早產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中質(zhì)譜-色譜技術(shù)的應(yīng)用及其臨床意義分析

朱小敏 陳玉芳 朱恬玲

[摘要] 目的 探討質(zhì)譜-色譜技術(shù)在產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中的應(yīng)用效果及其臨床意義。方法 方便選擇2016年5月—2018年5月廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院早產(chǎn)兒50例作為對象，設(shè)為觀察組;選擇同期分娩的足月兒50例，設(shè)為對照組。兩組胎兒娩出后均完成尿液標(biāo)本的采集，采用尿素酶預(yù)處理-氣相色譜-質(zhì)譜法（UP-GC-MS）完成兩組尿液中的賴氨酸、苯丙氨酸、鳥氨酸、組氨酸、延延胡索酸及蘋果酸的水平測定。結(jié)果 觀察組早產(chǎn)兒質(zhì)譜-色譜技術(shù)測定后賴氨酸含量為0.20 mg/mL、苯丙乙酸含量為0.02 mg/mL、組氨酸含量為1.23 mg/mL，明顯低于對照組足月兒（P<0.05）;觀察組早產(chǎn)兒檢驗(yàn)?zāi)蛞壶B氨酸平均秩次為29.49顯著低于對照組的平均秩次45.57（t=-4.887）;觀察組延胡索酸平均值為29.39，顯著低于對照組的平均值45.57（t=8.524）;觀察組蘋果酸平均值為29.98，顯著低于對照組平均值45.57（t=-2.720），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 早產(chǎn)兒的蛋白質(zhì)分解代謝水平較低，而足月兒的蛋白質(zhì)分解代謝水平較高。尿代謝物的測定可用于評估臨床工作中新生兒的代謝狀態(tài)，以進(jìn)一步指導(dǎo)臨床實(shí)施理性營養(yǎng)支持計(jì)劃。

[關(guān)鍵詞] 質(zhì)譜-色譜技術(shù);早產(chǎn)兒;應(yīng)用效果;臨床意義

[Abstract] Objective To explore the application effect and clinical significance of mass spectrometry-chromatography in protein metabolism of infants. Methods From May 2016 to May 2018， 50 cases of premature infants in Zhuhai Integrated Hospital of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine in Guangdong Province were convenient selected as the observation group; 50 cases of term infants who delivered at the same time were selected as the control group. Uterine samples were collected after the fetuses were delivered in both groups. Urinease pretreatment-gas chromatography-mass spectrometry （UP-GC-MS） was used to complete the lysine， phenylalanine， and ornithine in the two groups， histidine， fumaric acid and malic acid. Results The lysine content of preterm infants in the observation group was 0.20 mg/mL， the content of phenylpropionic acid was 0.02 mg/mL， and the histidine content was 1.23 mg/mL（P<0.05）; the average rank of urine ornithine in the observation group of preterm infants was 29.49， which was significantly lower than the average rank of the control group， 45.57（t=-4.887）; The average value was 45.57（t=8.524）; the average malic acid in the observation group was 29.98， which was significantly lower than the average 45.57 in the control group（t=-2.720）. The difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The level of protein catabolism in preterm infants is low， while the level of protein catabolism in term infants is high. The determination of urinary metabolites can be used to evaluate the metabolic status of newborns in clinical work to further guide the clinical implementation of rational nutrition support programs.

[Key words] Mass spectrometry-chromatography; Premature infants; Application effect; Clinical significance

在胎齡前37周出生的活產(chǎn)稱為早產(chǎn)或未成熟兒。隨著我國醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，早產(chǎn)兒的存活率也有所提高。但是，存活的早產(chǎn)兒常伴有多種并發(fā)癥[1]。部分患兒營養(yǎng)干預(yù)后容易增加心血管系統(tǒng)疾病、糖尿病及肥胖癥等并發(fā)癥。因此，加強(qiáng)早產(chǎn)兒三大代謝物質(zhì)的精確評估，對指導(dǎo)臨床營養(yǎng)干預(yù)具有重要的意義[2]。該文以2016年5月—2018年5月廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院早產(chǎn)兒50例作為對象，探討質(zhì)譜-色譜技術(shù)在產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中的應(yīng)用效果，以及在臨床中的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院50例早產(chǎn)兒作為對象，設(shè)為觀察組，男26例、 女24例;胎齡28～36周，平均（30.50±2.15）周;Apgar評分6～8分，平均（7.12±0.53）分。選擇同期分娩的足月兒50名，設(shè)為對照組，男27名、女23 名;胎齡在37～41周，平均（32.12±2.03）周;Apgar評分8～10分，平均（7.32±0.55）分，無合并癥，血?dú)夥治鰌H和乳酸值在正常范圍內(nèi)。該研究經(jīng)過倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意，且前述知情同意書。

1.2? 方法

①儀器和設(shè)備。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本，Q1000型），試管濃縮器（VAIX-SMART技術(shù)有限公司，型號：TC-8F）、試管濃縮氮吹儀（型號：L-129A）、色譜柱（日本Ultra Alloy+5UA5-30M-0.25F）、離心機(jī)（型號：5417C）。②標(biāo)本采集。觀察組與對照組入院后完善有關(guān)檢查，均在出生后24 h內(nèi)采集尿液標(biāo)本3 mL，標(biāo)本采集時(shí)詳細(xì)記錄患兒的住院號，出生體重，胎齡以及診斷標(biāo)本收集的時(shí)間等，然后用干凈的尿袋收集大約2 mL左右的清潔尿液，并接尿液將放置于普通干燥的實(shí)驗(yàn)管之內(nèi)，或者是浸透在專用尿液收集的濾紙片之后用油性記進(jìn)行標(biāo)記，需要標(biāo)記研究對象的編號和姓名，接著將尿液放置于負(fù)20℃的冰箱里進(jìn)行冷藏，然后，在1 周內(nèi)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測尿代謝物，并對尿代謝物進(jìn)行分析，檢測相應(yīng)水平的尿代謝物，主要指標(biāo)包括賴氨酸，苯丙氨酸，組氨酸以及鳥氨酸等。

1.3? 觀察指標(biāo)

①兩組的賴氨酸，苯丙乙酸以及組氨酸水平。比較兩組研究對象的兩組的賴氨酸，苯丙乙酸以及組氨酸水平（正常值得倍率）。②尿液鳥氨酸的平均秩次。比較兩組研究對象尿液鳥氨酸的平均秩次，包括延延胡索酸以及蘋果酸的平均秩次（正常值得倍率）。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料采用（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 賴氨酸、苯丙酸和組氨酸水平

觀察組早產(chǎn)兒質(zhì)譜-色譜技術(shù)測定后賴氨酸、苯丙乙酸以及組氨酸水平，均低于對照組足月兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2? 尿液鳥氨酸、延胡索酸與蘋果酸平均秩次

早產(chǎn)兒尿液中鳥氨酸，延胡索酸和蘋果酸的含量明顯低于足月兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3? 討論

質(zhì)譜-色譜技術(shù)作為一種臨床醫(yī)學(xué)上研究代謝組學(xué)的重要方法，同時(shí)也是一種能夠高通量化學(xué)分析和多維統(tǒng)計(jì)的全新的分析方法。根據(jù)相關(guān)的國內(nèi)外的研究表明[3-4]，該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于新生兒能夠?yàn)樵缙谠\斷以及監(jiān)測新生兒疾病的重要生物標(biāo)志物提供非常重大線索[5]。

該次研究當(dāng)中觀察組早產(chǎn)兒質(zhì)譜-色譜技術(shù)測定后賴氨酸含量為0.20 mg/mL、苯丙乙酸含量為0.02 mg/mL、組氨酸含量為1.23 mg/mL，明顯低于對照組足月兒（P<0.05）。相關(guān)研究者[6]等在《質(zhì)譜-色譜技術(shù)在早產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中的應(yīng)用研究》中對質(zhì)譜-色譜技術(shù)在產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中的應(yīng)用效果及其臨床意義研究結(jié)果顯示，早產(chǎn)兒組的尿液中賴氨酸、苯丙氨酸、組氨酸水平明顯低于足月兒組，該研究中結(jié)果和有關(guān)研究結(jié)果相差無幾。說明對于早產(chǎn)兒來說，其體內(nèi)的賴氨酸，苯丙氨酸以及組氨酸的水平都明顯的高于足月兒，產(chǎn)生的主要的原因是由于早產(chǎn)兒的胎齡小，而新生兒體內(nèi)的原始氨基酸的儲備量則主要來源于妊娠晚期的太熱時(shí)期[7-8]。蘋果酸在人體中屬于三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物，具有護(hù)肝的作用，能夠有效改患人體的腦組織的能量代謝。早產(chǎn)兒在出生后的營養(yǎng)供給的主要來源是腸道外營養(yǎng)，因此，在臨床上選擇一種適合早產(chǎn)兒的氨基酸制劑是十分重要。該研究觀察組早產(chǎn)兒檢驗(yàn)?zāi)蛞壶B氨酸平均秩次為29.49顯著低于對照組的平均秩次45.57;觀察組延胡索酸平均值為29.39，顯著低于對照組的平均值45.57;觀察組蘋果酸平均值為29.98，顯著低于對照組平均值45.57，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），相關(guān)研究者[6]在《質(zhì)譜-色譜技術(shù)在早產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝中的應(yīng)用研究》中研究結(jié)果顯示，觀察組尿鳥氨酸平均值為29.5，富馬酸平均值為29.4，蘋果酸平均值為30.01，其結(jié)果與該次研究結(jié)果差別不大，說明利用質(zhì)譜-色譜技術(shù)對于早產(chǎn)兒蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物的篩查具有很好的效果，檢驗(yàn)有效度較高。

綜上所述，質(zhì)譜-色譜技術(shù)用于早產(chǎn)兒蛋白質(zhì)檢測中能了解其分解代謝情況，早產(chǎn)兒的蛋白質(zhì)分解代謝水平較低，而足月兒的蛋白質(zhì)分解代謝水平較高，從而進(jìn)一步指導(dǎo)臨床實(shí)施合理的營養(yǎng)支持計(jì)劃。

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（收稿日期：2020-02-09）