三種類型黑木耳菌種制作及應(yīng)用比較試驗(yàn)

王慶武 蘭玉菲 孔 怡 唐麗娜 崔 曉

（泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東泰安271000）

食用菌菌種類型按照物理性狀主要分為固體菌種和液體菌種兩大類，固體菌種又分為木屑菌種和枝條菌種。菌種制作是食用菌栽培的重要環(huán)節(jié)[1]，不同類型菌種制作流程及菌種質(zhì)量不一。優(yōu)良菌種菌齡短，活力強(qiáng)，純度高，接種后萌發(fā)快、菌絲長(zhǎng)勢(shì)旺，產(chǎn)量高，抗病性強(qiáng)。目前栽培黑木耳用種主要是固體菌種，而液體菌種因前期投入大、技術(shù)復(fù)雜，尚未廣泛推廣[2]。固體菌種制作較為繁瑣、制種時(shí)間長(zhǎng)，菌齡不一致，活力低，用工多，但發(fā)菌過程中易發(fā)現(xiàn)并剔除雜菌污染菌包[3]；液體菌種制作時(shí)間短，菌齡一致，活力強(qiáng)，萌發(fā)快，用工少，但培養(yǎng)菌種技術(shù)要求高。菌種需求量隨著黑木耳產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展而急劇上升[4]。為探索不同類型菌種應(yīng)用于黑木耳生產(chǎn)的效果，筆者進(jìn)行了幾年相關(guān)試驗(yàn)，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下，以期為黑木耳規(guī)?；耘嘤梅N提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

（1）供試黑木耳品種：山東泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院保藏菌株TH02。

（2）試驗(yàn)培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯200 g（去皮煮汁），麩皮40 g（煮汁），葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，瓊脂20 g，加水1 L。

木屑菌種培養(yǎng)基配方：木屑60%，棉籽殼30%，麩皮8%，葡萄糖1%，石膏1%。培養(yǎng)料含水量（60±2）%。

枝條菌種培養(yǎng)基配方：枝條90%，木屑7%，麩皮2%，葡萄糖0.5%，石膏0.5%。

液體菌種培養(yǎng)基配方：玉米粉3%，淀粉4%，酵母膏0.1%，麩皮0.2%，KH2PO40.3%，MgSO40.15%，維生素B10.15‰，消泡劑0.3‰，水1 L。

栽培料配方：木屑86.5%，麩皮10%，玉米面2%，石膏1%，石灰0.5%。培養(yǎng)料含水量（60±2）%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌種制作

1.2.1.1 母種活化

采用18 mm×180 mm 玻璃試管制作斜面培養(yǎng)基，無菌條件下接入一塊0.4 cm×0.4 cm 原始母種塊，25～28 ℃暗培養(yǎng)，菌絲滿管后備用。

1.2.1.2 木屑菌種培養(yǎng)

采用15 cm×30 cm×0.005 cm 聚丙烯折角袋。按照培養(yǎng)基配方配料、裝袋，無棉蓋體封口，高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫。無菌條件下每袋接入一塊2～2.5 cm長(zhǎng)母種塊，25～28 ℃暗培養(yǎng)。

1.2.1.3 枝條菌種

選用7 mm×7 mm×150 mm楊木枝條，1%石灰水浸泡48 h，撈出瀝干水。培養(yǎng)袋為15 cm×30 cm×0.005 cm 聚丙烯折角袋。按照培養(yǎng)基配方配料、裝袋，無棉蓋體封口，高壓滅菌后冷卻至室溫，無菌條件下每袋接入一塊 2～2.5 cm 長(zhǎng)母種塊，25～28 ℃暗培養(yǎng)。

1.2.1.4 液體菌種培養(yǎng)

搖瓶液體菌種培養(yǎng)：采用1 000 mL 三角燒瓶，裝入液體培養(yǎng)基700 mL，封口膜封口，高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，無菌條件下接入7～8塊2～3 mm 見方母種塊，28 ℃靜止24 h后置于140～160 r/min 恒溫?fù)u床上，25～28 ℃暗培養(yǎng)10 d。

發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)：采用100 L 發(fā)酵罐，裝入80 L 液體培養(yǎng)基，高壓蒸汽滅菌后冷卻至25 ℃，無菌條件下接入700 mL 搖瓶菌種，通入無菌空氣，調(diào)節(jié)罐壓0.2～0.3 MPa，25～26 ℃培養(yǎng)7 d即可。

1.2.2 接種栽培袋及出耳管理

采用16.2 cm×34 cm×0.003 cm 聚乙烯折角袋。機(jī)械裝料，中間打孔，每袋裝折干料0.6 kg，封口棒封口，常壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫。無菌條件下中軸接種，分別接入木屑菌種30 g、枝條菌種2根、液體菌種25 mL，接種后培養(yǎng)室內(nèi)22～28 ℃暗培養(yǎng)。

菌絲滿袋后采用大棚吊袋立體小孔出耳方式，接種三種類型菌種栽培袋各選取無污染袋150 袋，試驗(yàn)棚內(nèi)隨機(jī)吊袋。3 次重復(fù)，每重復(fù)50 袋。按照《黑木耳大棚吊袋栽培技術(shù)規(guī)程》（DB3709/T 132—2016）進(jìn)行管理，采收第一潮耳曬干稱重。

1.2.3 調(diào)查統(tǒng)計(jì)

調(diào)查記錄各處理菌絲生長(zhǎng)、出耳、產(chǎn)量等情況，進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

表1 三種類型菌種制作周期比較

表2 三種類型菌種接種栽培袋發(fā)菌比較

圖1 接種不同類型菌種栽培袋發(fā)菌比較

2 結(jié)果與分析

2.1 三種類型黑木耳菌種制作周期比較

三種類型菌種制作周期見表1。

由表1可以看出，三種類型菌種制種周期不同，液體菌種制種周期最短為27 d，木屑菌種制種周期最長(zhǎng)為61 d，液體菌種制種周期相比木屑菌種和枝條菌種分別縮短34 d、31 d；三種類型菌種質(zhì)量均好。

2.2 三種類型菌種接種栽培袋的發(fā)菌比較

三種類型菌種接種栽培袋后發(fā)菌結(jié)果見表2。

由表2可以看出，三種類型菌種接種栽培袋后，菌絲均在48 h 內(nèi)萌發(fā)；液體菌種吃透料時(shí)間最短為13 d，相比木屑菌種、枝條菌種分別縮短2 d、5 d；液體菌種菌絲滿袋時(shí)間最短為35 d，相比木屑菌種、枝條菌種分別縮短18 d、15 d，且菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好；接種液體菌種的發(fā)菌污染率最低為1.33%，相比木屑菌種、枝條菌種均降低50%；接種液體菌種的菌袋成品率最高為97.3%，相比木屑菌種、枝條菌種分別提高4.29%、3.51%。

2.3 接種三種類型菌種栽培袋出耳比較

試驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 三種類型菌種接種栽培袋出耳比較

由表3 可知，接種液體菌種栽培袋出耳芽最早為17 d，相比木屑菌種、枝條菌種分別提前5 d、3 d，且耳芽整齊；液體菌種出耳期最短為45 d，相比木屑菌種、枝條菌種分別縮短7 d、5 d；液體菌種產(chǎn)量最高，袋均干耳產(chǎn)量為63.42 g；接種液體菌種栽培袋出耳期污染率最低為1.33%，相比木屑菌種、枝條菌種出耳期污染率均降低60.06%。

2.4 應(yīng)用三種類型菌種經(jīng)濟(jì)效益比較

經(jīng)濟(jì)效益比較見表4。

表4 應(yīng)用三種類型菌種經(jīng)濟(jì)效益比較

由表4可知，應(yīng)用液體菌種成本最低，為0.04元/袋，總成本也最低，為2.03元/袋。應(yīng)用液體菌種經(jīng)濟(jì)效益最高，為3.81元/袋，每袋利潤(rùn)最高，為1.79元/袋。

3 小結(jié)

選用生產(chǎn)中常用的三種類型菌種栽培黑木耳，結(jié)果表明，液體菌種制種周期最短，接種后發(fā)菌快，出耳早，整齊，抗性強(qiáng)，綜合效益最高；木屑菌種、枝條菌種相比液體菌種制種周期長(zhǎng)，菌齡不一致，菌絲滿袋時(shí)間長(zhǎng)，出耳晚，產(chǎn)量低，生產(chǎn)效率低，綜合成本高。

綜合試驗(yàn)結(jié)果，黑木耳規(guī)?；a(chǎn)應(yīng)用液體菌種，綜合效益較高，建議有條件的企業(yè)或栽培戶采用液體菌種。