液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品

□ 李春青 付志茹 高麗娜 時(shí)文博 陳永平 天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心

河鲀毒素（TTX）是鲀魚等魚類體內(nèi)的一種有神經(jīng)毒性的生物堿。河鲀毒素?zé)岱€(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性都很好，一般的腌漬、日曬和烹飪都不能破壞其化學(xué)結(jié)構(gòu)。目前，諸多檢測機(jī)構(gòu)開展了對河豚毒素的檢測工作[1]。然而，各個(gè)儀器廠商生產(chǎn)的儀器在質(zhì)譜參數(shù)方面有一定差別，使得某些檢測方法通用性不強(qiáng)，需要重新優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)。本文在3個(gè)不同品牌的液質(zhì)上分別建立了測定河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品的儀器方法，希望可為檢測人員提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 質(zhì)譜儀

AB Sciex 4000質(zhì)譜、Thermo TSQ質(zhì)譜、Waters Premier XE質(zhì)譜。

1.2 液相色譜條件

①色譜柱：島津Shim-pack C8色譜柱，75 mm×2.0 mm，2.2 μm；②進(jìn)樣量：2 μL；③柱溫：40 ℃；④流動相：A.2 mmol/L醋酸銨溶液；B.乙腈；梯度洗脫程序見表1[2]。

表1 流動相梯度洗脫程序

1.3 AB 4000質(zhì)譜條件

①離子化模式：大氣壓電噴霧離子源（ESI），正離子模式；②噴霧電壓IS：5 500 V；③加熱溫度TEM：400 ℃；④霧化氣 GS1：55 psi； ⑤ 輔 助 加 熱 氣GS2：55 psi；⑥去簇電壓DP：100 V；⑦射入電壓EP：10.8 V；⑧碰撞室射出電壓CXP：6.9 V；⑨掃描模式：選擇反應(yīng)監(jiān)測（MRM），母離子、子離子和碰撞能量見表2。

表2 選擇反應(yīng)監(jiān)測母離子、子離子和碰撞能量

1.4 Thermo TSQ質(zhì)譜條件

①離子源：電噴霧源（ESI）；②掃描模式：正離子掃描；③噴霧電壓（Spray voltage）：4 800 V；④鞘氣流量（Shealth gas pressure）：12 L/min；⑤ 輔 助 氣 流 量（Aux valve fl ow）：2 L/min；⑥離子傳輸管溫度（Capillary temperature）：350 ℃；⑦源內(nèi)碰撞誘導(dǎo)解離電壓（Source CID）：10 V；⑧掃描模式：選擇反應(yīng)監(jiān)測模式,母離子、子離子和碰撞能量見表2；⑨碰撞氣壓力：氬氣，1.5 mTorr。

1.5 Waters Premier XE質(zhì)譜條件

①電噴霧離子源，正離子掃描（ESI+）；②檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；③毛細(xì)管電壓：3 000 V；④離子源溫度：110 ℃；⑤脫溶劑氣溫度：350 ℃；⑥錐孔氣流量：50 L/h；⑦脫溶劑氣流量：600 L/h；⑧錐孔電壓、碰撞能量、分析物母離子及子離子等條件如表2所示。

1.6 河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線

3臺儀器在標(biāo)準(zhǔn)品濃度為10～120 ng/ml條件下，測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線如表3所示。由相關(guān)系數(shù)可知，該上述儀器條件滿足實(shí)驗(yàn)所需。

表3 河豚毒素的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2 比較與討論

采取高溫高電壓的方式進(jìn)行離子化。各個(gè)儀器參數(shù)的區(qū)別主要體現(xiàn)在各種輔助氣體和電壓的名稱及數(shù)值上。這就使得某些方法或文獻(xiàn)中的儀器參數(shù)通用性不強(qiáng)。希望本文所做工作可為檢測人員提供一定參考。