支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及肺功能水平的相關(guān)性研究

周正華 梁志勇 鄧小懂

[摘要]目的 分析支氣管哮喘（BA）患者呼出氣一氧化氮（FeNO）與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）計(jì)數(shù)及肺功能水平的相關(guān)性，以探討其在BA臨床診療中的意義。方法 選取2018年2月～2019年2月于清遠(yuǎn)市慢性病防治醫(yī)院呼吸科門診及住院部治療的47例BA患者設(shè)為BA組，同期選取45例在我院呼吸科治療的非BA患者設(shè)為非BA組。采用肺功能檢測(cè)儀檢測(cè)各組患者的肺組織通氣功能，計(jì)算第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1%）。采用全血細(xì)胞自動(dòng)分析儀檢測(cè)各組患者的外周血EOS計(jì)數(shù)。采用一氧化氮（NO）試劑盒檢測(cè)各組患者的FeNO，采用蘇木精-伊紅（HE）染色法檢測(cè)各組患者的誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比。結(jié)果 BA組患者的FeNO、誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均高于非BA組（P<0.05），而FEV1%低于非BA組（P<0.05）;BA組患者的FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均成正相關(guān)（r=0.572、0.643，P<0.05），而與FEV1%無相關(guān)性（r=-0.005，P>0.05）。結(jié)論 呼吸氣道阻塞程度與呼吸氣道炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度之間無明顯相關(guān)性，F(xiàn)eNO無法替代肺組織生理功能檢測(cè)。

[關(guān)鍵詞]支氣管哮喘;呼出氣一氧化氮;誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比;嗜酸性粒細(xì)胞;肺功能

[中圖分類號(hào)] R562.25 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1674-4721（2020）6（b）-0062-04

[Abstract] Objective To study the correlation of fractional exhaled nitric oxide （FeNO） with eosinophils percentage in induced sputum， eosinophils （EOS） count in peripheral blood and lung function level in patients with bronchial asthma （BA）， and to explore its significance in clinical diagnosis and treatment of BA. Methods A total of 47 cases of BA patients treated in Outpatient of Department of Respiration and Department of Inpatient， Chronic Disease Prevention Hospital of Qingyuan City from February 2018 to February 2019 were selected as the BA group， and 45 cases of non-BA patients treated in department of respiration of our hospital were selected as the non-BA group during the same period. Lung function detector was used to detect the ventilation function of lung tissues in each group， and the forced expiratory volume for 1 second expressed as a percentage of the forced vital capacity （FEV1%） was calculated. The EOS count in peripheral blood of patients in each group was detected by automatic blood cell analyzer. FeNO in each group was detected by nitric oxide （NO） detection kit， and hematoxylin-eosin （HE） staining was used to detect the percentage of induced sputum cells in each group. Results The FeNO， eosinophils percentage in induced sputum and peripheral blood EOS count of the BA group were higher than those of the non-BA group （P<0.05）， while FEV1% was lower than that of the non-BA group （P<0.05）. The FeNO of the BA group was positively correlated with the eosinophils percentage in induced sputum and peripheral blood EOS count （r=0.572， 0.643， P<0.05）， but not correlated with FEV1% （r=-0.005， P>0.05）. Conclusion There is no significant correlation between the degree of respiratory airway obstruction and the severity of respiratory airway inflammatory response， so FeNO could not replace the physiological function detection of lung tissues.

[Key words] Bronchial asthma; Fractional exhaled nitric oxide; Eosinophils count in peripheral blood; Eosinophils; Lung function

支氣管哮喘（bronchial asthma，BA）是一種發(fā)病率較高的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，其病理生理特征主要為呼吸氣道高反應(yīng)性[1]。目前，臨床上采用支氣管內(nèi)膜組織活檢以及支氣管肺泡灌洗可直接檢測(cè)患者呼吸氣道炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重程度，但上述檢查均可對(duì)患者機(jī)體造成一定的損傷[2]。肺功能指標(biāo)檢測(cè)也是常用于監(jiān)測(cè)BA疾病嚴(yán)重程度及控制的重要方法，其中第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（the forced expiratory volume for 1 second expressed as a percentage of the forced vital capacity，F(xiàn)EV1%）是一種反映呼吸氣道阻塞程度的主要指標(biāo)，并采用FEV1%作為評(píng)估BA疾病發(fā)作嚴(yán)重程度以及分級(jí)的重要標(biāo)準(zhǔn)[3]。但有研究認(rèn)為[4]，肺功能相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)與患者呼吸氣道炎癥反應(yīng)之間不存在相關(guān)性。近些年研究證實(shí)，呼出氣一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，F(xiàn)eNO）是診斷BA及指導(dǎo)醫(yī)務(wù)人員實(shí)施抗炎癥感染反應(yīng)治療的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志物[5]。誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比可持續(xù)監(jiān)測(cè)及客觀評(píng)估抗炎癥反應(yīng)的治療效果，具有重復(fù)檢測(cè)性好、對(duì)機(jī)體無創(chuàng)傷等優(yōu)點(diǎn)，與呼吸氣道內(nèi)膜組織活檢結(jié)果基本相符合，可準(zhǔn)確反映患者呼吸氣道炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重程度[6]。還有研究認(rèn)為[7]，嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophils，EOS）是誘導(dǎo)BA發(fā)生的主要效應(yīng)作用細(xì)胞，與BA患者病情嚴(yán)重程度之間存在密切聯(lián)系[8]。因此，本研究擬分析BA患者FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)及肺功能指標(biāo)FEV1%水平的相關(guān)性，以探討其在BA臨床診療中的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2018年2月～2019年2月于清遠(yuǎn)市慢性病防治醫(yī)院呼吸科門診及住院部治療的47例BA患者作為BA組，其中男25例，女22例;年齡52～81歲，平均（67.2±11.8）歲。同期選取我院呼吸科住院治療的45例肺炎、慢性阻塞性肺疾病等非BA患者設(shè)為非BA組，其中男24例，女21例，年齡55～80歲，平均（66.1±12.2）歲。兩組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究方案已通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①BA患者經(jīng)臨床癥狀體征、實(shí)驗(yàn)室及肺功能檢測(cè)均已確診[9];②非BA組患者病情穩(wěn)定，既往無吸煙不良嗜好、過敏性疾病史及BA病史;③所有研究對(duì)象均了解本研究方案，同意并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并重要臟器生理功能障礙及其他系統(tǒng)性疾病的患者;②合并其他部位或臟器炎癥感染反應(yīng)的患者;③合并肺部惡性腫瘤疾病、肺纖維化或手術(shù)治療疾病史的患者;④近期使用糖皮質(zhì)激素藥物治療的患者。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1 FEV1%檢測(cè) ?采用MSA99型肺功能檢測(cè)儀（濟(jì)南來寶醫(yī)療器械有限公司）對(duì)各組患者行肺組織通氣功能檢測(cè)，計(jì)算FEV1%，所有受試者均檢測(cè)3次，選擇最好的1次作為最終檢測(cè)結(jié)果。

1.3.2外周血EOS計(jì)數(shù)檢測(cè) ?采集各組患者的外周血2 ml，采用庫爾特COULTERR LH 750型全血細(xì)胞自動(dòng)分析儀（美國(guó)貝克曼公司）檢測(cè)外周血EOS計(jì)數(shù)。

1.3.3 FeNO檢測(cè) ?采用一氧化氮（nitric oxide，NO）檢測(cè)試劑盒（北京百賽聯(lián)合科技發(fā)展有限公司）檢測(cè)各組患者FeNO，嚴(yán)格按照試劑盒說明書由檢驗(yàn)科醫(yī)師進(jìn)行操作?；颊吆魵饬魉僭O(shè)置為50 ml/s，囑咐患者首先將肺組織內(nèi)氣體完全排空，隨后讓患者口含過濾器，深吸氣后再平穩(wěn)呼出氣體，持續(xù)時(shí)間為10 s，詳細(xì)記錄檢測(cè)結(jié)果。

1.3.4誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比檢測(cè) ?患者首先吸入400 μg沙丁胺醇?xì)忪F劑，10 min后清水漱口擤鼻取出濃稠痰塊，采用0.1%二硫蘇糖醇溶液完全混勻痰塊后過濾雜質(zhì)，3000 r/min離心處理后丟棄上清液，采用磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered solution，PBS）涂片處理，待風(fēng)干后使用乙醇溶液妥善固定，經(jīng)蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色法處理后予以細(xì)胞分類，計(jì)算EOS所占比例。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn);采用Pearson法分析FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)及肺功能指標(biāo)FEV1%的相關(guān)性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者FeNO、誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)及FEV1%的比較

BA組患者的FeNO、誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均高于非BA組，而FEV1%低于非BA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2 BA組患者FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)及FEV1%的相關(guān)性

BA組患者的FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均成正相關(guān)（r=0.572、0.643，P<0.05），而與FEV1%無相關(guān)性（r=-0.005，P>0.05）（表2）。

3討論

FeNO是一種具有生物活性功能的物質(zhì)，與BA患者呼吸氣道炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度具有明顯的相關(guān)性，其可作為診斷BA患者呼吸氣道炎癥反應(yīng)發(fā)生的重要實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志物[10]。還有研究認(rèn)為[11]，BA患者FeNO水平升高早于臨床癥狀體征以及肺生理功能異常，故在診斷BA方面具有較高的敏感性及特異性。本研究結(jié)果顯示，BA組患者FeNO高于非BA組（P<0.05），與上述研究結(jié)果相似。FeNO的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)步驟較為簡(jiǎn)單，患者配合程度也較高，可重復(fù)操作檢測(cè)，故臨床應(yīng)用較為廣泛。研究證實(shí)[12]，F(xiàn)eNO與外周血EOS計(jì)數(shù)、誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比及支氣管肺泡灌洗液、支氣管內(nèi)膜組織活檢中的EOS計(jì)數(shù)密切相關(guān)，可用于臨床診斷BA以及預(yù)測(cè)BA患者對(duì)糖皮質(zhì)激素治療的反應(yīng)。誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比檢測(cè)具有重復(fù)性較高、無創(chuàng)性等優(yōu)點(diǎn)，可持續(xù)性監(jiān)測(cè)藥物抗炎癥反應(yīng)的治療效果，從而客觀反映BA患者炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度[13]。

外周血EOS計(jì)數(shù)是一個(gè)判斷BA不同臨床表型的準(zhǔn)確實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，其數(shù)目升高提示BA急性發(fā)作，同時(shí)還可監(jiān)測(cè)糖皮質(zhì)激素藥物的治療效果[14]。本研究結(jié)果顯示，BA組患者誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均高于非BA組（P<0.05），與上述研究結(jié)果相似。同時(shí)有研究證實(shí)[15]，BA患者FeNO水平與糖皮質(zhì)激素藥物療效之間存在相關(guān)性，但臨床單一依靠FeNO評(píng)估BA患者病情嚴(yán)重程度及指導(dǎo)治療，仍難以獲得較高的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示，BA組患者FeNO與誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)均成正相關(guān)（P<0.05），提示FeNO聯(lián)合誘導(dǎo)痰細(xì)胞百分比、外周血EOS計(jì)數(shù)能更準(zhǔn)確地評(píng)估BA患者對(duì)糖皮質(zhì)激素藥物的療效，判斷氣呼吸道炎癥反應(yīng)是否得到有效控制。

目前，臨床關(guān)于FeNO水平與肺組織生理功能的相關(guān)性研究結(jié)果存在較大的差異性，有研究證實(shí)FeNO水平與FEV1%無明顯的相關(guān)性關(guān)系[16]。本研究結(jié)果顯示，雖然BA組患的者FEV1%低于非BA組（P<0.05），但BA組患者的FeNO與FEV1%無相關(guān)性（P>0.05），提示呼吸氣道阻塞程度與呼吸氣道炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度之間無明顯的相關(guān)性，F(xiàn)eNO無法替代肺組織生理功能檢測(cè)，而FeNO與肺組織通氣生理功能聯(lián)合應(yīng)用有助于診斷及鑒別診斷慢性呼吸氣道疾病。但也有研究發(fā)現(xiàn)[17]，并非所有BA患者FeNO水平與呼吸氣道炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度有明顯的相關(guān)性，部分BA患者FeNO水平很高，但在痰液實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中無法檢出EOS，還有少數(shù)患者治療后誘導(dǎo)痰EOS在短時(shí)間消失，而FeNO仍處于較高水平[18]。故FeNO表達(dá)水平與BA患者病情控制程度并不完全呈正相關(guān)性關(guān)系。

綜上所述，呼吸氣道阻塞程度與呼吸氣道炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度之間無明顯的相關(guān)性，F(xiàn)eNO無法替代肺組織生理功能檢測(cè)。本研究選擇病例數(shù)相對(duì)較少，故仍需以后擴(kuò)大樣本量，同時(shí)還需探討其聯(lián)合支氣管肺泡灌洗液EOS及支氣管內(nèi)膜組織EOS檢測(cè)BA患者的準(zhǔn)確性，有助于指導(dǎo)醫(yī)務(wù)人員的臨床治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Matsunaga K，Hirano T，Oka A，et al.Persistently high exhaled nitric oxide and loss of lung function in controlled asthma[J].Allergy Int，2016，65（3）：266-271.

[2]牛斌，熊安英.呼出氣一氧化氮評(píng)估慢性阻塞性肺疾病患者氣道炎癥臨床研究[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志，2016， 30（5）：503-505.

[3]張連蓮，劉洋，趙爾為，等.呼出氣一氧化氮在支氣管哮喘診斷中的價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2015，19（8）：1287-1289.

[4]劉敏，許西琳，劉冬，等.呼出氣一氧化氮和外周血嗜酸性粒細(xì)胞百分率對(duì)支氣管哮喘診斷和病情評(píng)估價(jià)值[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志，2017，31（8）：769-771.

[5]陳博智.支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮與肺功能、誘導(dǎo)痰及外周血嗜酸性粒細(xì)胞比例的相關(guān)性分析及其臨床意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2019，14（2）：43-44.

[6]金芬華，杜俊華，戴元榮，等.支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮與肺功能、誘導(dǎo)痰及外周血嗜酸性粒細(xì)胞比例等指標(biāo)的相關(guān)性分析及其臨床意義[J].浙江醫(yī)學(xué)，2016，38（17）：1401-1404.

[7]李偉棠，黃蘭卿，梁紅衛(wèi)，等.呼出氣一氧化氮檢測(cè)對(duì)支氣管哮喘患者長(zhǎng)期管理的意義[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，11（30）：138-142.

[8]陳釗成，陳必達(dá)，張衛(wèi)芳，等.呼出氣一氧化氮檢測(cè)在支氣管哮喘臨床診斷中的應(yīng)用[J].黑龍江醫(yī)學(xué)，2015，39（6）：650-651.

[9]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南（2016年版）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2016，39（9）：675-697.

[10]劉念，羅紅，劉志光.支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮與血嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量及比例和免疫球蛋白E的相關(guān)性分析[J].醫(yī)學(xué)臨床研究，2017，34（5）：879-881，885.

[11]嚴(yán)瑾，金曉燕，鄭聰，等.支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮及誘導(dǎo)痰的相關(guān)性研究[J].國(guó)際呼吸雜志，2015，35（5）：325-328.

[12]雒志明，高賞，任魁，等.支氣管哮喘患者外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與誘導(dǎo)痰嗜酸性粒細(xì)胞百分比和呼出氣一氧化氮的相關(guān)性[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，48（10）：1039-1043.

[13]張雅軍.呼出氣一氧化氮測(cè)定與哮喘患者血EOS、IgE及FEV1/pred相關(guān)性分析[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2014，9（19）：66-67.

[14]梁連哨，鄧靜敏，鄒小英，等.中性粒細(xì)胞性慢性持續(xù)期哮喘患者治療前后外周血和誘導(dǎo)痰中嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白水平及其臨床意義[J].廣西醫(yī)學(xué)，2016，38（3）：324-327.

[15]齊力，姜丹.誘導(dǎo)痰查嗜酸粒細(xì)胞對(duì)支氣管哮喘患者調(diào)整治療的指導(dǎo)意義[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，51（2）：180-182.

[16]霍龍，范曉云，陸兆雙，等.哮喘急性發(fā)作FeNO與外周血嗜酸粒細(xì)胞及肺功能的相關(guān)性研究[J].臨床肺科雜志，2014，19（4）：583-585.

[17]吳淑紅，榮福，歐陽雁弟.支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮與外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和肺功能水平的相關(guān)性研究[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2018，12（7）：41-42.

[18]夏清，潘頻華，王展，等.呼出氣一氧化氮檢測(cè)在支氣管炎癥性肺疾病中的臨床應(yīng)用.中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2014，39（4）：365-370.

（收稿日期：2019-11-26 ?本文編輯：孟慶卿）