雷替曲塞聯(lián)合奈達(dá)鉑治療食管鱗狀細(xì)胞癌對富含脯氨酸蛋白11、鱗狀細(xì)胞癌抗原表達(dá)水平的影響

孫紅輝，賀利民，張建東，史代萌

南陽市第一人民醫(yī)院放射腫瘤科，河南 南陽473000

食管癌是發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一，5年生存率較低，早期臨床癥狀不明顯，患者就診時往往錯過最佳手術(shù)時機(jī)[1]。然而手術(shù)或放療的復(fù)發(fā)率較高，并且接受放療的患者生存率較低[2]。同期放化療是目前食管癌的主要治療方法，國內(nèi)外大量臨床資料表明，同步放化療比單純放療效果更好，顯著提高了患者的生存率[3]。雷替曲塞是用于腫瘤化療的抗代謝藥，可抑制胸苷酸合成酶合成，屬于葉酸抗代謝的化療藥物。盡管在晚期食管癌化療中，目前公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)方案是順鉑聯(lián)合5-氟尿嘧啶[4]，但是，近年來，雷替曲塞聯(lián)合鉑類化療同步調(diào)強(qiáng)放療治療局部晚期食管癌取得了良好的臨床效果[5]。鱗狀細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）和富含脯氨酸蛋白11（proline rich 11，PRR11）是鱗狀細(xì)胞癌的腫瘤標(biāo)志物，被廣泛用于各種鱗狀細(xì)胞癌的研究中。為了觀察雷替曲塞聯(lián)合奈達(dá)鉑治療食管鱗狀細(xì)胞癌的效果及對PRR11、SCCA水平的影響，本研究選取160例接受治療的食管鱗狀細(xì)胞癌患者進(jìn)行研究，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2018年1月至2019年6月在南陽市第一人民醫(yī)院接受治療的160例食管鱗狀細(xì)胞癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲；②病理檢查確診為食管鱗狀細(xì)胞癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心肺等嚴(yán)重基礎(chǔ)疾?。虎诓辉竻⑴c本項研究。將160例食管鱗狀細(xì)胞癌患者隨機(jī)分為對照組和觀察組各80例。對照組中，男45例，女35例；年齡50～65歲，平均（54.03±2.98）歲；Ⅲ期45例，Ⅳ期35例。觀察組中，男48例，女32例；年齡52～65歲，平均（54.11±3.12）歲；Ⅲ期52例，Ⅳ期28例。兩組患者性別、年齡、臨床分期比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過，且患者均對本研究知情同意。

1.2 治療方法

對照組給予順鉑聯(lián)合5-氟尿嘧啶化療同步放療。順鉑 20 mg/m2，靜脈滴注，5-氟尿嘧啶 500 mg/m2，靜脈滴注，28天為一個周期；放療前，服用地塞米松5 mg以防止嘔吐。使用直線加速器進(jìn)行6 MV-X放射治療，目標(biāo)放療計劃為：每次2.0 Gy，60 Gy/30 f，每周5次；每21～28天為一個周期，治療2個周期。同步放化療結(jié)束后，再進(jìn)行2個周期化療，4個周期后進(jìn)行療效評價。

觀察組給予雷替曲塞+奈達(dá)鉑化療同步放療，雷替曲塞3 mg/m2，d 1，在15 min內(nèi)完成靜脈輸注，奈達(dá)鉑75 mg/m2，d 1，靜脈滴注；放療前，服用地塞米松5 mg以防止嘔吐。使用直線加速器進(jìn)行6 MV-X放射治療，目標(biāo)放療計劃為：每次2.0 Gy，60 Gy/30 f，每周5次；每21～28天為一個周期，治療2個周期。同步放化療結(jié)束后，再進(jìn)行2個周期化療，4個周期后進(jìn)行療效評價。

1.3 觀察指標(biāo)

治療前后使用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清PRR11、SCCA水平：清晨采集患者的空腹肘部靜脈血10 ml，1000 r/min離心10 min，取上清液待測。密封袋中取出實驗板條，空白對照孔中加入樣品或稀釋液100 μl，檢測孔中加入標(biāo)本 100 μl，膠紙封閉實驗孔，36℃條件下孵育60～90 min，磷酸鹽緩沖液清洗5次，空白對照孔中加入生物素抗體稀釋液100 μl，檢測孔中加入生物素抗體檢測液100 μl，膠紙封閉實驗孔，36℃條件下孵育30～60 min，空白對照孔中加入酶結(jié)合稀釋液100 μl，檢測孔中加入酶結(jié)合檢測液100 μl，膠紙封閉實驗孔，磷酸鹽緩沖液清洗5次，加入TMB顯色底液，避光36℃孵育15 min，加入終止液 100 μl，3 min 內(nèi)檢測光密度（optical density，OD）450值。

1.4 評價指標(biāo)

觀察兩組患者的治療效果和并發(fā)癥發(fā)生率，比較治療前后兩組患者血清PRR11、SCCA表達(dá)水平及生活質(zhì)量的差異。療效評價[6]：根據(jù)治療效果分為完全緩解（complete response，CR）、部分緩解（partial response，PR）、疾病穩(wěn)定（stable disease，SD）、疾病進(jìn)展（progression disease，PD），疾病控制率=（CR+PR+SD）例數(shù)/總例數(shù)×100%。生活質(zhì)量的評價采用健康調(diào)查簡表（the MOS item short from health survey，SF-36）[7]進(jìn)行評價，得分越高表明生活質(zhì)量越好。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療效果的比較

觀察組患者疾病控制率為98.75%（79/80），高于對照組患者的90.00%（72/80），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.769，P=0.016）。（表1）

表1 兩組患者的治療效果

2.2 治療前后血清PRR11、SCCA表達(dá)水平的比較

治療前，兩組患者PRR11、SCCA表達(dá)水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組患者的PRR11、SCCA表達(dá)水平均明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表2）

表2 治療前后兩組患者血清PRR11、SCCA表達(dá)水平的比較（±s）

組別對照組（n=80）觀察組（n=80）t值PRR11治療前74.36±4.12 74.39±3.82-0.048治療后42.08±3.48 23.17±2.74 38.186 SCCA治療前68.45±5.11 68.51±4.87-0.076治療后37.49±3.02 20.72±2.13 40.588 P值0.481＜0.010.470＜0.01

2.3 治療后生活質(zhì)量的比較

治療后觀察組患者SF-36各維度評分均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表3）

表3 治療后兩組患者SF-36評分的比較

2.4 并發(fā)癥發(fā)生情況的比較

觀察組患者并發(fā)癥總發(fā)生率為2.50%（2/80），低于對照組的11.25%（9/80），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.783，P=0.029）。（表4）

表4 兩組患者并發(fā)癥發(fā)生情況

3 討論

食管癌具有較高發(fā)病率，并且鱗狀細(xì)胞癌高發(fā)，老年患者較多，大多數(shù)被確診患者處于局部晚期階段[8]。目前，通常根據(jù)病變部位、患者的狀況和疾病的階段選擇適當(dāng)?shù)闹委煼椒āＭ椒呕熓蔷植客砥谑彻馨┑臉?biāo)準(zhǔn)治療方法，可以大大提高局部控制率和長期生存率[9]。大量研究結(jié)果表明，嚴(yán)格有效的放療聯(lián)合化療可以在一定程度上替代更具侵入性的外科治療。與單純放療相比，聯(lián)合治療的方案可以有效減少不良反應(yīng)的發(fā)生，延長患者的生存期[10-11]。

雷替曲塞是胸苷合酶的特異性抑制劑，可被還原的葉酸載體吸收到細(xì)胞內(nèi)被葉酸聚谷氨酸合酶代謝為一系列聚谷氨酸衍生物，這些代謝物對胸苷合酶具有更強(qiáng)的抑制活性，它們的細(xì)胞內(nèi)滯留行為與長期細(xì)胞毒性有關(guān)[12]。雷替曲塞的作用不需要添加葉酸鈣，因此不會進(jìn)一步增加黏膜毒性。與5-氟尿嘧啶相比，該藥療效好，無心臟毒性，給藥方便，可接受性好[13]。該藥物主要用于治療晚期結(jié)直腸癌，但一些基礎(chǔ)和臨床試驗表明其抗腫瘤譜更廣[14]。雷替曲塞與放療相結(jié)合已被用于治療結(jié)直腸癌、宮頸癌和其他腫瘤，治療結(jié)果表明它具有良好的耐受性[15]。奈達(dá)鉑是目前臨床上使用的一種非周期性細(xì)胞藥物，進(jìn)入細(xì)胞后甘醇酸脂基上的醇性氧與鉑之間的鍵斷裂，導(dǎo)致釋放離子物質(zhì)后與DNA結(jié)合，使DNA復(fù)制過程受阻，發(fā)揮其抗腫瘤作用[16]。然而，雷替曲塞聯(lián)合奈達(dá)鉑化療同步放療對食管癌的臨床療效和安全性值得進(jìn)一步評估。對腫瘤和正常組織芯片差異表達(dá)數(shù)據(jù)的薈萃分析發(fā)現(xiàn)，PRR11是差異表達(dá)的基因，進(jìn)一步的實驗表明，PRR11依賴于細(xì)胞周期分階段表達(dá)，而沉默PRR11會導(dǎo)致S期阻滯和生長延遲。肺癌組織中PRR11的表達(dá)高于正常組織，與肺癌患者的預(yù)后有關(guān)[17]。這些結(jié)果表明，PRR11在細(xì)胞周期和腫瘤發(fā)生中起重要作用。SCCA屬于卵清蛋白絲氨酸蛋白酶抑制劑家族，是一種腫瘤相關(guān)蛋白[18]。SCCA是鱗狀細(xì)胞癌的特定腫瘤標(biāo)志物，因此本研究中選取患者的組織類型為鱗狀細(xì)胞癌。本研究首次通過檢測血清PRR11和SCCA在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)水平，分析二者與治療療效及生活質(zhì)量的關(guān)系。本次研究結(jié)果顯示，觀察組患者疾病控制率、生活質(zhì)量均優(yōu)于對照組患者，術(shù)后血清PRR11、SCCA水平和并發(fā)癥發(fā)生率均低于對照組，表明雷替曲塞和奈達(dá)鉑聯(lián)合應(yīng)用可以有效抑制食管鱗狀細(xì)胞癌患者的腫瘤細(xì)胞周期和腫瘤發(fā)生，并可以顯著提高局部晚期食管癌的臨床療效。與單獨放療的不良反應(yīng)相比，聯(lián)合放化療方案不會提高不良反應(yīng)發(fā)生率，顯示出該方案的安全性。分析原因是雷替曲塞進(jìn)入人體細(xì)胞后，代謝迅速使藥效延長，從而治療效果更加穩(wěn)定和持久。奈達(dá)鉑是治療食管癌的基本藥物之一，優(yōu)點是在用藥期間不需要水合作用，與其他順鉑藥物相比，它可以顯著降低胃腸道反應(yīng)和腎臟毒性，并減少對患者生活質(zhì)量的負(fù)面影響。兩種藥物具有良好的協(xié)同作用，除了發(fā)揮抗腫瘤作用，還可以提高放療效果并改善患者依從性，具有很高的治療安全性。對于不能接受手術(shù)切除或無法治愈的食管癌晚期患者，同步放化療已成為標(biāo)準(zhǔn)治療方法之一。目前對食管鱗狀細(xì)胞癌的研究主要是通過比較不同的放化療方案治療后的療效及不良反應(yīng)，選擇安全性較高且療效好的方法，并且已有研究表明雷替曲塞聯(lián)合鉑類藥物化療療效優(yōu)于5-氟尿嘧啶聯(lián)合鉑類方案[19-20]，然而較少有聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物的研究。基于此，本研究應(yīng)用雷替曲塞聯(lián)合奈達(dá)鉑方案治療食管鱗狀細(xì)胞癌患者，并創(chuàng)新性地通過檢測新型標(biāo)志物PRR11、SCCA水平變化，對療效進(jìn)行評估。綜上所述，雷替曲塞聯(lián)合奈達(dá)鉑治療食管鱗狀細(xì)胞癌患者效果較好，可降低PRR11、SCCA水平，提高患者生活質(zhì)量，具有良好的應(yīng)用效果。