范嘉妍,王 帥,姜 巖,董振宇,嚴(yán) 婷,王 楠
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院農(nóng)學(xué)院,吉林 吉林 132101)
近年來,隨著種植業(yè)與養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展,產(chǎn)量過剩的畜禽糞便與秸稈已成為農(nóng)牧業(yè)良性發(fā)展的環(huán)境問題。兩類農(nóng)業(yè)廢棄物處置不當(dāng)既造成了嚴(yán)重的資源浪費(fèi),又加速了溫室氣體的產(chǎn)生和病原體的擴(kuò)散[1]。堆肥能夠使畜禽糞便、秸稈等農(nóng)業(yè)廢棄物無害化、減量化和資源化,消除多種微生物病菌及其他有害物質(zhì)對(duì)土壤環(huán)境的污染,是當(dāng)前資源化利用農(nóng)業(yè)廢棄物的最佳途徑之一。
畜禽糞便有著氮素含量高、C/N低、有機(jī)質(zhì)豐富且易被微生物分解的特點(diǎn),是秸稈堆肥的優(yōu)質(zhì)能量調(diào)理劑[2]。作物秸稈在畜禽糞便堆肥中既可作為高碳源物質(zhì)來均衡堆肥的C/N,又具有調(diào)節(jié)堆肥孔隙度和含水率的作用[3],基于二者性狀互補(bǔ)的特點(diǎn),對(duì)于兩類廢棄物共堆肥的研究較多。王亞飛等[4]以畜禽糞便為主料、玉米秸稈為輔料進(jìn)行堆肥研究,結(jié)果表明畜禽糞便在共堆肥中具有提升微生物數(shù)量,提高微生物代謝強(qiáng)度及堆肥物質(zhì)轉(zhuǎn)化效率的作用。于子旋等[5]研究指出,牛糞和豬糞在堆肥過程中脂肪族、多糖類物質(zhì)減少,相應(yīng)芳香碳結(jié)構(gòu)增強(qiáng),腐殖化程度有所增加。黃紅麗等[6]以豬糞和秸稈為堆肥原料,指出伴隨堆肥的進(jìn)行,腐殖化程度會(huì)相應(yīng)提高。王玉軍等[7]以雞糞和玉米秸稈為堆腐原料,研究了堆肥過程中腐殖物質(zhì)的變化規(guī)律,指出堆肥過程有機(jī)碳、水溶性物質(zhì)會(huì)漸趨下降,腐殖化程度會(huì)有所增加。Qian等[8]分別以豬糞-稻草與牛糞-稻草為原料進(jìn)行堆腐試驗(yàn),結(jié)果表明豬糞-稻草共堆腐的腐熟指標(biāo)要優(yōu)于牛糞-稻草,更易促進(jìn)堆肥腐熟。Wang等[9]以豬糞和鋸末為基料,研究了添加生物炭對(duì)堆肥品質(zhì)的影響,指出添加生物炭可促進(jìn)腐植酸的合成,同時(shí)有利于腐殖化進(jìn)程。綜上所述,多數(shù)報(bào)道集中于堆肥腐殖化程度及分子結(jié)構(gòu)特征的評(píng)價(jià),缺乏腐殖質(zhì)各組分及特點(diǎn)的研究。本研究擬采用室內(nèi)培養(yǎng)法,以稻草、豬糞為基礎(chǔ)物料,設(shè)置不同質(zhì)量比,以腐殖質(zhì)組成為評(píng)價(jià)依據(jù),為兩者共堆肥配方的研制提供科學(xué)依據(jù)。
稻秸取自吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院北大地水稻試驗(yàn)田,豬糞由某公司提供,稻秸、豬糞中有機(jī)碳、N、P2O5、K2O含量、pH值分別為50.5%、0.14%、3.54%、1.72%、6.77和43.4%、3.0%、4.8%、2.1%、6.11。 微生物腐熟劑購于公司,粉劑,有效活菌數(shù)≥5.0億/g,稱取30 g微生物腐熟劑于1 000 mL錐形瓶中,加入300 mL無菌水,在28℃氣浴振蕩器中搖瓶培養(yǎng)24 h,4 000 r/min離心10 min,收集上清液,得到接種所需的菌懸液。
采取室內(nèi)培養(yǎng)法,將稻秸與豬糞分別晾曬風(fēng)干、粉碎過0.10 mm篩,按照表1所列配比均勻混合。物料總質(zhì)量為50 g,裝入100 mL三角瓶,用(NH4)2SO4溶液調(diào)節(jié)物料適宜的含水量(60%)和C/N(25∶1),隨后均勻接種20 mL菌懸液,啟動(dòng)好氧堆肥。每個(gè)處理、每個(gè)時(shí)間點(diǎn)下均設(shè)置3次重復(fù),期間按照0、15、30、60和90 d動(dòng)態(tài)取樣,在鼓風(fēng)干燥箱中45℃風(fēng)干至恒質(zhì)量,備用。
表1 稻秸與豬糞共堆肥的質(zhì)量比及對(duì)應(yīng)的處理
采用腐殖質(zhì)組成修改法[10]進(jìn)行分析,步驟如下:稱取過0.10 mm篩的腐解物料1.00 g于50 mL聚乙烯離心管中,加入30 mL蒸餾水?dāng)嚢杈鶆?,?0℃恒溫水浴振蕩器上提取1 h,4 000 r/min離心10 min,將上清液過濾于50 mL容量瓶中,在帶有殘?jiān)碾x心管中繼續(xù)加水20 mL攪拌均勻,離心并將此次上清液與前次合并、用蒸餾水定容,此溶液即為水溶性物質(zhì)(WSS)。按照上述方法,將蒸餾水改為0.1 mol/L NaOH和0.1 mol/L Na2P2O7的混合液對(duì)殘?jiān)M(jìn)行二次提取,此次收集的溶液即為可提取腐植酸(HE)。離心管中殘?jiān)谜麴s水多次洗滌,直至洗液近中性,將其轉(zhuǎn)入55℃鼓風(fēng)干燥箱烘干至恒重,該沉淀物質(zhì)即為胡敏素(Hu)。
吸取HE溶液30 mL,用0.5 mol/L H2SO4將其pH值調(diào)至1.0~1.5,置于70℃水浴鍋中保溫1.5 h、靜置過夜,次日將溶液過濾于50 mL容量瓶、定容,此溶液即為富里酸(FA)。濾紙上殘?jiān)扔孟∷嵯礈?、再用溫?zé)岬?.05 mol/L NaOH將其溶解于50 mL容量瓶中,用蒸餾水定容,即為胡敏酸(HA)。WSS、HE、HA和Hu組分的有機(jī)碳含量(CWSS、CHE、CHA和CHu)均采用外加熱-重鉻酸鉀氧化法測(cè)定,富里酸(FA)碳含量CFA采用差減法計(jì)算,即CFA=CHE-CHA。采用北京普析通用有限公司生產(chǎn)的TU-1810型紫外可見分光光度計(jì)對(duì)HA堿溶液的吸光值(OD465和OD665)進(jìn)行測(cè)定,并由公式E4/E6=OD465/OD665計(jì)算出 E4/E6。
采用Excel 2003和SPSS 18.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用LSD法測(cè)驗(yàn)差異顯著性。
圖1 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)CWSS的影響
CWSS是堆肥有機(jī)質(zhì)中最活躍的部分,是微生物最易利用的營養(yǎng)源[1]。由圖1可知,與稻秸相比,豬糞有更高含量的CWSS,在0 d,堆肥中豬糞比例的提高有助于CWSS含量的增加。隨堆肥進(jìn)行,不同處理CWSS含量的變化規(guī)律有所不同,與0 d相比,90 d堆肥結(jié)束時(shí),各處理CWSS含量均有不同程度降低,由Rs至Pm處理,CWSS含量分別降低22.5%、95.8%、60.4%、64.6%、93.8%、31.4%和95.4%??梢?,Rp1處理CWSS的消耗程度最大,而Rs處理CWSS的消耗程度最小。
CHE是有機(jī)物料在微生物、酶的作用下形成的一類特殊的高分子化合物,它是由一系列分子構(gòu)成的聚類物質(zhì)[7],是堆肥發(fā)揮肥力效應(yīng)的關(guān)鍵物質(zhì)。如圖2所示,在0 d,堆肥中稻秸與豬糞等比例混合CHE含量可顯著高于其他處理。各處理CHE隨堆肥進(jìn)行所表現(xiàn)的規(guī)律不同。與0 d相比,90 d堆肥結(jié)束時(shí),除Rp1處理使CHE增加13.1%外,其余處理均使得CHE有著不同幅度的降低,大小順序如下:Rp4(56.7%)>Rp3(42.7%)>Rp2(37.4%)>Rs(21.8%)>Rp5(18.4%)>Pm(5.0%), 可 見,僅有Rp1處理能促進(jìn)CHE的積累,其余處理CHE均表現(xiàn)為消耗。
圖2 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)CHE的影響
CHA是分子量大小不等的一系列高分子縮聚物[7],含有羧基、酚羥基等多種活性官能團(tuán),是CHE的核心組分。由圖3可知,在0 d時(shí),堆肥中豬糞比例占半數(shù)以上的處理,其CHA顯著高于其他處理。隨堆肥進(jìn)行,各處理CHA均表現(xiàn)為先減后增的規(guī)律,與0 d相比,堆肥結(jié)束時(shí),除Rp1處理能使CHA提高22.0%外,其余6個(gè)處理CHA均表現(xiàn)為消 耗,Rs、Rp2、Rp3、Rp4、Rp5和Pm處 理CHA的降低幅度分別為9.0%、4.2%、28.2%、43.9%、61.6%和51.9%,可見,在稻秸與豬糞質(zhì)量比為7∶3的基礎(chǔ)上,繼續(xù)增加豬糞的比例更有助于CHA的消耗,稻秸與豬糞質(zhì)量比1∶9時(shí)CHA的損失最大,其次是僅有豬糞的堆肥處理。
圖3 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)CHA的影響
HA堿溶液E4/E6與其分子的縮合度呈反比,該值越小表明HA分子的結(jié)構(gòu)越復(fù)雜[11]。如圖4所示,伴隨堆肥的進(jìn)行,除Rp4處理HA堿溶液E4/E6呈漸趨增加外,其余處理均表現(xiàn)為先增后減的規(guī)律。堆肥結(jié)束時(shí),與0 d相比,Rs、Rp1、Rp2、Rp3、Rp4和Pm 6個(gè)處理下HA堿溶液E4/E6分別增加了39.5%、12.3%、75.2%、5.5%、126.8%和27.0%,而Rp5處理的E4/E6降低了6.3%。由此可見,Rp5處理在堆肥結(jié)束時(shí)HA分子的縮合度和芳構(gòu)化程度有所增強(qiáng),而其他處理HA的脂族化程度加強(qiáng),結(jié)構(gòu)更加簡(jiǎn)單。
圖4 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)HA堿溶液E4/E6的影響
根據(jù)CHA/CFA的變化可大致判斷堆肥的腐熟程度,該比值越高表明腐殖質(zhì)的品質(zhì)越高[6,8]。由圖5可知,隨堆肥進(jìn)行,各處理CHA/CFA均表現(xiàn)為先降低后升高的規(guī)律。與0 d相比,堆肥結(jié)束時(shí),Rs、Rp1、Rp2、Rp3和Rp4處理CHA/CFA均有所增加,增幅分別為41.2%、20.3%、149.4%、46.8%和91.3%,而Rp5和Pm處理CHA/CFA分別降低了79.8%和75.4%??梢?,各處理堆肥HA均表現(xiàn)為先降解向FA轉(zhuǎn)化,再由FA縮合形成HA的規(guī)律,當(dāng)豬糞在共堆肥中質(zhì)量比例≥90%,最終形成的CFA高于CHA,腐殖質(zhì)品質(zhì)有所降低,而在稻秸質(zhì)量比例≥30%,則最終有利于腐殖質(zhì)品質(zhì)的提升。
圖5 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)CHA/CFA的影響
CHu是與礦物質(zhì)緊密結(jié)合的腐殖物質(zhì),被認(rèn)為是堆肥中的惰性物質(zhì)[7]。由圖6可知,在0 d,豬糞在物料中比例的提升與其CHu含量的變化呈反比。隨堆肥進(jìn)行,各處理CHu的變化規(guī)律不同。與0 d相比,在堆肥結(jié)束時(shí),各處理CHu均有所降低,由Rs至Pm處理,CHu的降低幅度分別為65.2%、57.4%、25.7%、68.9%、46.4%、65.7%和32.0%,其中,Rp3處理對(duì)CHu的分解作用最強(qiáng)。
圖6 稻秸與豬糞共堆肥對(duì)CHu的影響
與稻秸相比,豬糞中有更高含量的CWSS和CHA,而CHu含量較低,這是因?yàn)樨i糞是經(jīng)“過腹消化”的產(chǎn)物,其在豬腸胃中經(jīng)過乳酸菌等多種細(xì)菌復(fù)雜酶系的降解,已初步發(fā)酵,經(jīng)計(jì)算,其C/N為14.5,而稻秸C/N為360.7,可見豬糞的腐熟程度明顯高于未經(jīng)腐熟的稻秸。
CWSS是微生物能迅速利用的底物,在腐殖質(zhì)形成過程中起主要作用[7]。不同處理所表現(xiàn)的規(guī)律不一,與0 d相比,90 d堆肥結(jié)束時(shí),各處理CWSS含量均有不同程度降低,其中,稻秸與豬糞質(zhì)量比為9∶1時(shí)對(duì)CWSS的消耗程度最大。在堆肥過程中,微生物利用CWSS并以此為能量物質(zhì),被合成的物質(zhì)一部分進(jìn)入腐殖質(zhì),還有一小部分能夠以芳香環(huán)的形式存在[7]。
CHE在堆肥過程中的變化可以有效評(píng)價(jià)堆肥的腐熟程度[12]。在供試處理中,僅有稻秸與豬糞質(zhì)量比為9∶1時(shí)在堆肥結(jié)束后能使CHE增加13.1%,其余處理CHE均表現(xiàn)為消耗;李恕艷等[13]研究表明,堆肥形成的腐植酸不穩(wěn)定,較易被分解,部分分解產(chǎn)物在微生物作用下能夠縮合、形成結(jié)構(gòu)與性質(zhì)更為穩(wěn)定的腐殖物質(zhì)。可見,在本試驗(yàn)條件下,稻秸與豬糞質(zhì)量比為9∶1堆肥時(shí)更有利于腐熟進(jìn)程、促進(jìn)腐殖物質(zhì)的形成,而其余處理CHE降低的原因也許與CWSS的損失有關(guān),通常,CWSS可視為合成腐殖質(zhì)的“源頭物質(zhì)”[14],因“源頭物質(zhì)”被微生物消耗而減少了CHE的合成。
HA是腐殖質(zhì)中的活躍物質(zhì)[15],其分子結(jié)構(gòu)變化可用于評(píng)價(jià)堆肥的腐熟特征。吳萍萍等[16]提出,秸稈對(duì)加強(qiáng)HA分子芳香化的貢獻(xiàn)較大,而豬糞則更有利于HA的脂族化。HA堿溶液E4/E6能反映HA分子結(jié)構(gòu)的芳構(gòu)化程度,比值越小,說明分子的縮合度和芳構(gòu)化程度越高、分子量越大[17]。在本試驗(yàn)條件下,稻秸與豬糞共堆肥質(zhì)量比為9∶1時(shí),在堆肥結(jié)束后能夠促進(jìn)HA分子的縮合,然而,其他處理HA分子的芳構(gòu)化程度均有所下降。隨堆肥進(jìn)行,各處理HA均表現(xiàn)為先降解、再縮合的規(guī)律,這與于建等[18]研究結(jié)果相同。可見,除稻秸與豬糞共堆肥質(zhì)量比為9∶1外,其他處理下新形成的HA,其分子的芳構(gòu)化程度尚未縮合到其原有HA的復(fù)雜程度[19]。腐殖化指數(shù)(CHA/CFA)是評(píng)價(jià)腐殖質(zhì)品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo),該比值越大說明CHA含量越高,品質(zhì)越好[20]。隨堆肥進(jìn)行,各處理CHA/CFA均表現(xiàn)為先降低后升高的總體規(guī)律,這與Zhang等[10]的研究結(jié)果一致。當(dāng)?shù)窘照级逊士傎|(zhì)量≥30%時(shí),經(jīng)堆肥后有利于腐殖質(zhì)品質(zhì)的提升,而豬糞占堆肥總質(zhì)量≥90%,則堆肥后腐殖質(zhì)品質(zhì)會(huì)有所下降。
Hu作為腐殖質(zhì)的惰性組分,分子量大且性質(zhì)穩(wěn)定,在自然狀態(tài)下多與黏土礦物結(jié)合而以復(fù)合體的形式存在[21]。與0 d相比,堆肥結(jié)束時(shí),各處理CHu含量均有所消耗,其中,稻秸與豬糞等比例處理對(duì)CHu的分解作用最強(qiáng),使其向活性腐殖質(zhì)組分轉(zhuǎn)化[22]。