江 可 ,肖夢(mèng)萍 ,陳明輝 ,翟志軍 ,周健平 ,劉祈猛 ,宋海燕 ,胡殿明 **
(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌工程技術(shù)研究中心,江西南昌330045;2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院,江西南昌330045;3.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 作物生理生態(tài)與遺傳育種教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌330045)
秀珍菇(Pleurotus geesterani Singer)又名珍珠菇,隸屬擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes) 傘菌目(Agaricales) 側(cè)耳科 (Pleurotceae) 側(cè)耳屬 (Pleurotus)[1]。秀珍菇味道鮮美、清脆可口,富含蛋白質(zhì)、纖維素、微量元素、多糖和黃酮等物質(zhì)[2]。秀珍菇子實(shí)體中的真菌多糖具有較高的抗腫瘤和抗氧化作用[3-4],孫玉軍等[5]發(fā)現(xiàn)秀珍菇多糖能保護(hù)D-半乳糖致衰的小鼠肝臟、大腦,推斷秀珍菇多糖能提高機(jī)體抗氧化能力、增強(qiáng)免疫功能。
秀珍菇是木腐菌,對(duì)纖維素、半纖維素和木質(zhì)素具有很強(qiáng)的降解能力[6]。目前,秀珍菇實(shí)際生產(chǎn)中常用主料為棉籽殼和木屑。隨著近幾年秀珍菇栽培規(guī)模擴(kuò)大,生產(chǎn)原料的需求量也逐年上升。但自2008年起,全國(guó)棉花種植面積逐年減少[7],傳統(tǒng)栽培原料棉籽殼供不應(yīng)求,南方非產(chǎn)棉區(qū)棉籽殼價(jià)格大幅上升,秀珍菇栽培成本大幅度攀升;而大量砍伐林木獲取木屑,也不符合可持續(xù)生態(tài)發(fā)展理念。因此,原料短缺、價(jià)格攀升已經(jīng)成為制約秀珍菇產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸之一[8]。
為緩解秀珍菇栽培料短缺的困境,研發(fā)新型秀珍菇栽培基質(zhì)勢(shì)在必行。因此,鄧玲姣等[9]利用南方地區(qū)的優(yōu)勢(shì)資源木薯?xiàng)U屑、木薯皮、桑枝屑、甘蔗渣等混合棉籽殼栽培秀珍菇,發(fā)現(xiàn)木薯?xiàng)U屑、甘蔗渣適宜秀珍菇栽培,最高生物學(xué)效率達(dá)到64.70%。
Chen等[10]利用沼氣池中浸泡后的水葫蘆替代鋸木屑栽培秀珍菇,其替代38%的鋸木屑栽培效果最佳,生物學(xué)效率達(dá)到106.63%。
Wang等[11]利用蘆筍桿栽培秀珍菇,子實(shí)體平均質(zhì)量為232 g/袋,生物學(xué)效率達(dá)到66.3%。上述報(bào)道研究的培養(yǎng)料均能栽培秀珍菇,但均為地方特有農(nóng)作物副產(chǎn)物,不適合大面積推廣。而研究選取油菜秸稈、蓮子殼和谷殼等南方主要栽培農(nóng)業(yè)廢棄物為主料栽培秀珍菇,以提供一種獲取簡(jiǎn)便、產(chǎn)量高的新型秀珍菇栽培基質(zhì),可緩解秀珍菇栽培原料短缺、成本高的問(wèn)題。
油菜秸稈、蓮子殼和谷殼是我國(guó)南方常見(jiàn)農(nóng)作物副產(chǎn)物,富含栽培秀珍菇所需的碳源和氮源。其中,油菜秸稈和谷殼含有豐富的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[12-13],蓮子殼主要成分為纖維素和淀粉[14],能提供食用菌生長(zhǎng)發(fā)育所需的能源物質(zhì)。3種農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物取材簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、種植面積廣,2015 年全國(guó)油菜種植面積約 7.5× 106hm2,水稻 3.0×107hm2;蓮子僅江西省播種面積就達(dá)到1.5×104hm2[7]。雖然3種農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物產(chǎn)量高,但難以直接利用,其目前主要的處理方式為焚燒、填埋等,容易造成環(huán)境污染,破壞生態(tài)環(huán)境[15]。本實(shí)驗(yàn)室對(duì)農(nóng)作物菌業(yè)化循環(huán)利用進(jìn)行了持續(xù)研究,通過(guò)對(duì)以上3種原料進(jìn)行了多種食用菌的栽培試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)不同食用菌對(duì)3種原料的轉(zhuǎn)化率有很大差別[16-18]。因此,綜合選擇油菜秸稈、蓮子殼和谷殼為主料,栽培秀珍菇,以進(jìn)一步探索菌業(yè)化循環(huán)利用農(nóng)作物副產(chǎn)物的新途徑。
試驗(yàn)使用秀珍菇菌種來(lái)源于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)菌種保藏中心(JAUCC),菌株號(hào)為JAUCC1246。菌種首先進(jìn)行PDA平板擴(kuò)培,后轉(zhuǎn)接至液體培養(yǎng)基(土豆200 g、葡萄糖 20 g,蛋白胨 1.5 g、KH2PO43.0 g、MgSO41.5 g,水 1 000 mL),160 r·min-1,28℃條件下培養(yǎng) 7 d~10 d。
試驗(yàn)以棉籽殼配方為對(duì)照,油菜秸稈、蓮子殼和谷殼按照不同的比例與棉籽殼混合,共設(shè)置了6個(gè)栽培料配方,每種配方制作10個(gè)菌包,具體配方見(jiàn)表1。
表1 秀珍菇栽培配方Tab.1 The formula of Pleurotus geesterani cultivation
利用粉碎機(jī)將油菜秸稈粉碎成顆粒,蓮子殼清水浸泡24 h,撈出、晾干表面水分。按表1配方中的質(zhì)量百分比,稱取各原料,加水?dāng)嚢杈鶆?,基質(zhì)含水量約65%,平均分裝于規(guī)格14 cm×28 cm的聚丙烯菌袋中(平均干料質(zhì)量,CK:363.6 g;配方1:230.8 g;配方 2:200.0 g;配方 3:300.0 g;配方4:300.0 g;配方 5:250.0 g;配方 6:250.0 g),121℃滅菌100 min。
菌包滅菌結(jié)束,冷卻至室溫即可進(jìn)行接種,每個(gè)菌包接種20?!?0粒菌絲球。接種完成后將菌包轉(zhuǎn)移至26℃養(yǎng)菌室,避光培養(yǎng)。
待菌絲生長(zhǎng)穩(wěn)定,每個(gè)菌包以接種點(diǎn)為圓心,設(shè)置2條垂直的直徑線,分別測(cè)量4條線上菌絲生長(zhǎng)1周的長(zhǎng)度,同時(shí)記錄菌絲的農(nóng)藝性狀及菌絲萌發(fā)至滿袋的時(shí)間。
菌絲長(zhǎng)滿菌袋后,轉(zhuǎn)移至出菇室進(jìn)行催蕾,出菇溫度為13℃~18℃,空氣濕度85%~90%,孢子未彈射前適時(shí)采摘,分別記錄每一袋菌包重量,只采集前三茬子實(shí)體用于稱重及子實(shí)體農(nóng)藝性狀測(cè)量。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2007進(jìn)行整理,DPS 7.05和LSD法進(jìn)行方差分析。秀珍菇平均生物學(xué)效率(BE,%)的計(jì)算公式為:
式中:Ffw為秀珍菇子實(shí)體鮮重(g);Sdw為基質(zhì)干重 (g)。
以油菜秸稈、蓮子殼作為秀珍菇栽培料,對(duì)菌絲濃密度和性狀未有影響,菌絲長(zhǎng)滿菌袋的時(shí)間比對(duì)照配方提前1 d~2 d。隨著配方中谷殼用量的增加,菌絲由濃密、粗壯逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)橄∈琛⒓?xì)弱,菌絲長(zhǎng)滿菌袋時(shí)間也是相應(yīng)的推遲3 d~5 d。秀珍菇菌絲生長(zhǎng)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。
表2 秀珍菇菌絲生長(zhǎng)數(shù)據(jù)Tab.2 The growth data of Pleurotus geesterani
由表2可知,以蓮子殼為主料的栽培配方,秀珍菇菌絲生長(zhǎng)速度高于對(duì)照;配方4菌絲平均生長(zhǎng)速度最快,達(dá) 0.60 cm·d-1,高于對(duì)照 0.15 cm·d-1。配方3次之,菌絲平均生長(zhǎng)速度為0.55 cm·d-1,比對(duì)照配方快0.10 cm·d-1。配方1和配方2兩組菌絲生長(zhǎng)速度相近,分別比對(duì)照配方快0.08 cm·d-1和0.06 cm·d-1。配方5和配方6兩組菌絲生長(zhǎng)速度均比對(duì)照配方慢,菌絲生長(zhǎng)速度分別為0.34 cm·d-1和0.32 cm·d-1。
各試驗(yàn)配方均能成功長(zhǎng)出秀珍菇子實(shí)體,見(jiàn)圖1。不同配方栽培的秀珍菇子實(shí)體農(nóng)藝性狀見(jiàn)表3。
表3 不同配方對(duì)秀珍菇農(nóng)藝性狀的影響Tab.3 The effects of different formulations on agronomic characters of Pleurotus geesterani
由圖1、表3可知,棉籽殼、油菜秸稈和蓮子殼生產(chǎn)的秀珍菇菌蓋大小差異不顯著。隨著油菜秸稈用量增加,子實(shí)體菌柄長(zhǎng)度有上升趨勢(shì)。蓮子殼配方生產(chǎn)的秀珍菇菌柄直徑略低于油菜秸稈和棉籽殼。不同配方栽培秀珍菇的產(chǎn)量和生物學(xué)效率統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表4。
表4 不同配方栽培秀珍菇的產(chǎn)量和生物學(xué)效率Tab.4 The yield and biological efficiency of Pleurotus geesterani cultivated with different formulations
由表4可知,試驗(yàn)配方平均生物學(xué)效率皆高于對(duì)照配方(除配方6)。其中,配方2的三茬菇平均質(zhì)量和生物學(xué)效率最佳,三茬菇平均質(zhì)量為144.0 g/袋,平均生物學(xué)效率達(dá)到72%,約為對(duì)照配方的2倍。其次是配方1,三茬菇平均質(zhì)量達(dá)115.8 g/袋,平均生物學(xué)效率為50.2%,比對(duì)照配方提高了13.5%。再者是配方4和配方5,三茬菇平均質(zhì)量分別為144.1 g/袋和122.9 g/袋,平均生物學(xué)效率分別是48.0%和49.2%,高于對(duì)照配方11.3%和12.5%。
比較2、4和6三組配方栽培秀珍菇的效果,可發(fā)現(xiàn)三茬菇平均質(zhì)量,配方2和配方4相等,是配方6的2倍。但分析平均生物學(xué)效率,配方2平均生物學(xué)效率是配方4的1.5倍,是配方6的3.0倍。
秀珍菇菌絲在不同基質(zhì)中生長(zhǎng)速度依次為:蓮子殼>油菜秸稈>棉籽殼>谷殼。添加蓮子殼和油菜秸稈的配方與對(duì)照配方相比,菌絲生長(zhǎng)速度差異顯著。蓮子殼含氮量為4.18%,豐富的氮元素能明顯促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)[19];蓮子殼半球形結(jié)構(gòu)有利于液體菌種的滲透,又能增強(qiáng)空氣流通、提高含氧量。當(dāng)前研究表明[16,18,20],油菜秸稈對(duì)多種食用菌的菌絲生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用,能顯著縮短生產(chǎn)周期。谷殼配方(配方6)秀珍菇菌絲生長(zhǎng)最差,這可能是因?yàn)楣葰の暂^差,菌包滅菌后基質(zhì)表面水分下滲至底部,形成積水,而上層培養(yǎng)料缺水,導(dǎo)致菌絲生長(zhǎng)緩慢。各試驗(yàn)配方(除配方6)子實(shí)體產(chǎn)量與對(duì)照配方相差較小,而生物學(xué)效率高于對(duì)照配方。因此,采用油菜秸稈、蓮子殼和谷殼為秀珍菇栽培基質(zhì),既能緩解秀珍菇栽培基質(zhì)短缺問(wèn)題,又能實(shí)現(xiàn)3種農(nóng)業(yè)廢棄物綠色降解,保護(hù)環(huán)境。當(dāng)前利用農(nóng)林廢棄物栽培秀珍菇的生物學(xué)效率統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表5。
表5 不同配方栽培秀珍菇的生物學(xué)效率Tab.5 Biological efficiency of cultivation of Pleurotus geesterani with different formulations
由表5可知,不同配方栽培秀珍菇的生物學(xué)效率差異很大,最高達(dá)106.33%,最低僅有42.70%。本研究得到的最佳配方,生物學(xué)效率達(dá)72.00%,優(yōu)于表5中多數(shù)配方。Chen等[25-27]選用水葫蘆為主料栽培秀珍菇,生物學(xué)效率高達(dá)106.63%。但水葫蘆對(duì)重金屬的吸附能力很強(qiáng),利用水葫蘆為主料栽培秀珍菇,可能會(huì)增加秀珍菇子實(shí)體中重金屬的含量;而且水葫蘆屬于入侵物種,大規(guī)模栽培會(huì)嚴(yán)重危害水體環(huán)境[28]。曹本雄等[21]利用木薯?xiàng)U屑為主料栽培秀珍菇,最高生物學(xué)效率達(dá)83.80%;吳登等[24]收集桑枝屑栽培秀珍菇,最高生物學(xué)效率為87.99%,均高于本次研究的最佳配方,但原料受產(chǎn)量及種植區(qū)域限制,無(wú)法大規(guī)模推廣。覃寶山等[22]利用板栗苞殼栽培秀珍菇,但其生物學(xué)效率較低,僅有42.70%,遠(yuǎn)低于本研究最佳配方的生物學(xué)效率。鄭向麗等[23]在木屑配方中添加花生秸稈,最高生物學(xué)效率有70.60%,但花生秸稈添加量?jī)H有8%~10%,不能明顯的改善秀珍菇栽培原料使用的狀況。研究獲得的最佳原料油菜秸稈,栽培面積廣、獲取簡(jiǎn)便,生物學(xué)效率較好;且本次栽培原料配方中油菜秸稈含量占75%,若大面積推廣使用可以增加油菜秸稈廢棄物利用率。
綜上所述,油菜秸稈、蓮子殼和谷殼3種基質(zhì)均能成功栽培出秀珍菇子實(shí)體,其中最適合秀珍菇栽培的原料是油菜秸稈,以油菜秸稈栽培的秀珍菇,子實(shí)體產(chǎn)量高、性狀優(yōu)。研究栽培最佳配方為:油菜秸稈75%、麥麩16%、玉米粉5%、石灰2%、石膏2%,三茬菇平均質(zhì)量為144.0 g/袋,平均生物學(xué)效率達(dá)72%。