遲富彬
(荊楚理工學(xué)院,湖北荊門(mén) 448000)
一些藥物自身就存在著可以吸收紫外光以及可見(jiàn)光的基團(tuán),基于有效的溶劑作為吸收光譜。當(dāng)其吸收峰點(diǎn)位的溶劑和其他干擾項(xiàng)的吸收較大,該情況下則可以直接開(kāi)展有關(guān)藥物的檢測(cè)工作。比如,針對(duì)布洛芬,則可以直接于乙醇試劑中,在291nm點(diǎn)位實(shí)時(shí)直接測(cè)定;煙酸則在氫氧化鈉試劑內(nèi)262.5nm點(diǎn)位有著較高的吸收性,支持降脂口服液方面的檢測(cè)。相較于其他檢測(cè)方法,直接UV-Vis法的可操作性更強(qiáng),而因?yàn)榻^大多數(shù)藥物內(nèi)其他組分對(duì)檢測(cè)的關(guān)鍵成分均會(huì)導(dǎo)致一定的干擾,從而使得直接UV-Vis法實(shí)際應(yīng)用占比并不高。
部分藥物能夠與特殊的顯色劑發(fā)生反應(yīng)從而實(shí)現(xiàn)著色,由此如若可以得到合適的顯色劑,并且保證其專(zhuān)一性,則勢(shì)必可以很好地規(guī)避其他雜質(zhì)等的影響,從而對(duì)目標(biāo)成分進(jìn)行鑒定??梢?jiàn)區(qū),顯色反應(yīng)關(guān)系到離子締合反應(yīng)以及氧化還原等多個(gè)顯色反應(yīng)樣式。對(duì)于布洛芬,當(dāng)其在酸堿度為5.5的醋酸環(huán)境中,能夠與Cu(AC)2反應(yīng)從而得到二價(jià)銅離子與布洛芬的締合物,選擇CHCl3對(duì)其進(jìn)行提取則可以在675nm環(huán)境下得到其吸光度,由此可以實(shí)現(xiàn)間接地對(duì)布洛芬的測(cè)定。除此之外,安乃近在高溫80℃的環(huán)境下可以把磷鉬酸進(jìn)一步還原成磷鉬藍(lán),在700nm存在最大吸收,基于該辦法可以很好地識(shí)別出安乃近的具體含量。再比如,半夏藥物首先在超聲波技術(shù)原理以及酸性燃料比色機(jī)制,在5.4的酸堿度環(huán)境下添加0.1的溴麝香草酚藍(lán)試劑,則可以在416nm的環(huán)境下定量的分析得到其總生物堿的具體占比情況。
大多數(shù)的藥物成分均比較復(fù)雜,而共存成分可能對(duì)直接UV-Vis法帶來(lái)一定的干擾。以往形式的UV-Vis法為了規(guī)避該弊端,往往把部分分離技術(shù)與其相結(jié)合來(lái)開(kāi)展測(cè)定。例如青霉素烷砜酸鈉融于氫氧化鈉十幾種,在37℃的環(huán)境下靜止15min再開(kāi)始監(jiān)測(cè);又比如,利用在乙醇內(nèi)提取藥物,醋酸乙酯進(jìn)行萃取,聚酞胺柱層析分離,并在360nm的環(huán)境下定量分析得到高良姜內(nèi)的黃銅占比情況。
為了規(guī)避分離導(dǎo)致流程復(fù)雜度增加,同時(shí)提升對(duì)共存組分以及雜質(zhì)等干擾防范,近些年許多業(yè)內(nèi)人士開(kāi)始嘗試新的策略與方法,比如,針對(duì)感冒通片內(nèi)部存在的人工牛黃,其他成分等則主要基于一階導(dǎo)數(shù)分光度法的辦法進(jìn)行檢測(cè),定量分析其內(nèi)部的氯苯那敏等,不僅可以規(guī)避其他組分等的影響,同時(shí)回收效率大大提升,可行性更為簡(jiǎn)便;而基于二階導(dǎo)數(shù)的UV-Vis法則可以較好地定量分析得到硫酸阿托品注射液,基于三波長(zhǎng)吸光度比值策略,可以在不分離的情況下直接得到氫氯噻嗪以及賴(lài)諾普利等的具體占比情況。
UV-Vis法的靈敏度更高,不僅可以定量分析得到常量組的各個(gè)成分占比,此外也可以進(jìn)行微量組分以及多組分混合物的檢測(cè)工作。實(shí)際藥物分析期間,主要開(kāi)展原料成分占比檢測(cè)、制劑充分占比以及溶出度的檢測(cè)等。
朗伯比爾定律即為UV-Vis法檢測(cè)的根本依據(jù),其主要內(nèi)容為,單色光輻射透過(guò)目標(biāo)溶液情況下,在特定的濃度區(qū)間內(nèi),物質(zhì)吸收的情況以及物質(zhì)濃度情況和液層的厚度情況之間呈正相關(guān)關(guān)系。即
式中,A、C、T分別指代吸光度、透射比以及吸光物質(zhì)的濃度。
檢測(cè)期間,處理特定的要求之外,應(yīng)當(dāng)配以供試品溶液的一個(gè)批次的溶劑作為對(duì)照,基于1cm的石英對(duì)玻璃吸收池進(jìn)行吸收,將波長(zhǎng)最高的視為檢測(cè)到的波長(zhǎng)。通常,該數(shù)值會(huì)存在0.3~0.7的誤差情況。
主要表示基于待測(cè)物的系數(shù)吸收以及檢測(cè)到的難度情況下的吸光度對(duì)比從而分析得到其具體的含量情況,由此也被稱(chēng)為絕對(duì)法。目前,該策略在實(shí)際應(yīng)用中較為普遍?;谠摬呗栽跈z測(cè)期間,吸收系數(shù)往往高于100。
對(duì)于少數(shù)的個(gè)別雜質(zhì)也可以基于UV-Vis法進(jìn)行檢測(cè),例如針對(duì)藥物溶液顏色就是基于對(duì)藥物生產(chǎn)期間以及存儲(chǔ)期間所生成的有色雜質(zhì)。UV-Vis法則主要基于對(duì)溶液內(nèi)的吸光度檢測(cè),分析其內(nèi)部的有色雜質(zhì)的限量情況。例如,針對(duì)維生素C極易受到外界的影響而出現(xiàn)變色情況,可以選擇該樣品3g,并將其放置于15mL,待振動(dòng)搖晃均勻之后將其放置于特制的漏斗內(nèi)進(jìn)行過(guò)濾作業(yè),將最后得到的濾液放置在420nm的波長(zhǎng)環(huán)境下檢測(cè)其吸光度,不高于0.03。
針對(duì)藥物內(nèi)特殊雜質(zhì)的檢測(cè),絕大多數(shù)環(huán)境下主要采用UV-Vis法。其主要原理為,通過(guò)檢測(cè)分析得到其內(nèi)部雜質(zhì)的吸光度情況,基于藥品無(wú)吸收以及雜質(zhì)可以吸收的波長(zhǎng)點(diǎn)測(cè)得吸光度情況,規(guī)定實(shí)際測(cè)得的吸光度不當(dāng)大于某具體閾值?;趯?duì)雜質(zhì)吸光度的大小檢測(cè),了解雜質(zhì)的限量情況。例如,腎上腺素中的腺酮情況的檢測(cè),腺酮處于310nm條件下會(huì)存在吸收情況,但此時(shí)腎上腺素卻不會(huì)發(fā)生吸收情況。結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)資料操作規(guī)范,選擇樣品并添加至鹽酸中從而得到2mg/mL的溶液,并于310nm的波長(zhǎng)條件下進(jìn)行加測(cè),實(shí)際吸光度不高于0.05,則腺酮的限量即等于0.06%。又比如,鹽酸苯海索內(nèi)的哌丁苯丙酮的檢測(cè)等情況,均可以利用UV-Vis法對(duì)其雜質(zhì)進(jìn)行有效的檢測(cè)。
部分雜質(zhì)的吸光度和藥物的吸光度在一些波長(zhǎng)環(huán)境下可能存在重合情況,通過(guò)轉(zhuǎn)變藥物在特定的波長(zhǎng)處的吸光度比值,基于對(duì)供試品溶液內(nèi)的吸光度的比值情況來(lái)管控其雜質(zhì)的限量情況。典型的碘解磷定注射液內(nèi)分解的產(chǎn)物檢測(cè)即為該情況。
相較于其他藥物分析方式,UV-Vis法的可操作性更強(qiáng)、投入也不高,由此深受業(yè)內(nèi)的青睞,是目前應(yīng)用最為廣泛的藥物分析技術(shù)之一。在未來(lái)幾年,該技術(shù)的應(yīng)用占比依然會(huì)比較高。隨著分析試劑技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,特別是氯冉酸等顯示劑技術(shù)的發(fā)展,將勢(shì)必進(jìn)一步推動(dòng)UV-Vis法的飛速發(fā)展。而包括可調(diào)諧染料激光設(shè)備的技術(shù)成熟與應(yīng)用,光聲光譜技術(shù)逐漸普及開(kāi)來(lái),并在生物試樣研究以及藥物、化妝品分析等方面得到了廣泛使用。化學(xué)計(jì)量有關(guān)研究的不斷成熟,將其和藥物光度分析相融合,則是未來(lái)有效應(yīng)對(duì)對(duì)組分檢測(cè)和中藥等繁瑣樣品快速檢測(cè)的重要策略。
針對(duì)藥物品質(zhì)的檢測(cè)與管控、生物體液相關(guān)藥物的檢測(cè)和藥代動(dòng)力學(xué)的研究等方面,藥物分析有著至關(guān)重要的作用。相當(dāng)一部分的藥物內(nèi)含有吸收紫外光以及可見(jiàn)光的基團(tuán)等,抑或者該類(lèi)基團(tuán)可以和某些特定的試劑以及離子等發(fā)生反應(yīng),從而出現(xiàn)特有的顏色情況,繼而可以被檢測(cè)得到,所以UVVis法在藥物分析方面得到了廣泛的應(yīng)用。本文就UV-Vis法當(dāng)前使用現(xiàn)狀進(jìn)行綜述,并深入分析了UV-Vis法具體應(yīng)用過(guò)程,對(duì)其未來(lái)發(fā)展進(jìn)行展望。相信未來(lái)隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,生活質(zhì)量的提升,UV-Vis法在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用也將更為普遍,受到更多的青睞。