酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用

張藝馨

【摘要】酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是一種操作方式簡單，檢測成本低，且分析內(nèi)容量大的檢測方式。該檢測方式適合對復(fù)雜基質(zhì)中的微量成分進行檢測分析，由于操作簡單，越來越多的人開始應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法，從食品中的農(nóng)藥殘留，獸藥殘留以及違禁添加物，病原微生物，轉(zhuǎn)基因食品安全性等方面進行食品安全監(jiān)測，探討酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用并對酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可能存在的問題進行分析。

【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附技術(shù);食品安全;檢測

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是一種借助酶的催化作用，應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)中的高度特異性對相關(guān)物品進行檢驗。在應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的檢驗過程中，抗體與抗原會吸附到被檢測物體表面，同時還能保持自身的免疫活性?？贵w與抗原與酶進行結(jié)合后形成的結(jié)合物中兩方均能保持自身活性。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)最早開始應(yīng)用始于上世紀90年代，隨著相關(guān)技術(shù)的不斷進步，該檢測方式也逐漸成熟，并且生成了多種檢測方法，例如競爭檢測法，捕獲檢測法等。該技術(shù)目前主要應(yīng)用在食品檢測方面。在對食品安全進行檢測時應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，可以通過比較檢測過程中復(fù)合物的生成量以及等待檢測的抗原與抗體之間的價值進行相關(guān)判斷。該檢測方式質(zhì)量較高，且時間短，靈敏度高，目前在食品安全檢測領(lǐng)域中應(yīng)用十分廣泛。

一、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品安全性檢測的應(yīng)用

（一）農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用

農(nóng)藥在使用后會在食品的原材料以及相關(guān)半成品中殘留部分農(nóng)藥原題以及降解物質(zhì)等，農(nóng)藥殘留是食品安全問題的原因之一。在應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)對農(nóng)藥進行檢測時，首先要清除農(nóng)藥的組成結(jié)構(gòu)，農(nóng)藥從結(jié)構(gòu)中將是一種小分子物質(zhì)，自身沒有免疫性。根據(jù)農(nóng)藥的相關(guān)結(jié)構(gòu)制定抗原的合成路線，然后通過雜交瘤技術(shù)制造出能夠檢測農(nóng)藥小分子的mcab（單克隆抗體）。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)進行農(nóng)藥檢測可以針對有機磷農(nóng)藥，有機氯農(nóng)藥等進行有效地檢測。例如在對有機磷農(nóng)藥進行檢測時，可以選擇合成集中不同的半抗原，并通過免疫方法取得抗體，通過異原酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)進行檢測，檢測到該食品中IC50的含量為25ng/mL，其中該食品中IC50的最低含量值達到2ng/mL，檢測中的特異性非常好，且對于類似結(jié)構(gòu)的有機磷農(nóng)藥沒有出現(xiàn)交叉反應(yīng)。

（二）違禁藥品檢測中的應(yīng)用

目前我國食品安全檢測中對違禁藥品的檢測要求非常該，通過酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)檢測獸藥，抗生素藥物，激素類藥物等違禁藥品，可以更加便捷靈敏的將食品中的違禁藥品含量檢測出來。而且該檢測技術(shù)可以將少量的藥物殘留分析成一種可在實驗室內(nèi)應(yīng)用的常規(guī)分析技術(shù)，在檢測時可以同時對上百種品類進行檢測，并且可以對大批量的藥品進行檢測。例如在檢測食品已烯雌酚（人工合成的雌激素藥物，具有較強的副作用，可能會引起人體內(nèi)基因突變形成腫瘤）含量中，使用相關(guān)試劑盒，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)進行檢測，通過親和素與生物素之間的高度特異性及穩(wěn)定性對酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)進行研究，使用生物素對抗體進行標記，對該類違禁藥品的最低檢測值為0.123g/ml，檢測結(jié)果較精細。

（三）轉(zhuǎn)基因食品檢測中的應(yīng)用

隨著轉(zhuǎn)基因食品在人民生活中的增多，轉(zhuǎn)基因食品安全問題已經(jīng)成為食品安全質(zhì)量檢測中的關(guān)注重點。相關(guān)資料顯示，目前大部分國家對轉(zhuǎn)基因食品都會進行比較嚴格的管理，在轉(zhuǎn)基因食品包裝袋上會有明顯的轉(zhuǎn)基因食品標志。在轉(zhuǎn)基因食品安全檢測中應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，主要是通過分析轉(zhuǎn)基因食品中某些特定的轉(zhuǎn)基因表達蛋白，來檢測食品中是否含有轉(zhuǎn)基因成分。例如目前食品安全檢測中對玉米粉的檢測會應(yīng)用Bt9玉米酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)試劑盒來檢測玉米中的轉(zhuǎn)基因表達蛋白的含量。該試劑可以準確的對玉米中的轉(zhuǎn)基因蛋白含量進行檢測。在檢測過程中，Bt9玉米酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)試劑盒會將2中抗體與Cry IA（b）分子進行結(jié)合，形成夾心，對玉米中的蛋白進行分離檢測。

（四）食品病原微生物檢測中的應(yīng)用

病原微生物室食品安全中造成食品生物污染的主要原因。常規(guī)的檢驗方式通過對病原微生物進行分離培養(yǎng)或者生活試驗進行檢測，但是會耗費大量的人力物力，且時間較長，而且類似于大腸桿菌等細菌在機體營養(yǎng)匱乏的環(huán)境下會進入休眠狀態(tài)，而進入適宜的環(huán)境后會馬上復(fù)蘇，就導(dǎo)致常規(guī)檢測中相關(guān)性質(zhì)的細菌會產(chǎn)生漏檢。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可以避免該現(xiàn)象的發(fā)生。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可以對大腸桿菌，沙門氏菌，軍團菌等食品中的常見細菌進行檢測，例如在沙門氏菌的檢測過程中，可以通過對沙氏門菌進行單克隆抗體，然后將樣本加入到微孔板中，待沙氏門菌與微孔板內(nèi)的特異性抗體結(jié)合后，形成復(fù)合物，將復(fù)合物加入抗體形成抗體復(fù)合物，然后加入底物，測定該混合物的光密度，如果檢測結(jié)果顯示光密度數(shù)值超出臨界值，則表示該檢測結(jié)果為沙氏門菌陽性。

第五，食品中其他成分檢測中的應(yīng)用。在食品安全檢測中，過敏性殘留物的檢測也至關(guān)重要。食品中常見的過敏性食品有雞蛋，牛奶，花生等，此類食品的主要過敏性物質(zhì)為蛋白質(zhì)。在食品安全檢測中應(yīng)用夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，可以通過對蛋白質(zhì)進行單克隆抗體檢測，且檢測結(jié)果較準確，操作簡潔。

二、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)中存在的問題以及解決方法

（一）酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)中存在的問題

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)具有操作簡便，檢測成本低，檢測結(jié)果準確，且可以大批量檢測等優(yōu)勢，在食品安全檢測中應(yīng)用廣泛，但是該技術(shù)方式存在較多的問題。（1）檢測過程中，抗體的制作及備份比較困難，且對相關(guān)檢查試劑的要求較高，不能應(yīng)用同一種試劑檢測多種食品。（2）檢測食品結(jié)構(gòu)類似時容易在檢測過程中發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果失效。

（二）酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)中相關(guān)問題的解決方式

①可在檢測過程中改善抗體制作及備份的方式，根據(jù)待檢測食品的特性，應(yīng)用相關(guān)知識建立不同結(jié)構(gòu)的評價模式，提高克隆抗體的親和性。②在對多個結(jié)構(gòu)類似食品進行檢測時，將合成的抗原針對同種抗體進行檢測，可以避免工作的重復(fù)性，減少檢測過程中的交叉反應(yīng)。

綜上所述，在食品安全檢測中應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，可明顯提高檢測效率，檢測步驟更加簡單明了，且檢測成本較低，檢測過程中不會造成污染，可在食品安全檢測中推廣應(yīng)用。