馮郭君男 樊芳
摘 要:鮑魚作為一種名貴食材,含有豐富的營養(yǎng)物質。鮑魚是一種軟體動物,對于鮑魚來說可以食用的部分就是腹足,也正是因為腹足內含有豐富的纖維蛋白以及膠原蛋白,才使得鮑魚受到了廣大食客的喜愛。為了更加科學化的完成鮑魚的加工過程,早在上世紀六十年代日本就已經開始了對鮑魚體內膠原蛋白的研究工作。通過相關研究發(fā)現,在不同季節(jié)鮑魚體內膠原蛋白的含量也不相同,其中在每年的二月份魚體內的膠原蛋白含量最高,而在每年的七月份鮑魚體內的膠原蛋白含量最低。同時也發(fā)現鮑魚體內膠原蛋白含量的高低和鮑魚的肌肉性質也有著密切地聯系。為了更好的了解鮑魚體內的膠原蛋白,本篇文章對鮑魚肌肉的膠原蛋白進行了相關分析,希望為相關研究提供一定的數據參考。
關鍵詞:鮑魚肌肉;膠原蛋白;實驗分析
一、前言
近年來我們的生活水平不斷提高,每年對鮑魚的需求越來越多。通過相關研究發(fā)現鮑魚體內膠原蛋白所產生的明膠會引起鮑魚各項質量指標的變化,也就是說影響鮑魚加工制品品質高低的最主要的因素就是鮑魚肌肉膠原蛋白。同時也有研究表明在鮑魚肌肉膠原蛋白內可以提取出兩種酶溶性膠原蛋白,本文為了進一步為鮑魚膠原蛋白的研究提供一些基礎數據,首先對鮑魚內膠原蛋白進行了提取,然后通過一系列的比對,對提取出的膠原蛋白進行了相應的分析。
二、對鮑魚肌肉膠原蛋白提取的實驗過程
在對膠原蛋白進行提取的過程中,為了保障膠原蛋白的完整性以及可利用性,整個提取過程需要在4℃的恒溫環(huán)境中進行。首先將鮑魚的肌肉組織洗干凈之后再切成塊狀,然后按照一定的比例加入相應的中性特殊溶液進行攪拌。完成攪拌之后,再利用離心機器將攪拌后的溶液進行離心,整個離心過程在15min。在完成離心操作之后會得到相應的沉淀物質,然后先利用蒸餾水對沉淀物質進行清洗。在清洗之后,再按照一定的比例加入一定量的氯化鉀溶液進行攪拌。在攪拌之后再對其離心十五分鐘左右,然后再對沉淀物質利用氯化鉀溶液進行清洗。同樣在清洗之后仔細加入一定量的氯化鈉溶液進行攪拌,攪拌之后進行離心,在這個過程中主要是為了去除膠原蛋白內的上清,然后再對沉淀物質進行清洗之后加入一定量的氫氧化鈉溶液進行攪拌,進行30min的離心過程,離心之后再利用蒸餾水進行清洗,最后再加入一定量的乙酸溶液進行攪拌溶解,最后再進行一次離心操作。經過一系列的攪拌、離心、清洗工作之后,對得到的沉淀物質再加入不同濃度的胃蛋白酶乙酸溶液進行攪拌、離心操作。最終得到了相應的鮑魚肌肉膠原蛋白。
在完成鮑魚肌肉膠原蛋白的提取工作之后,為了確保膠原蛋白不受外界環(huán)境的污染需要在真空環(huán)境中利用一定濃度的鹽酸溶液進行水解,然后再利用相應的氨基酸分析儀器來測定出膠原蛋白內氨基酸的具體組成成分。同時對提取出的鮑魚肌肉膠原蛋白樣品進行紫外吸收光譜的測定工作。在這個測定過程中要按照一定的比例,在膠原蛋白樣品中加入一定量的乙酸溶液,同時為了確保測定工作的精確性,需要再取一定量的乙酸溶液進行對比。然后利用相應的光度計對調制完成的膠原蛋白樣品以及乙酸對比溶液分別進行掃描,根據具體的數據來確定膠原蛋白的紫外吸收光譜。同時在分析膠原蛋白的粘度特性的過程中,首先還是要根據一定的比例在提取出的膠原蛋白樣品中加入一定量的乙酸溶液,配制成特定濃度的溶液。然后利用相應的粘度計對該溶液進行測試,同時根據具體的計算方法進行計算最終得出鮑魚肌肉膠原蛋白的粘度特性。
在分析鮑魚肌肉膠原蛋白溶解性的過程中,需要考慮溶液酸堿性以及氯化鈉的影響。首先在判斷酸堿度影響的過程中,需要按照一定的比例在提取出的膠原蛋白樣品中加入一定量的乙酸溶液,然后在向配制完成的溶液中加入一定量的氫氧化鈉配制成不同酸堿度的溶液,然后再利用相應的計算公式得出膠原蛋白的溶解度。在判斷氯化鈉影響的過程中,也是按照一定的比例加入相應的乙酸溶液進行配制,在配制完成的溶液中加入一定的氯化鈉溶液進行調節(jié),在最終得到的溶液中測定出蛋白的含量,然后利用相應的計算方法得出不同氯化鈉濃度下膠原蛋白的溶解度。
三、鮑魚肌肉膠原蛋白的實驗結果以及分析
通過上述實驗結果我們發(fā)現在鮑魚肌肉提取出的兩種酶溶性膠原蛋白中,其中酶溶性膠原蛋白的提取率要明顯高于酸溶性膠原蛋白的提取率。造成這種現象的主要原因就是鮑魚肌肉膠原蛋白不容易在乙酸中溶解。只有在鮑魚肌肉膠原蛋白中加入胃蛋白酶后在乙酸溶液中才容易被溶解掉。同時通過實驗數據分析,發(fā)現在鮑魚肌肉膠原蛋白中的兩種酶溶性膠原蛋白中甘氨酸的含量都非常高,能夠占到鮑魚肌肉膠原蛋白中氨基酸總量的三分之一左右。
同時在鮑魚肌肉膠原蛋白紫外吸收光譜的實驗過程中,發(fā)現在鮑魚肌肉膠原蛋白中的兩種酶溶性膠原蛋白中都存在一個吸收波峰。通過對膠原蛋白粘度的實驗過程,可以發(fā)現鮑魚肌肉蛋白中兩種酶溶性膠原蛋白在溫度超過一定范圍之后,其黏度就會出現下降的趨勢,其中酶溶性膠原蛋白的溫度范圍要低于酸溶性膠原蛋白的范圍。而在膠原蛋白中加入一定的胃蛋白酶之后,酶溶性膠原蛋白的粘度在溫度升高的過程中會出現明顯下降的現象。在進行分析膠原蛋白溶解度的實驗過程中,通過實驗結果可以發(fā)現鮑魚肌肉膠原蛋白中的酸溶性膠原蛋白在酸堿度為3的時候,膠原蛋白的溶解度將在5%以下,同時隨著酸堿度的上升還會持續(xù)下降。雖然酶溶性膠原蛋白的溶解度趨勢大致和酸溶性膠原蛋白的類似,但是在酸堿度為3的時候,酶溶性膠原蛋白的溶解度要高于酸溶性膠原蛋白。同時隨著向膠原蛋白中加入一定量的胃蛋白酶,酶溶性膠原蛋白的溶解度也會明顯提高。
四、結語
本篇文章通過對鮑魚肌肉膠原蛋白提取的實驗過程進行敘述,通過相關實驗數據的分析,可以判斷出鮑魚肌肉中膠原蛋白的氨基酸的組成成分,以及膠原蛋白的紫外吸收光譜、粘度特性以及溶解性等具體數據。同時希望本次實驗所得到的具體數據能為將來對鮑魚肌肉膠原蛋白的研究工作提供一定的借鑒作用。
參考文獻:
[1]蔡汝政,陳文,王湘君,呂曉通,錢明,林栩.柱前衍生法測定鮑魚中氨基酸含量研究綜述[J].內江科技,2019,40(01):100-101.
[2]游銀川,張凌晶,顏龍杰,翁凌,劉光明,曹敏杰.皺紋盤鮑副肌球蛋白的分離純化及初步性質研究[J].水產學報,2017,41(06):836-844.
[3]游銀川,麻金花,段雪昆,章騫,沈建東,劉光明,曹敏杰.皺紋盤鮑酶促溶性膠原蛋白的性質研究及抗體制備[J].水產學報,2016,40(02):267-277.