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    中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2013—2017年細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)

    2020-07-20 09:51:22李艷明簡(jiǎn)子娟鄒明祥劉清霞劉文恩
    中國(guó)感染控制雜志 2020年7期
    關(guān)鍵詞:湘雅醫(yī)院嗜血中南大學(xué)

    李艷明,簡(jiǎn)子娟,鄒明祥,劉清霞,晏 群,劉文恩

    (中南大學(xué)湘雅醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖南 長(zhǎng)沙 410008)

    隨著抗菌藥物的大量使用,細(xì)菌耐藥問(wèn)題日益嚴(yán)峻,已成為全球廣泛關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題。不同地區(qū)不同醫(yī)院抗菌藥物使用不同,不同醫(yī)院分離的主要細(xì)菌不盡相同,細(xì)菌耐藥性也存在很大差異。中南大學(xué)湘雅醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研、健康管理為一體的大型綜合性醫(yī)院,其細(xì)菌耐藥形勢(shì)有其自身的特點(diǎn)。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)細(xì)菌耐藥性的變遷,防止耐藥菌株的暴發(fā)流行十分必要?,F(xiàn)總結(jié)該院2013—2017年細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù),對(duì)檢出的細(xì)菌分布和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析,為醫(yī)院管理部門制定相關(guān)政策和臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 細(xì)菌來(lái)源 收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2013年1月1 日—2017年12月31 日分離的所有需氧菌(厭氧菌、真菌、分枝桿菌除外),剔除同一患者分離的重復(fù)菌株。

    1.1.2 材料 培養(yǎng)基、藥敏紙片及E-test條,哥倫比亞血瓊脂、MAC瓊脂、嗜血桿菌巧克力瓊脂、MH瓊脂、含血MH瓊脂、HTM瓊脂為江門凱林公司產(chǎn)品,藥敏紙片為英國(guó)OXOID產(chǎn)品,青霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢呋辛、美羅培南、利奈唑胺等E-test檢測(cè)條,頭孢硝噻吩紙片為鄭州安圖生物工程股份有限公司產(chǎn)品。

    1.2 方法

    1.2.1 細(xì)菌鑒定 采用VITEK 2 Compact全自動(dòng)鑒定藥敏系統(tǒng)和布魯克質(zhì)譜儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定。

    1.2.2 藥敏試驗(yàn) 參照當(dāng)年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的藥敏試驗(yàn)方法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。普通細(xì)菌藥敏采用梅里埃VITEK 2 Compact 全自動(dòng)鑒定藥敏系統(tǒng),革蘭陽(yáng)性菌采用GP67藥敏卡,肺炎鏈球菌采用GP68藥敏卡,革蘭陰性菌采用GN13和GN16藥敏卡;流感嗜血桿菌和溶血鏈球菌采用湖南天地人藥敏系統(tǒng),遇到特殊耐藥表型采用E-test法復(fù)核。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、流感嗜血桿菌ATCC 49247、肺炎鏈球菌ATCC 49619。藥敏結(jié)果判斷參照CLSI (2017 版)M100-S27[1]標(biāo)準(zhǔn),鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的藥敏判斷標(biāo)準(zhǔn)為敏感≤2 μg/mL,耐藥≥8 μg/mL[2]。

    1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用whonet 5.6軟件,檢出率或耐藥率的比較及線性變化趨勢(shì)應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行卡方檢驗(yàn),以P≤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 細(xì)菌分布 共分離38 075株細(xì)菌,其中革蘭陽(yáng)性菌13 184株(占34.6%),革蘭陰性菌24 891株(占65.4%)。革蘭陰性菌居前五位的分別是大腸埃希菌(5 158 株,13.5%)、不動(dòng)桿菌屬(4 740株,12.4%)、克雷伯菌屬(4 470株,11.7%)、銅綠假單胞菌(3 577株,9.4%)、腸桿菌屬(1 452株,3.8%),革蘭陽(yáng)性菌居前五位的分別是凝固酶陰性葡萄球菌(4 008株,10.5%)、腸球菌屬(3 216株,8.4%)、金黃色葡萄球菌(3 096株,8.1%)、草綠色鏈球菌(1 319株,3.5%)、肺炎鏈球菌(398株,1.0%)。2013—2017年各年度病原菌分布見(jiàn)表1。

    2.2 標(biāo)本來(lái)源 38 075株病原菌,主要來(lái)自于呼吸道標(biāo)本和傷口膿液,分別占39.3%、15.2%, 血、尿來(lái)源占比也較高,分別占11.8%、9.8%。詳見(jiàn)表2。

    表1 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院患者標(biāo)本分離病原菌

    表2 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院患者分離細(xì)菌標(biāo)本來(lái)源分布

    2.3 不同標(biāo)本主要細(xì)菌分布 呼吸道標(biāo)本主要分離細(xì)菌為鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌,傷口膿液主要分離細(xì)菌為金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌,血標(biāo)本主要分離細(xì)菌為凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌,尿標(biāo)本主要分離細(xì)菌為大腸埃希菌、屎腸球菌、肺炎克雷伯菌。見(jiàn)表3。

    表3 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院不同標(biāo)本分離居前5位的菌種分布

    2.4 病原菌藥敏結(jié)果

    表4 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院金黃色葡萄球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表5 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表6 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院糞腸球菌和屎腸球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表7 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院草綠色鏈球菌和β溶血鏈球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表8 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院非腦膜炎肺炎鏈球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表9 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表10 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    表11 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院流感嗜血桿菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率(%)

    2.5 多重耐藥菌檢出情況 2013—2017年MRSA、耐萬(wàn)古霉素腸球菌(VRE)的檢出率逐步下降(P<0.01),耐碳青霉烯大腸埃希菌(CRECO)、耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)、耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌(CRAB)的檢出率逐年明顯上升(均P<0.01),耐碳青霉烯銅綠假單胞菌(CRPA)的檢出率基本穩(wěn)定在30%左右。見(jiàn)表12。

    3 討論

    2013—2017年共分離細(xì)菌38 075株,其中革蘭陽(yáng)性菌占34.6%,革蘭陰性菌占65.4%,與全國(guó)CHINET監(jiān)測(cè)網(wǎng)[3]、武漢同濟(jì)醫(yī)院[4]監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)基本一致。通常認(rèn)為引起社區(qū)感染的細(xì)菌是肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等,既可引起醫(yī)院感染又可引起社區(qū)感染的是大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌,主要引起醫(yī)院感染的是銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌[5]。本院分離菌居前五位的是大腸埃希菌、不動(dòng)桿菌屬、克雷伯菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌,可能與本院住院患者病情重、住院時(shí)間長(zhǎng)有關(guān)。

    表12 2013—2017年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院多重耐藥菌的檢出率[%(株)]

    MRSA是醫(yī)院感染重點(diǎn)監(jiān)測(cè)細(xì)菌。2013—2017年本院MRSA分離率為31.7%,略低于CHINET監(jiān)測(cè)網(wǎng)[3]、陜西省耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)[6]的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。與文獻(xiàn)[7]報(bào)道MRSA 分離率仍在上升相比不同,五年中本院MRSA分離率呈下降趨勢(shì)(P<0.01),可能與對(duì)分離出MRSA患者采取早期接觸隔離措施,以及醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生意識(shí)、行為提高有關(guān)。MRSA對(duì)慶大霉素、四環(huán)素、利福平、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星的耐藥率逐年下降(均P<0.01)。MRSA對(duì)利福平和氟喹諾酮類抗菌藥物的敏感性增加可能是因?yàn)榻瘘S色葡萄球菌的遺傳結(jié)構(gòu)改變,Li等[8]研究發(fā)現(xiàn),2013年MRSA的主要基因型是 ST239-t030-MRSA,2016年則為ST59-t437-MRSA,ST239-t030-MRSA對(duì)利福平、四環(huán)素和氟喹諾酮類抗菌藥物的耐藥性更強(qiáng)。本院MRSA 對(duì)氨基糖苷類和氟喹諾酮類抗菌藥物的耐藥率逐年下降的原因有待進(jìn)一步研究。

    本研究中CRKP檢出率由2013年的12.0%上升至2016年的25.1%和2017年的24.7%,增長(zhǎng)趨勢(shì)與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道[9-10]一致。本院CRKP主要來(lái)源于中心ICU(9.5%)、神內(nèi)ICU(6.6%)、神外ICU(5.2%)。文獻(xiàn)[11]報(bào)道,入住ICU,碳青霉烯類、喹諾酮類、糖肽類、β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合劑等抗菌藥物暴露,免疫抑制、手術(shù)、機(jī)械通氣等是CRKP感染的危險(xiǎn)因素。王娜等[9]發(fā)現(xiàn),CRKP的分離率與同期廣譜頭孢菌素類、碳青霉烯類和青霉素酶抑制劑復(fù)方制劑的用量有明顯的相關(guān)性,但未發(fā)現(xiàn)CRKP分離率與氨基糖苷類和氟喹諾酮類之間的相關(guān)性。因此,為遏制或減緩CRKP的發(fā)生,有必要合理使用上述抗菌藥物。需從手衛(wèi)生管理,有效的隔離預(yù)防措施,落實(shí)環(huán)境和設(shè)備清潔消毒以及暴發(fā)醫(yī)院感染的控制等方面著手,有效預(yù)防與控制多重耐藥菌的醫(yī)院感染[12]。

    鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率2013—2016年為2.6%~9.3%,2017年突然升至50.9%,分析原因是2017年之前使用頭孢哌酮/舒巴坦的藥敏紙片含量為75 mg/75 mg,2017年改為75 mg/30 mg。多重耐藥不動(dòng)桿菌常存在染色體編碼的β-內(nèi)酰胺酶,包括C類不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌來(lái)源的頭孢菌素酶和D類苯唑西林酶,以及質(zhì)粒介導(dǎo)的A類β-內(nèi)酰胺酶[13]。舒巴坦是一種常見(jiàn)的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑,頭孢哌酮與舒巴坦聯(lián)合治療可增強(qiáng)其對(duì)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的體外抗菌活性,且頭孢哌酮/舒巴坦的抑菌活性隨著舒巴坦比例的增加而增加[14-15],由此可以解釋2017年鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率突然升高的現(xiàn)象。因此,當(dāng)某種細(xì)菌對(duì)某種抗菌藥物的耐藥率劇升/降時(shí),首先應(yīng)確定是否因檢測(cè)方法不一致所致。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)阿米卡星的耐藥率在2016年后出現(xiàn)明顯上升,是由于2013—2015年阿米卡星結(jié)果是自動(dòng)化儀器MIC法,2016年后采用MIC法加K-B紙片法復(fù)核。儀器說(shuō)明書提及鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)阿米卡星的藥敏結(jié)果不可靠,因此需進(jìn)行必要的藥敏復(fù)核檢測(cè)。

    2013—2015年流感嗜血桿菌對(duì)喹諾酮類的不敏感率較高,其藥敏檢測(cè)采用自動(dòng)化儀器MIC法,未進(jìn)行其他藥敏方法復(fù)核。2016年使用新的藥敏板條系統(tǒng),其耐藥率明顯下降,提示可能存在儀器的系統(tǒng)誤差。在以后的工作中需及時(shí)總結(jié)和藥敏復(fù)核檢測(cè),爭(zhēng)取及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差。Kuo等[16]報(bào)道臺(tái)灣地區(qū)流感嗜血桿菌對(duì)左氧氟沙星的不敏感率由2002年的2.0%逐漸上升至2010年的21.3%,其原因主要是不同地區(qū)老年人群中克隆傳播所致。文獻(xiàn)[17]報(bào)道廣州某醫(yī)院流感嗜血桿菌對(duì)環(huán)丙沙星的不敏感率僅為1.7%,不敏感菌株gyrA和parC基因存在氨基酸替代。流感嗜血桿菌的AcrB中存在氨基酸取代Arg327Ser時(shí),可引起阿奇霉素MIC增加,從而導(dǎo)致流感嗜血桿菌對(duì)阿奇霉素不敏感[18],本研究中流感嗜血桿菌對(duì)阿奇霉素的不敏感率也較高,與2017年CHINET[3]監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)一致,但本院流感嗜血桿菌對(duì)阿奇霉素不敏感的具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

    本院細(xì)菌耐藥形勢(shì)依然十分嚴(yán)峻。在應(yīng)對(duì)多重耐藥菌的威脅時(shí),只有堅(jiān)持以預(yù)防感染為中心,抗菌藥物管理和醫(yī)院感染管理兩手抓兩手硬[19]。細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)工作必須持之以恒,并加強(qiáng)數(shù)據(jù)分析和總結(jié),以及時(shí)反映醫(yī)院和地區(qū)的耐藥菌流行情況和變化趨勢(shì),為醫(yī)院管理者制定感染控制政策提供參考,為醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)性使用抗菌藥物提供依據(jù)。

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