GC-MS對(duì)廣西不同產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油化學(xué)成分的分析

梁爽 盧森華 吳秀彩 何麗紅 黃健軍

摘要：用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）分析和比較不同產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油的化學(xué)成分。結(jié)果表明，廣西南寧賓陽(yáng)縣產(chǎn)扶芳藤分離出25個(gè)色譜峰，鑒定出13種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的98.24%。廣西柳州融安縣產(chǎn)扶芳藤分離出29個(gè)色譜峰，鑒定出14種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的89.96%。廣西梧州蒙山縣產(chǎn)老扶芳藤分離出32個(gè)色譜峰，鑒定出12種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的92.16%，廣西玉林容縣產(chǎn)老扶芳藤分離出28個(gè)色譜峰，鑒定出11種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的84.79%。4個(gè)產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油化學(xué)成分中，有5種成分是它們的共有成分，分別是葉綠醇、棕櫚酸、壬烷、異丙苯、六氫法尼基丙酮，可見(jiàn)不同產(chǎn)地?fù)]發(fā)油的主要成分存在差異。該方法結(jié)果準(zhǔn)確可靠，為合理利用扶芳藤植物資源及其深度研究開(kāi)發(fā)提供了試驗(yàn)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：扶芳藤;揮發(fā)油;GC-MS;廣西

中圖分類號(hào)：O657.7+2;S567.23+9?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2020）07-0191-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.07.039

Abstract： The chemical constituents of the essential oil of Euonymus fortune from different areas were compared and analyzed by GC-MS. The results showed that 25 chromatographic peaks were isolated and 13 chemical constituents were identified in Binyang village，accounting for 98.24% of the total volatile oil. 29 chromatographic peaks were isolated from Rong village，and 14 chemical constituents were identified，accounting for 89.96% of the total volatile oil. 32 chromatographic peaks were isolated from Mengshan village，and 12 chemical constituents were identified，accounting for 92.16% of the total volatile oil. 28 chromatographic peaks were isolated from Rong village，and 11 chemical constituents were identified，accounting for 84.79% of the total volatile oil. Five of the chemical constituents of the volatile oil from the three places of origin are common to the four. They are phytol，palmitic acid，n-nonane，cumene，hexahydrofarnesyl acetone. It can be seen that the main components of volatile oil from different producing areas are different.

Key words： Euonymus fortune; volatile oils; GC-MS; Guangxi

扶芳藤（Euonymus fortune）為衛(wèi)矛科植物爬行衛(wèi)矛的干燥地上部分，為廣西壯、瑤民族常用藥材。性味辛、平，具有行氣活血、舒經(jīng)活絡(luò)、補(bǔ)肝腎、止血等功效，常用于治療腰肌勞損、風(fēng)濕痹痛、血崩、咯血、月經(jīng)不調(diào)、跌打骨折、創(chuàng)傷出血等[1，2]。在臨床上，扶芳藤可用于治療神經(jīng)衰弱、慢性心力衰竭、慢性前列腺炎及慢性咽炎、心絞痛等[3-10]。扶芳藤主要化學(xué)成分有黃酮類、五環(huán)三萜類、糖醇類、酚酸類及甾體類等[11-18]。扶芳藤有止血作用[19-21]、抗心肌缺氧和對(duì)心腦血管的作用[22-26]、抗衰老作用及提高機(jī)體免疫能力[26，27]、糾正心肌缺氧[28-31]、殺蟲作用等[32]。目前，關(guān)于不同產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油的成分及其相對(duì)含量的比較研究報(bào)道較少。因此，本研究采用水蒸氣蒸餾法提取扶芳藤揮發(fā)油，并通過(guò)GC-MS技術(shù)分別測(cè)定廣西南寧賓陽(yáng)縣、柳州融安縣、梧州蒙山縣、玉林容縣4個(gè)不同產(chǎn)地扶芳藤全草揮發(fā)油的成分，對(duì)不同產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油的共有化學(xué)成分進(jìn)行分析、比較，探討產(chǎn)地對(duì)扶芳藤揮發(fā)油成分及其含量的影響，為該藥材的臨床應(yīng)用、質(zhì)量控制、資源開(kāi)發(fā)利用等方面提供理論依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料

扶芳藤經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)滕建北教授鑒定為衛(wèi)矛科衛(wèi)矛屬植物扶芳藤全草，具體信息見(jiàn)表1。

1.2?儀器與試劑

Agilent 7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫科技有限公司）;DB-1MS型石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;揮發(fā)油提取器;ML3002型電子分析天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]。

無(wú)水硫酸鈉（分析純，廣東光華科技股份有限公司），乙酸乙酯（色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），水為純凈水。

1.3?方法

1.3.1?揮發(fā)油的提取?稱取已粉碎至20目的扶芳藤藥材粉末約150 g，置于2 000 mL圓底燒瓶中，加10倍量蒸餾水，浸泡1 h后，連接揮發(fā)油提取器與回流冷凝管，按2015年版《中國(guó)藥典》一部附錄方法（不加二甲苯）進(jìn)行水蒸氣蒸餾，至餾出液無(wú)油珠止（約6 h），得到有特殊香味的淡黃色油狀物，用乙酸乙酯溶解并收集，以無(wú)水硫酸鈉干燥，置于冰箱密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2?樣品處理?取1 mL揮發(fā)油的乙酸乙酯溶液于離心管中，加入適量無(wú)水硫酸鈉脫水，以1 000 r/min離心20 min，取上清液為供試品溶液。

1.3.3?氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件

1）色譜條件。石英毛細(xì)管柱DB-1MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），程序升溫，起始溫度50 ℃，保持1 min，以5 ℃/min升至250 ℃，保持5 min。載氣為He（≥99.99%），柱流量為1.0 mL/min，進(jìn)樣口溫度為250 ℃，分流比為20∶1，進(jìn)樣量為1 μL，溶劑延遲3.0 min。

2）質(zhì)譜條件。EI源，電子能量為70 eV，離子源溫度為220 ℃，四級(jí)桿溫度150 ℃，質(zhì)譜接口溫度280 ℃，全掃描（Scan）采集模式，質(zhì)量范圍50～500 amu，掃描間隔0.2 s。

1.3.4?測(cè)量?取“1.3.2”項(xiàng)下樣品，加乙酸乙酯稀釋，用無(wú)水硫酸鈉脫水，0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾，按“1.3.3”色譜條件分析，測(cè)定扶芳藤揮發(fā)油的總離子流，并通過(guò)Nist.08質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索，確定各色譜峰代表的化學(xué)成分。

1.3.5?數(shù)據(jù)處理?GC-MS分析結(jié)果所得的色譜和質(zhì)譜信息經(jīng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)與其內(nèi)存譜庫(kù)（Nist.08）自動(dòng)檢索和解析，并用峰面積歸一法測(cè)定各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量。

2?結(jié)果與分析

將4個(gè)產(chǎn)地所提取的扶芳藤揮發(fā)油分別按照上述試驗(yàn)條件進(jìn)行GC-MS分析，測(cè)得總離子流后，結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)（Nist 02和Wiley 275）檢索，同時(shí)用峰面積歸一法確定樣品中各組分的相對(duì)含量。揮發(fā)油總離子流色譜見(jiàn)圖1、圖2、圖3、圖4，其成分分析結(jié)果見(jiàn)表1、表2，表3、表4。南寧賓陽(yáng)縣產(chǎn)扶芳藤分離出25個(gè)色譜峰，鑒定出13種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的98.24%，其主要成分有葉綠醇（74.49%）、棕櫚酸（14.29%）、異丙苯（2.90%）、壬烷（1.36%）等。廣西柳州融安縣產(chǎn)扶芳藤分離出29個(gè)色譜峰，鑒定出14種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的89.96%，其主要成分有棕櫚酸（44.36%）、葉綠醇（19.98%）、α-亞麻酸（14.38%）等。廣西梧州蒙山縣產(chǎn)老扶芳藤分離出32個(gè)色譜峰，鑒定出12種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的92.16%，其主要成分有葉綠醇（72.83%）、棕櫚酸（7.92%）、異丙苯（2.89%）、壬烷（1.25%）等。廣西玉林容縣產(chǎn)老扶芳藤分離出28個(gè)色譜峰，鑒定出11種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的84.79%，其主要成分有葉綠醇（53.35%）、棕櫚酸（19.31%）、異丙苯（3.42%）、壬烷（1.59%）等。在4個(gè)產(chǎn)地扶芳藤葉揮發(fā)油化學(xué)成分中，有5種成分是它們的共有成分，分別是葉綠醇、棕櫚酸、壬烷、異丙苯、六氫法尼基丙酮（表5）。

3?結(jié)論

不同產(chǎn)地扶芳藤揮發(fā)油的化學(xué)成分在種類和含量上具有一定的差異，這可能是環(huán)境差異造成的。扶芳藤化學(xué)成分的種類和含量及特征成分的差異，可能會(huì)對(duì)藥理藥效等方面造成影響。本研究結(jié)果對(duì)扶芳藤的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局. 中華本草[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社 1995.

[2] 廣東省食品藥品監(jiān)督管理局. 廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)[M]. 廣州：廣東科技出版社，2004.

[3] 田元春，馬儒清，伍小燕，等. 復(fù)方扶芳藤合劑免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 廣西中醫(yī)藥，2010，33（2）：57-59.

[4] 周智韋，奇志吳，吳植強(qiáng)，等. 扶芳藤一般藥理及急性毒性研究[J]. 中國(guó)藥師，2011，14（8）：1115-1117.

[5] 陳博靈，李成林，潘朝鋅，等. 扶芳藤益心方治療氣虛血瘀型胸痹的療效觀察[J]. 廣西中醫(yī)藥，2014，37（4）：19-21.

[6] 但旭輝，鄧家剛，吳玉強(qiáng)，等. 復(fù)方扶芳藤合劑對(duì)大鼠血栓形成和血液流變學(xué)的影響[J]. 廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，14（4）：39-42.

[7] 程勝軍，李志英，阮威君，等. 復(fù)方扶芳藤合劑對(duì)心衰患者的心功能及生活質(zhì)量的影響[J]. 華夏醫(yī)學(xué)，2014，27（4）：14-17.

[8] 張?穎，周倍伊. 復(fù)方扶芳藤合劑含藥血清對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Notch信號(hào)通路的影響[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（18）：206-210.

[9] ZHU J B，WANG M G，WU W J，et al. Insecticidal sesquiterpene pyridine alkaloids from Euonymus species[J]. Phytochemistry，2002，61：699-704.

[10] 李成林，王慶高，朱?智，等. 壯藥扶芳藤對(duì)兔心肌缺血再灌注損傷誘發(fā)心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[J]. 遼寧中醫(yī)雜志，2009，36（11）：1989-1991.

[11] YANG Y D，YANG G Z，LIAO M C，et al. Three new sesquiterpene pyridine alkaloids from Euonymus fortunei[J]. Helv Chim Acta，2011，94（6）：1139.

[12] 朱?輝. 扶芳藤的化學(xué)成分研究[D]. 南昌：江西中醫(yī)學(xué)院，2012.

[13] 李?鵬，李?航. 扶芳藤中的三萜化合物研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2000，35（12）：57-58.

[14] 楊穎達(dá). 扶芳藤化學(xué)成分研究[D]. 武漢：中南民族大學(xué)，2010.

[15] 瞿發(fā)林，丁青龍，張漢民. 扶芳藤化學(xué)成分研究（Ⅱ）[J]. 西南國(guó)防醫(yī)藥，2002，12（4）：349-351.

[16] OUYANG X L，WEI L X，F(xiàn)ANG X M，et al. Flavonoid constituents of euonymus fortunei[J]. Chem Nat Compd，2013，49（3）：428.

[17] 賴紅芳，吳志鴻. 微波提取扶芳藤多糖的工藝研究[J]. 中藥材 2009，32（2）：287-290.

[18] 賴紅芳，韋瑞松，黃秀香. 扶芳藤多酚的微波輔助提取和含量測(cè)定[J]. 河池學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，28（5）：109-111.

[19] 周?智，韋奇志，吳植強(qiáng)，等. 扶芳藤對(duì)血液流變學(xué)及凝血功能影響的研究[J]. 廣西醫(yī)學(xué)院，2011，33（7）：810.

[20] 伍小燕，黃瑩娟. 扶芳藤對(duì)血栓形成及凝血系統(tǒng)的影響[J]. 西北藥學(xué)雜志，1997，12（1）：19.

[21] 方顯明，蒙?定，水王勤，等. 白背葉合劑治療急性上消化道出血的臨床觀察和實(shí)驗(yàn)研究（30例對(duì)照分析）[J]. 廣西中醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1989，12（5）：1.

[22] LIU Z L，JIA Z J，TIAN X，et al. Six new sesquiterpenes from Euonymusnanoides and their antitumor effects[J]. Planta Med，2004，70（4）：353.

[23] 謝金鮮，林啟云，班步陽(yáng). 扶芳藤對(duì)心血管作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 廣西中醫(yī)藥，1999，22（5）：51.

[24] 李成林，王慶高，崔勝利. 扶芳藤對(duì)兔心肌缺血再灌注損傷血清SOD、MDA的影響[J]. 廣西中醫(yī)藥，2011，24（2）：55-57.

[25] 肖艷芬，肖?健，王?坤，等. 扶芳藤提取物對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注IL-1β與TNF-α的影響研究[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2011，22（2）：404.

[26] 李?靈，羅佩卓，周麗霞，等. 扶芳藤及其合劑在大鼠腦缺血再灌注損傷后的抗氧化作用[J]. 中國(guó)臨床康復(fù)，2004，8（28）：6258.

[27] 朱紅梅，鐘?鳴，黃琳蕓，等. 扶芳藤及其提取物有關(guān)藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥科技，2000，7（3）：170.

[28] 黃紅英. 百年樂(lè)延緩衰老作用的研究[J]. 中成藥，1994，16（7）：39.

[29] 朱智德，韋?斌，盧健棋，等. 復(fù)方扶芳藤合劑對(duì)兔病態(tài)竇房結(jié)綜合征心率及竇房結(jié)電生理的影響[J]. 廣西中醫(yī)藥報(bào)，2013，36（6）：73-75.

[30] 朱智德，盧健棋，韋?斌，等. 扶芳藤合劑對(duì)兔病態(tài)竇房結(jié)綜合征Cx45、Cx43及Cx40蛋白表達(dá)的影響[J]. 中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2013，11（12）：1490-1492.

[31] 王慶高，盧健棋，朱智德，等. 扶芳藤丹參合劑預(yù)處理通過(guò)JAK/STAT通路干預(yù)心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的研究[J]. 新中醫(yī)，2013，45（12）：167-170.

[32] 張啟東，王明安，姬志勤，等. 冬青衛(wèi)矛的大環(huán)生物堿分離鑒定及其殺蟲活性研究[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（25）：983.