是一組造血干細胞惡性克隆性疾病，造血功能紊亂是其特征，導致無效造血及惡性轉化危險性增高。病態(tài)造血主要表現在粒、紅、巨三系，也可是兩系或一系，骨髓功能異常而導致三系細胞病態(tài)發(fā)育及增生異?；钴S，但同時又伴有顯著的無效造血。目前MDS的診斷主要靠骨髓象的改變及活檢，診斷依據是病態(tài)造血現象，但病態(tài)造血又不是MDS所特有。本文則通過ELISA法定量檢測血管內皮生長因子-C(VEGF-C)、環(huán)氧化酶-2(COX-2)、組織蛋白酶-D(Cath-D)來探討這些指標在MDS患者血清中的表達水平及意義，現報告如下：

1資料與方法

1.1臨床資料44例MDS患者均來自我院住院患者，其中男26例，女18例，年齡28-74歲，平均53.2歲。其中MDS-RA18例，MDS-RAS5例，MDS-RAEB-I8例，MDS-RAEB-II13例，所有病例經病理、臨床、骨髓細胞學及骨髓活檢證實，均符合MDS的診斷標準[1]。同時收集我院50例正常健康體檢者，男25例，女25例，年齡25-72歲，平均51.4歲。

1.2實驗方法所有實驗對象清晨空腹抽取靜脈血5 ml，離心1 000 r/min，5 min，吸取血清分裝后于-70℃保存?zhèn)溆?。采用酶聯免疫吸附法定量檢測VEGF-C、COX-2、Cath-D，嚴格按照操作說明書操作，每次測定標本時，同時進行陰性、陽性質控物對照。VEGF-C、COX-2試劑盒購自上海滬峰化工有限公司，Cath-D試劑盒購自武漢中美科技有限公司，酶標儀為德國HAMILTON MICRO LAB○RFAME。

2結果

2.1VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS組中的表達分別為382.52±96.53ng/L、282.33±52.62pg/ml、19.47±7.21μg/L，顯著高于對照組的表達(均P< 0.01)。見表1。

組別nVEGF-C(ng/L)COX-2(pg/mL)Cath-D(μg/L)MDS組44382.52±96.53282.33±52.6219.47±7.21正常對照組50126.18±42.35108.19±27.388.52±3.39t值6.4818.8374.486P值0.0000.0000.000

2.2VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS不同臨床特征中的表達，它們在性別、年齡比較中無統計學意義(均P>0.05)，而在不同臨床分型比較中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達與MDS分型呈正相關性。見表2。

項目例數(n)VEGF-C(ng/L)COX-2(pg/ml)Cath-D(μg/L)性別 男26384.22±92.31279.46±49.6719.72±7.18 女18381.16±91.15284.18±56.4319.03±6.35年齡(歲) ≥5032378.49±96.38285.67±58.4219.91±7.28 <5012384.18±92.46278.86±54.6319.32±6.86臨床分型 MDS-RA18225.64±76.39177.39±38.6414.21±5.29 MDS-RAS5278.32±82.11*208.22±45.19*17.33±6.38* MDS-RAEB-I8345.31±91.96*268.35±42.49*20.61±8.32* MDS-RAEB-II13403.22±95.48*311.19±45.66*24.85±8.67*

注：VEGF-C、COX-2、Cath-D在性別、年齡比較中，均P> 0.05。與MDS-RA組比較，*P<0.01。

3討論

VEGF-C是近年來新發(fā)現的血管內皮生長因子家族成員，也是目前已知作用最強的促血管生成因子之一[2]，具有很強的血管生成和增強血管通透性的作用，能刺激腫瘤新生血管內皮細胞的增殖。VEGF-C在惡性腫瘤的生長、發(fā)展及轉移中起著重要的調節(jié)作用，其表達的強弱直接影響腫瘤的生長、侵襲和轉移。文獻報道其在膀胱癌、胃癌、大腸癌、胰腺癌等多種惡性腫瘤細胞中均有表達[2]，且VEGF-C的表達還是結腸癌肝轉移、胃癌肝轉移及其他腫瘤發(fā)生轉移的預測指標[3,4]。COX-2是催化膜磷脂花生四烯酸轉化為前列腺素類物質的限速酶，是一種膜結合蛋白酶，存在于核膜和微粒體膜中，主要位于細胞質內及細胞核周[5]。正常生理情況下，大多數正常組織中表達極少，在多種惡性腫瘤組織中呈高表達，并參與多種疾病發(fā)生發(fā)展的病理過程[6]。環(huán)氧化酶有兩種同工酶：COX-1和COX-2。 近年來研究發(fā)現，COX-2在肺癌、乳腺癌、消化道惡性腫瘤、前列腺癌等多種腫瘤中過度表達，通過多種機制參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉移[7]。Cath-D是一種相對分子量為34kD 的天門冬氨酸內切蛋白酶,為一種酸性溶酶體蛋白酶，廣泛存在于各種組織細胞溶酶體和內體中，其主要作用為降解蛋白質[8]。Cath-D能溶解基底膜細胞外基質和結締組織，促進腫瘤脈管生成，并刺激癌細胞生長，并參與腫瘤的侵襲和轉移[9]。Cath-D在正常組織表達極少，而在惡性腫瘤呈高表達[10]。

本實驗結果顯示VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中呈高表達，并且與MDS分型呈正相關性，三者協調一致的表達。COX-2能催化產生PGE2可刺激VEGF-C的產生，從而促進腫瘤血管生成[11]。也有觀點認為兩者通過配體-受體的相互作用，起到化學趨化的作用，促進腫瘤細胞以淋巴管內皮細胞為目標，引起淋巴道轉移[12]。Cath-D可以提高VEGF-C的表達，而 Cath-D 可以通過VEGF-C的間接作用，誘導腫瘤淋巴管生成[13]，所以三者之間互相作用，共同參與了MDS的發(fā)生、發(fā)展。我們的研究發(fā)現，VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS組中的表達顯著高于對照組的表達(均P<0.01)，且其在不同臨床分型中的表達呈遞增式表達。MDS具有較高的轉化急性白血病(AML)的風險，約30%最終轉化為AML[14]，所以目前除了骨髓移植治療外，尚未發(fā)現更好的治療方法。本文中的MDS發(fā)病平均年齡為53.2歲，與文獻報道相符[15-16]，因此早期發(fā)現、診斷、治療MDS為當前醫(yī)學研究者的所希望看到的。綜上所述，聯合檢測血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表達對MDS疾病的發(fā)展、治療、預后有重要的作用。

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關鍵詞：VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

The expression of serum vascular endothelial growth factor-C,cyclooxygenase 2 and cathepsin-D in myelodysplastic syndromes patientsLUZhi-xian,WANGYa-ping，XIEMin-hu.(ClinicalLaboratory，WuxiNo.3Hospital，Wuxi214041，China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the significance of serum vascular endothelialgrowth factor-C(VEGF-C),cyclooxygenase 2(COX-2) and cathepsin-D(Cath-D) in myelodysplastic syndromes(MDS) patients.MethodsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D were detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) in 44 patients with MDS,to compare with 50 healthy people (Control group).ResultsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D level in MDS patients group were all increased significantly compared with the control group (allP<0.01).To these markers,there were not significant difference in sex and age to the two groups，and the results of correlation analysis show that VEGF-C,COX-2 and Cath-D had a positive correlation with Clinical typing.ConclusionTo evaluate the advancing,treatment and Prognosis of MDS,There are more value to test the serum level of VEGF-C,COX-2 and Cath-D.

Key words:VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

(收稿日期：2014-05-19)

作者簡介：盧志賢(1976-)，男，副主任技師，主要從事臨床檢驗工作研究。

文獻標識碼：A

中圖分類號：R552

文章編號：1007-4287(2015)05-0780-03