不同地理種源金線蓮不同采集時(shí)間活性成分分析研究

曾碧玉 蘇明華 陳清西 李惠華 常強(qiáng) 王偉

摘 ?要：對4個不同地理種源金線蓮（‘三明尖葉、‘三明圓葉、‘漳州尖葉及‘臺灣AF）種植滿120 d時(shí)的生物量及活性成分進(jìn)行分析比較。結(jié)果顯示，單株鮮重和干重及多糖含量以‘漳州尖葉金線蓮品種最高，而總多酚及總黃酮含量則均以‘臺灣AF金線蓮品種最高。同時(shí)對4個金線蓮品種不同采集時(shí)間的活性成分進(jìn)行分析比較。結(jié)果顯示，除‘臺灣AF金線蓮品種外，其余3個品種的變化規(guī)律大致相同，即隨著移栽時(shí)間的延長，總多酚及總黃酮含量緩慢增長，而多糖含量則遞減。金線蓮‘三明尖葉與‘三明圓葉品種中，總多酚及總黃酮含量均在種植滿150 d達(dá)到最大值，此時(shí)，在‘三明尖葉金線蓮中，總多酚及總黃酮含量分別為（9.81±0.24）、（4.62±0.16） mg/g;在‘三明圓葉金線蓮中，總多酚及總黃酮含量分別為（9.27±0.22）、（4.60±0.17） mg/g?！闹菁馊~金線蓮品種的總多酚及總黃酮含量均在種植滿120 d達(dá)到最大值，分別為（7.74±0.05）、（4.63±0.04） mg/g。‘三明尖葉、‘三明圓葉以及‘漳州尖葉金線蓮品種的多糖含量分別于種植滿90、0、120 d時(shí)達(dá)到最大值，多糖含量分別為（26.05±2.11）、（24.29±2.33）、（45.90±4.70） mg/g。此外，對‘三明尖葉與‘三明圓葉金線蓮品種不同部位活性成分分析發(fā)現(xiàn)，多酚與黃酮主要在葉片累積，而糖類物質(zhì)則主要在莖段累積。

關(guān)鍵詞：金線蓮;地理種源;采集時(shí)間;活性成分

中圖分類號：R282.4 ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

Abstract： The biomass and active ingredients of four cultivars （‘Sanming NL （narrow leaf）， ‘Sanming RL （round leaf）， ‘Zhangzhou NL and ‘Taiwan AF） of Anoectochilus roxburghii and Anoectochilus formosanus from different geographical sources were assayed 120 days after transplantation. The polysaccharides content， fresh weight and dry weight per plant of ‘Zhangzhou NL were significantly higher than that of the other three cultivars. Also， the total polyphenols and total flavonoids content of ‘Taiwan AF were significantly higher than that of the other three cultivars. The dynamic changes of the active ingredients in different collection periods were investigated. Except for ‘Taiwan AF cultivar， the variation rules of total polyphenols， total flavonoids and polysaccharides content in the three varieties were roughly the same. The content of total polyphenols and total flavonoids increased and the content of polysaccharides decreased with the extension of transplanting time. The content of total polyphenols and total flavonoids reached the maximum 150 days after transplantation for ‘Sanming NL and ‘Sanming RL. For ‘Sanming NL， the content of total polyphenols and total flavonoids was （9.81±0.24） and （4.62±0.16） mg/g， respectively. For ‘Sanming RL， the content of total polyphenols and total flavonoids were （9.27±0.22） and （4.60±0.17） mg/g， respectively. In ‘Zhangzhou RL， the content of total polyphenols and total flavonoids reached the maximum 120 days after transplantation. The content of total polyphenols and total flavonoids in ‘Zhangzhou RL was （7.74±0.05） and （4.63±0.04） mg/g， respectively. The content of polysaccharides reached the maximum 90， 0 and 120 days after transplantation for ‘Sanming NL， ‘Sanming RL and ‘Zhangzhou RL， respectively. The content of polysaccharides was （26.05±2.11）， （24.29±2.33） and （45.90±4.70） mg/g in ‘Sanming NL， ‘Sanming RL and ‘Zhangzhou RL， respectively. Besides， the analysis of the active components in different parts in the plant of ‘Sanming NL and ‘Sanming RL revealed that polyphenols and flavonoids were mainly accumulated in the leaves but sugars in the stems.

Keywords： Anoectochilus roxburghii; collection time; biological characteristics; active ingredients

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.04.024

金線蓮[Anoectochilus roxburghii （Wall.） Lin?dl.]，為蘭科（Orchidaceae）開唇蘭屬（Anoec?tochilus）多年生草本植物[1]。是我國傳統(tǒng)的珍貴藥材，民間素有“藥王”、“金草”之美譽(yù)。其味甘微苦，性平微寒，具有清熱涼血、祛風(fēng)利濕、強(qiáng)心、固腎、利尿、平肝、降血壓等功效，主要用于治療高血壓、糖尿病、心臟病、肺炎、急慢性肝炎、腎炎等癥[2]。金線蓮之所以具有多種功效歸因于其具有多種活性成分，如多酚、黃酮、多糖、有機(jī)酸及揮發(fā)油等。

目前，金線蓮來源廣泛，福建多地均有種植。然而，對于不同地理種源金線蓮的活性成分分析研究則較少[3-4]，或者主要集中于單一的活性成分分析[5]。而不同地理種源金線蓮的活性成分分析研究具有一定的應(yīng)用價(jià)值。因此，選取福建主產(chǎn)地（漳州、三明）金線蓮以及市面上常見的原產(chǎn)于臺灣的金線蓮進(jìn)行分析，以期為金線蓮資源的開發(fā)利用以及栽培應(yīng)用提供依據(jù)。

大量研究證實(shí)，采收期對果蔬與藥材品質(zhì)具有顯著的影響[6]。目前，金線蓮的采收尚無標(biāo)準(zhǔn)可依，不同采集時(shí)間的金線蓮均有出售，栽培苗多以室外移栽滿3～4個月或滿6個月采收居多，尤其以種植滿4個月采收最多。但關(guān)于金線蓮不同采集時(shí)間活性成分的比較研究極少[7]。而系統(tǒng)研究金線蓮不同采集時(shí)間活性成分變化規(guī)律具有重要的生產(chǎn)指導(dǎo)意義?；诖?，本研究對金線蓮不同采集時(shí)間活性成分的變化規(guī)律進(jìn)行分析比較，以期為生產(chǎn)種植采收提供參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

福建三明、福建漳州及臺灣金線蓮組培苗，種植于廈門地緣生物科技有限公司的資源圃內(nèi)，該資源圃位于北緯2446，東經(jīng)1181，屬于亞熱帶海洋性氣候，年平均氣溫20.5 ℃，年平均降雨量1234 mm。本研究中供試金線蓮品種包括福建三明尖葉品種、福建三明圓葉品種、福建漳州尖葉品種及臺灣金線蓮品種，分別表示為‘三明尖葉、‘三明圓葉、‘漳州尖葉及‘臺灣AF。

沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98%）、福林酚試劑，Sigma公司;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98%），天津一方科技有限公司;無水乙醇、碳酸鈉、硝酸鋁、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、苯酚、濃硫酸、葡萄糖、3，5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉及亞硫酸鈉均為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

Lambda 25紫外/可見光光譜儀，美國Perkinelmer股份有限公司。

1.2 ?方法

1.2.1 ?形態(tài)特征調(diào)查與描述 ?大棚移栽種植實(shí)驗(yàn)于2013年在廈門地緣生物科技有限公司大棚內(nèi)進(jìn)行。培養(yǎng)基質(zhì)主要為泥炭土，采用口徑為8 cm的培養(yǎng)缽作為培植載體，每缽種植金線蓮1株。栽培大棚采用聚乙烯薄膜，外層加蓋遮陽網(wǎng)，大棚試驗(yàn)金線蓮管理與大棚其他金線蓮日常管理相同。

金線蓮定植后，每月定期采收。采收后，每個品種均隨機(jī)挑選15株進(jìn)行生物學(xué)性狀及生物量調(diào)查。軟尺測量莖高并用數(shù)顯游標(biāo)卡尺測量莖粗，其中莖高計(jì)量為頂芽抽出處至莖基部距離，莖粗計(jì)量為莖最粗處直徑大小。選取植株中的最大葉片，用軟尺測量葉長及葉寬。計(jì)算植株含葉片數(shù)。同時(shí)測定單株鮮重及干重。單株鮮重為單株材料清洗并擦拭干水分后稱重所得。單株干重為測定完鮮重后于50 ℃烘箱烘干至恒重后稱重所得。

1.2.2 ?實(shí)驗(yàn)材料預(yù)處理 ?金線蓮采收后，先用流水清洗干凈，后用蒸餾水潤洗，50 ℃烘箱烘干至恒重，用粉碎機(jī)研磨成粉末，過40 目篩，得金線蓮干燥粉末，密封低溫貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 ?總多酚、總黃酮及多糖提取方法 ?準(zhǔn)確稱取一定量的金線蓮干燥粉末，按1∶60（g/mL）料液比加入60%的乙醇溶液。置于搖床120 r/min、25 ℃振搖48 h。過濾、取濾液并定容，測定濾液中多酚及黃酮含量，并計(jì)算金線蓮中多酚及黃酮含量。濾渣按1∶60（g/mL）料液比加入蒸餾水，60 ℃水浴1.5 h，過濾，取濾液并定容，測定濾液中總糖及還原糖的含量，并計(jì)算多糖含量。

1.2.4 ?總多酚含量測定 ?采用Folin-Ciocalteu法，參照Zuo等[8]所述方法并加以修改。

標(biāo)準(zhǔn)沒食子酸溶液配制（5.00 mg/mL）：精確稱取沒食子酸500 mg，先用蒸餾水溶解并定容至100 mL，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：將上述標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋100倍后得到50 μg/mL的沒食子酸溶液。在各比色管中，分別加入0、100、200、300、400、500、600、700、800 μL的沒食子酸溶液，補(bǔ)足蒸餾水至2.00 mL，混勻。每管再分別加入1.00 mL福林酚試劑，混勻后反應(yīng)4 min。各管中再分別加入1.00 mL的Na2CO3溶液（10%），避光室溫條件下靜置2 h。以蒸餾水為參比，于765 nm波長處測定吸光值。每樣各重復(fù)3次。以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品含量（x）為橫坐標(biāo)，吸光度值（y）為縱坐標(biāo)，繪制總多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.0246x，相關(guān)系數(shù)R2=0.9980。

樣品含量測定：取1.00 mL樣品溶液，同上法操作，測定吸光度值，按所得的總多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品中總多酚含量，總多酚含量以沒食子酸當(dāng)量表示，結(jié)果表示為mg/g。

1.2.5 ?總黃酮含量測定 ?采用 NaNO2-Al（NO3）3- NaOH比色法，參照Sheng等[9]所述方法并略加修改。

標(biāo)準(zhǔn)蘆丁溶液的配制（100 μg/mL）：精確稱取10 mg蘆?。?05 ℃干燥至恒重），加適量60%乙醇，水浴中加熱溶解，待冷卻后，用60%乙醇定容至100 mL，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：于具塞試管中，分別加入0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液，分別補(bǔ)加60%乙醇至5.00 mL，混勻。再分別加300 μL NaNO2溶液（5%），混勻，反應(yīng)6 min。再分別添加300 μL Al（NO3）3溶液（10%），再次混勻，靜置反應(yīng)6 min。然后，分別加4.00 mL NaOH溶液（1 mol/L），混勻。最后，分別加400 μL 60%的乙醇溶液，搖勻。放置10 min后，以60%乙醇為參比，于510 nm波長處測定吸光值。每樣均設(shè)3次重復(fù)。以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品含量（x）為橫坐標(biāo)，吸光度值（y）為縱坐標(biāo)，繪制總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=1.8655x，相關(guān)系數(shù) R2=0.9999。

樣品含量測定：準(zhǔn)確吸取1.00 mL樣品溶液，操作步驟同上，測定吸光度值，按上述總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品中的總黃酮含量。總黃酮含量以蘆丁當(dāng)量表示，結(jié)果表示為mg/g。

1.2.6 ?總糖含量測定 ?總糖含量測定采用苯酚-硫酸法，參照曾碧玉等[10]所述方法。簡言之，即1.0 mL樣品液，加5 %苯酚溶液1 mL，振搖混勻，加入5.00 mL濃硫酸，迅速振搖混勻，靜置30 min。而后在490 nm測定其吸光度。每樣均設(shè)3次重復(fù)。以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品含量（x）為橫坐標(biāo)，吸光度值（y）為縱坐標(biāo)，繪制總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.0094x?0.0001，相關(guān)系數(shù)R2=0.9995。

樣品含量測定：取樣品溶液1.00 mL，按上述步驟操作，測定吸光值，按總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程來計(jì)算樣品中總糖含量。總糖含量以葡萄糖當(dāng)量表示，結(jié)果表示為mg/g。

1.2.7 ?還原糖含量測定 ?還原糖含量的測定采用3，5-二硝基水楊酸（DNS）法，參照李合生[11]所述方法，即1.0 mL樣品液，補(bǔ)加蒸餾水至2.00 mL。加入1.5 mL DNS 試劑，混勻，沸水浴5 min，流水沖洗冷卻至室溫，用蒸餾水補(bǔ)足至25 mL，搖勻。在 540 nm 測定其吸光度。每樣均設(shè)3次重復(fù)。以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品含量（x）為橫坐標(biāo)，吸光度值（y）為縱坐標(biāo)，繪制還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.5315x?0.016，相關(guān)系數(shù)R2=0.9982。

樣品含量測定：取樣品溶液1.00 mL，按上述步驟操作，測定吸光值，按還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程來計(jì)算樣品中還原糖含量。還原糖含量以葡萄糖當(dāng)量表示，結(jié)果表示為mg/g。

1.2.8 ?多糖含量測定 ?樣品中多糖含量按公式計(jì)算：

多糖含量=總糖含量?還原糖含量

多糖含量以葡萄糖當(dāng)量表示，結(jié)果表示為mg/g。

1.3 ?數(shù)據(jù)處理

生物量與活性成分測定數(shù)據(jù)分別為15次與3次平行試驗(yàn)結(jié)果，數(shù)據(jù)表示形式為“平均值± SD”。方差分析均采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?不同地理種源金線蓮生物學(xué)特征與活性成分比較分析

2.1.1 ?形態(tài)特征描述 ?不同地理種源金線蓮大棚移栽滿120 d植株形態(tài)如圖1所示?！骷馊~金線蓮品種植株高8.5～11.9 cm。莖基部匍匐，淡紅褐色，光滑，肉質(zhì)，長6.5～8.4 cm，粗1.7～2.4 mm。莖上具節(jié)，基部節(jié)上有不定根，淡綠色。根3～5條，被有茸毛，米黃色，最長根根長為1.1～2.9 cm。葉為單葉互生，葉5～7枚，葉片卵圓形或卵形，最大葉葉長2.1～2.9 cm，葉寬1.3～1.8 cm，葉面墨綠色，具金紅色網(wǎng)脈，背面淡紫紅色，葉緣全緣或具微圓齒狀，葉端漸尖（圖1A）。

‘三明圓葉金線蓮品種植株高7.0～10.5 cm。莖基部匍匐，淡紅褐色至紫紅色，光滑，肉質(zhì)，長5.2～8.0 cm，粗2.1～2.7 mm。莖上具節(jié)，基部節(jié)上有不定根，淡綠色。根2～5條，被有茸毛，米黃色，最長根根長為1.8～4.5 cm。葉為單葉互生，葉數(shù)5～7枚，葉片卵圓形或近圓形，最大葉葉長2.0～2.5 cm，葉寬1.6～1.9 cm，葉面墨綠色，具金紅色網(wǎng)脈，背面淺暗紅色，葉緣圓齒狀，葉端漸尖（圖1B）。

‘漳州尖葉金線蓮品種植株高9.0～14.3 cm。莖基部匍匐，淡紅褐色，光滑，肉質(zhì)，長7.0～ 11.3 cm，粗2.3～3.0 mm。莖上具節(jié)，基部節(jié)上有不定根，淡綠色。根4～6條，被有茸毛，米黃色，最長根根長為2.4～6.4 cm。葉為單葉互生，葉5～8枚，葉片卵圓形或卵形，最大葉葉長2.7～3.6 cm，葉寬1.7～2.4 cm，葉面墨綠色，具金紅色網(wǎng)脈，背面淡紫紅色，葉緣全緣或具微圓齒狀，葉端漸尖（圖1C）。

‘臺灣AF金線蓮植株高9.2～11.6 cm。莖基部匍匐，微紅褐色，光滑，肉質(zhì)，長6.7～9.2 cm，粗2.1～3.1 mm。莖上具節(jié)，基部節(jié)上有不定根，淡綠色。根3～6條，被有茸毛，米黃色，最長根根長為1.7～3.7 cm。葉為單葉互生，葉3～6枚，葉片卵圓形或卵形，最大葉葉長2.2～2.8 cm，葉寬1.5～ 2.2 cm，葉面翠綠色，具銀白色網(wǎng)脈，背面微紫紅色，葉緣全緣或具微圓齒狀，葉端漸尖（圖1D）。

2.1.2 ?生物量 ?不同地理種源金線蓮大棚移栽滿120 d的單株鮮重與單株干重如表1所示。4個品種中，單株鮮重及單株干重均以‘漳州尖葉金線蓮品種最高，分別達(dá)（1496±375）、（138±36）mg，顯著高于其他品種。單株鮮重高低順序?yàn)椤闹菁馊~>‘臺灣AF>‘三明圓葉>‘三明尖葉。單株干重高低順序?yàn)椤闹菁馊~>‘三明圓葉>‘臺灣AF>‘三明尖葉。

2.1.3 ?活性成分 ?不同地理種源金線蓮大棚移栽滿120 d的活性成分分析如表2所示。4個品種中，總多酚及總黃酮含量均在‘臺灣AF金線蓮品種中最高，分別為（9.33±0.18）、（4.55±0.06）mg/g，顯著高于其他3個品種?？偠喾蛹翱傸S酮含量的高低順序在4個品種中均表現(xiàn)一致，其排序?yàn)椤_灣AF>‘三明圓葉>‘三明尖葉>‘漳州尖葉。多糖含量以‘漳州尖葉金線蓮中最高，為（45.90± 2.71） mg/g，顯著高于其他3個品種，可分別高達(dá)3.57～4.88倍。多糖含量的高低順序在4個品種中為‘漳州尖葉>‘三明尖葉>‘臺灣AF>‘三明圓葉。

2.2 ?同一地理種源金線蓮不同采集時(shí)間比較分析

2.2.1 ?生物量 ?4個金線蓮品種在不同采集時(shí)間單株鮮重及單株干重比較分析如表3所示。4個金線蓮品種的單株鮮重隨著移栽時(shí)間的延長呈現(xiàn)一定的增長趨勢?！骷馊~、‘三明圓葉、‘漳州尖葉與‘臺灣AF金線蓮品種種植滿180 d的植株其單株鮮重分別達(dá)（841±218）、（826±267）、（1705±334）、（1285±213） mg。方差分析顯示，與移栽滿0 d的植株相比，‘三明圓葉、‘漳州尖葉與‘臺灣AF金線蓮品種種植滿180 d植株的單株鮮重可達(dá)顯著性提高。

4個金線蓮品種在不同采集時(shí)間單株干重比較分析如表4所示。4個金線蓮品種中，‘三明尖葉金線蓮隨著移栽時(shí)間的延長，其單株干重呈現(xiàn)一定的波動;其余3個品種的單株干重隨著移栽時(shí)間的延長均呈現(xiàn)一定程度的增長趨勢。與移栽滿0 d的植株相比，‘三明圓葉、‘漳州尖葉與‘臺灣AF金線蓮種植滿180 d的植株其單株干重均有顯著性增加，分別達(dá)（65±26）、（185±30）、（98±19）mg。

2.2.2 ?活性成分 ?4個金線蓮品種在不同采集時(shí)間的活性成分比較分析結(jié)果見圖2。4個品種中，‘臺灣AF金線蓮的總多酚與多糖含量隨著移栽時(shí)間的延長呈現(xiàn)一定的波動;其余3個品種在不同采集時(shí)間的活性成分變化規(guī)律大致相同，即隨著移栽時(shí)間的延長，總多酚及總黃酮的含量緩慢增長，而多糖含量則遞減?！骷馊~金線蓮中，總多酚與總黃酮含量均在種植滿150 d時(shí)達(dá)最大值，分別為（9.81±0.24）與（4.62±0.16）mg/g。多糖含量在移栽滿90 d時(shí)達(dá)最大值，為（26.05±2.11）mg/g?！鲌A葉金線蓮中，總多酚、總黃酮含量均在種植滿150 d時(shí)達(dá)最大值，分別為（9.27±0.22）與（4.60±0.17） mg/g;多糖含量在移栽滿0 d時(shí)達(dá)最大值，為（24.29±2.33）mg/g?！闹菁馊~金線蓮中，總多酚、總黃酮含量均在種植滿90 d時(shí)達(dá)到最大值，分別為（7.74±0.05）與（4.63±0.04）mg/g;多糖含量在移栽滿120 d時(shí)達(dá)最大值（45.90±4.70）mg/g?！_灣AF金線蓮中，總多酚含量在移栽滿30 d時(shí)達(dá)到最大值（9.66±0.06）mg/g;總黃酮含量在種植滿120 d時(shí)達(dá)到最大值（4.55±0.06）mg/g;多糖含量在移栽滿150 d時(shí)達(dá)最大值（16.31±0.79）mg/g。

2.3 ?同一地理種源金線蓮不同部位活性成分比較分析

進(jìn)一步對金線蓮的不同部位活性成分進(jìn)行分析比較。分別選取同一生長期的‘三明尖葉和‘三明圓葉金線蓮的葉及莖進(jìn)行活性成分分析，結(jié)果如表5所示。2個品種中葉及莖活性成分含量規(guī)律一致，均表現(xiàn)為：葉中總多酚及總黃酮含量高于莖中含量，即葉>莖;而對于多糖含量，則以莖中為高，即莖>葉;且均達(dá)顯著性差異。

2.4 ?生物學(xué)性狀與活性成分相關(guān)性分析

對不同地理種源金線蓮7個采集時(shí)間的生物學(xué)性狀與活性成分的相關(guān)性進(jìn)行綜合分析，結(jié)果如表6所示。其中，在0.01水平，單株鮮重與單株干重呈顯著正相關(guān);總多酚與總黃酮呈顯著正相關(guān);單株鮮重分別與葉長、葉寬、莖高、莖直徑呈顯著正相關(guān);單株干重分別與葉長、葉寬、莖高呈顯著正相關(guān);多糖含量與葉長、單株鮮重、單株干重呈顯著正相關(guān);多糖含量與總多酚含量呈顯著負(fù)相關(guān)。在0.05水平，總多酚含量與總黃酮含量呈顯著正相關(guān)。

3 ?討論

在金線蓮中，生物量是經(jīng)濟(jì)效益的重要指標(biāo)之一。總多酚、總黃酮及多糖是金線蓮的重要活性成分，也是評價(jià)金線蓮品質(zhì)的重要指標(biāo)。本研究中，至移栽滿120 d時(shí)，不同地理種源金線蓮中，單株鮮重及單株干重均以‘漳州尖葉金線蓮最高，可分別比其他品種顯著高達(dá)1.62～2.34倍及2.06～2.71倍。同時(shí)，與其他品種相比較，‘漳州尖葉金線蓮中多糖含量最高，可分別高達(dá)3.57～4.88倍。此外，生物學(xué)性狀與活性成分的相關(guān)性結(jié)果也表明，生物量與多糖含量呈顯著正相關(guān)?？梢?，‘漳州尖葉金線蓮在生物量以及糖類物質(zhì)資源開發(fā)上具有較佳的優(yōu)勢，建議推廣應(yīng)用。本研究中還發(fā)現(xiàn)‘臺灣AF金線蓮品種也值得關(guān)注，至移栽滿120 d時(shí)，其單株鮮重及單株干重僅次于‘漳州尖葉品種。同時(shí)，活性成分分析顯示，總多酚及總黃酮含量在‘臺灣AF金線蓮中最高，顯著高于其他3個品種?？梢?，在生物量、多酚及黃酮資源開發(fā)利用上，‘臺灣AF金線蓮品種具有一定的優(yōu)勢，具有很好的推廣應(yīng)用前景。當(dāng)然，為更好的優(yōu)選適于推廣應(yīng)用的品種，還需進(jìn)一步篩選更多的不同地理種源品種。

目前，金線蓮的合適采集時(shí)間尚無標(biāo)準(zhǔn)可依，而金線蓮不同采集時(shí)間活性成分呈現(xiàn)出一定的差異[7]，因此，系統(tǒng)研究金線蓮不同采集時(shí)間活性成分動態(tài)變化具有重要的研究意義。本研究中，除‘臺灣AF金線蓮品種外，其余3個金線蓮品種中，總多酚與總黃酮含量呈現(xiàn)出大致相同的動態(tài)變化規(guī)律，即隨著栽培時(shí)間的延長而增長;而多糖含量則相反，隨栽培時(shí)間的延長呈遞減趨勢。前人研究中發(fā)現(xiàn)，金線蓮在移栽滿120 d時(shí)的總黃酮含量高于移栽0 d的植株;而多糖含量則相反，以移栽0 d的植株為高[12-14]?？梢?，本研究中發(fā)現(xiàn)的總黃酮與多糖含量動態(tài)變化規(guī)律與這些研究結(jié)果相一致。此外，相關(guān)性分析也表明，總多酚含量與總黃酮含量呈顯著正相關(guān)。因此，若以總多酚或總黃酮開發(fā)為生產(chǎn)目的，可選用移栽苗;但若以多糖開發(fā)為生產(chǎn)目的，可直接選用組培苗?！_灣AF金線蓮品種中，與其余3個品種相比較發(fā)現(xiàn)，隨著移栽時(shí)間的延長，僅總黃酮含量變化與其余3個品種大致相同，呈現(xiàn)上升趨勢。而總多酚與多糖含量的變化規(guī)律則不一致，呈現(xiàn)一定的波浪線型起伏變化。這很大程度上可能歸因于品種差異。

本研究中，在‘三明尖葉金線蓮與‘三明圓葉金線蓮中，葉中總多酚及總黃酮含量顯著高于莖，但其多糖含量則顯著低于莖。蔣元斌[7]研究認(rèn)為，總黃酮主要累積在葉片，莖段部位較少。陳曉蘭等[15]研究認(rèn)為，金線蓮根莖部的多糖含量高于葉中多糖含量?？梢?，本研究中不同部位總黃酮與多糖含量分析結(jié)果與蔣元斌[7]及陳曉蘭等[15]研究報(bào)道相一致。說明總多酚與總黃酮主要在葉片中累積，而糖類物質(zhì)則主要在莖段中累積。此研究為金線蓮活性成分開發(fā)利用及優(yōu)良品種開發(fā)推廣提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會. 中國植物志： 第17卷[M]. 北京： 科學(xué)出版社， 2006： 204， 220-221.

[2] 蔡金艷. 金線蓮降血糖活性成分及作用機(jī)制的研究[D]. 武漢： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院， 2006.

[3] 吳佳溶. 不同地理種源金線蓮有效成分含量測定及SRAP標(biāo)記[D]. 福州： 福建農(nóng)林大學(xué)， 2012.

[4] 施滿容， 龔林光， 陸志平， 等. 不同地區(qū)野生金線蓮有效成分含量的比較[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)， 2016， 22（24）： 107- 110.

[5] 唐楠楠， 陶佳青， 陳常理， 等. 臺灣金線蓮與浙江金線蓮多糖含量及抗氧化活性比較研究[J]. 西北植物學(xué)報(bào)， 2016， 36（3）： 521-526.

[6] 杜小鳳， 吳傳萬， 王連臻， 等. 苦瓜營養(yǎng)成分分析及采收期對苦瓜營養(yǎng)品質(zhì)的影響[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)， 2014. 30（1）： 226-231.

[7] 蔣元斌. 兩種金線蓮不同生長期主要活性成分動態(tài)變化[D]. 福州： 福建農(nóng)林大學(xué)， 2012.

[8] Zuo L L， Wang Z Y， Fan Z L， et al. Evaluation of antioxi-dant and antiproliferative properties of three Actinidia （Actinidia kolomikta， Actinidia arguta， Actinidia chinensis） extracts in vitro[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2012， 13（5）： 5506-5518.

[9] Sheng Z L， Wan P F， Dong C L， et al. Optimization of total flavonoids content extracted from Flos Populi using response surface methodology[J]. Industrial Crops and Products， 2013， 43： 778-786.

[10] 曾碧玉， 蘇明華， 陳清西， 等. 金線蓮多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)， 2016， 37（3）： 615-621.

[11] 李合生， 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M]. 北京： 高等教育出版社， 2000： 197-199.

[12] 黃瑞平， 黃穎楨， 陳菁瑛， 等. 不同月齡金線蓮多糖和總黃酮含量的比較[J]. 熱帶生物學(xué)報(bào)， 2012， 3（2）： 174-176.

[13] 張杭穎， 楊秀鴻， 李增富， 等. 微波輔助法提取金線蓮總黃酮工藝及地栽階段總黃酮含量動態(tài)研究[J]. 三明學(xué)院學(xué)報(bào)， 2015， 32（2）： 58-63.

[14] 鄒金美， 王兵麗， 趙曉丹， 等. 福建金線蓮組培苗和移栽苗主要活性成分及抗氧化性的研究[J]. 食品工業(yè)科技， 2014， 35（23）： 136-139， 144.

[15] 陳曉蘭， 黃麗英， 黃麗萍， 等. 不同產(chǎn)地金線蓮根莖和葉中多糖含量對比[J]. 分析測試技術(shù)與儀器， 2012， 18（3）： 135-139.