60Co-γ射線和電子束輻照滅菌對葛根提取物抗氧化活性及指紋圖譜的影響

徐遠(yuǎn)芳 李文革 鄧鋼橋 陳石新 張祺玲 周毅吉 張 勇 彭 玲

(1湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所/湖南省農(nóng)業(yè)生物輻照工程技術(shù)研究中心/生物輻照技術(shù)湖南省工程研究中心，湖南 長沙 410125；2常德市犟哥生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司，湖南 常德 415300)

葛根(KudzuvineRoot)，又名鹿藿、黃斤、雞齊等，是豆科(Leguminosae)葛屬(Pueraria)多年生落葉藤本植物[1]。 葛根具有極高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值，素有“南葛北參”之美譽(yù)，是我國衛(wèi)生部門批準(zhǔn)的藥食兩用的天然植物資源[2]。 葛屬共有約35 種，主要分布于印度、日本、馬來西亞等地。 我國產(chǎn)8 種及2 變種，主要分布于西南部、中南部至東南部，長江以北少見[3]。葛根是我國傳統(tǒng)的中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，主司發(fā)表解肌，升陽透疹，解熱生津[4]。 《中國藥典》(2015 版)收載的葛根和粉葛，為野葛[Pueraria lobata(Willd.) Ohwi]或甘葛藤(Pueraria thomsoniiBenth.)的干燥根[5]。 葛根提取物是以葛根的干燥根為原料加工制成的具有較高活性成分的提取物。 葛根的主要活性成分包括葛根素(puerarin)、大豆苷(daidzin)、大豆苷元(daidzein)、染料木素(genistein)、染料木苷(genistin)等異黃酮類化合物[6]。 近年來，國內(nèi)外學(xué)者對葛根中葛根素等異黃酮類的生物活性及藥理功能進(jìn)行了多方面的研究，發(fā)現(xiàn)其具有抗炎[7]、抗氧化[8]、抗骨質(zhì)疏松[9]、降糖[10]、抗癌[11]等多種功效，在臨床上主要用于心腦血管疾病、糖尿病等的治療[12-13]。

常用的中藥滅菌方法包括干熱滅菌、濕熱滅菌、輻照滅菌和環(huán)氧乙烷氣體滅菌等，這些方法各有利弊。其中，輻照是一種“冷滅菌”方法，其穿透力強(qiáng)，不會(huì)引起被輻照物溫度的明顯升高，適合揮發(fā)性、熱敏性中藥的大批量滅菌[14]。 我國的中藥輻照滅菌研究始于20世紀(jì)60年代，且發(fā)布了《60Co 輻照中藥滅菌劑量標(biāo)準(zhǔn)》(衛(wèi)藥發(fā)[1997]第38 號)，該標(biāo)準(zhǔn)成為中藥領(lǐng)域60Co 輻照滅菌的重要依據(jù)[15]。 2015年國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了《中藥輻照滅菌技術(shù)指導(dǎo)原則》[16]，為保證中藥藥品質(zhì)量，規(guī)范輻照技術(shù)在中藥滅菌中的正確應(yīng)用提供了指導(dǎo)。

目前用于輻照滅菌的射線類型主要有γ 射線和電子束，60Co-γ 射線輻照滅菌的實(shí)際應(yīng)用最為廣泛，電子束輻照滅菌的發(fā)展也十分迅猛。 電子束和γ 射線屬于不同類型的射線，它們的性質(zhì)及作用機(jī)制不完全相同[17]。 前期中藥輻照滅菌的研究主要以60Co-γ射線為主，關(guān)于電子束輻照對中藥滅菌的效果以及2種輻照滅菌方式作用效果差異性的研究較少[18-20]。本試驗(yàn)以葛根提取物為材料，分別研究不同劑量60Coγ 射線和電子束輻照滅菌對葛根提取物微生物限度[需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、大腸埃希氏菌(Escherichia coli)和沙門氏菌(Salmonella)]、自由基清除等抗氧化活性及指紋圖譜的影響，并考察2 種輻照滅菌方式效果的差異性，旨在為輻照滅菌技術(shù)，特別是電子束輻照滅菌技術(shù)在中藥材及飲片中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

葛根提取物(葛根素含量60%，長沙市惠瑞生物科技有限公司)用PE 自封袋封裝，每袋50 g，共15份，用于微生物限度檢查；每袋約100 g，共27 份，用于抗氧化活性測定和高效液相色譜(high-performance liquid chromatography，HPLC)指紋圖譜檢測。

葛根素標(biāo)準(zhǔn)對照品(含量純度95.4%)中國食品藥品檢定研究院；胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，購于廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(1，1-diphenyl - 2-picrylhydrazyl，DPPH)，日本W(wǎng)AKO 公司；乙腈(HPLC級)，美國SIGMA 公司；重鉻酸銀和重鉻酸鉀(銀)劑量計(jì)，實(shí)驗(yàn)室自制；乙醇、鐵氰化鉀、三氯乙酸、氯化鐵、磷酸等試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 主要儀器與設(shè)備

Agilent Technologies 1260 Infinity Ⅱ高效液相色譜儀，美國Agilent 公司；SB-5200D 超聲波清洗儀，寧波新芝生物科技股份有限公司；SQP 電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司；SPX-250B 生化培養(yǎng)箱，天津泰斯特儀器有限公司；MJ 霉菌培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；超凈工作臺，蘇州凈化設(shè)備有限公司；LDZX-50KBS 立式壓力蒸汽滅菌鍋，上海申安醫(yī)療器械廠；UV-2450 紫外可見分光光度計(jì)，日本島津公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 輻照處理 γ 射線輻照在湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所湖南輻照中心進(jìn)行，放射源為60Co，放射性活度為3. 14×1016Bq，采用動(dòng)態(tài)方式輻照，劑量率約8. 33 Gy·min-1。 輻照過程用經(jīng)中國計(jì)量科學(xué)研究院國家劑量保證服務(wù)(NDAS)比對標(biāo)定的重鉻酸銀和重鉻酸鉀(銀)劑量計(jì)進(jìn)行劑量跟蹤。

電子束輻照在湖南湘華華大生物科技有限公司進(jìn)行，功率15 kW，電子束能量10 MeV，劑量率約1 kGy·s-1。 輻照過程用經(jīng)中國計(jì)量科學(xué)院標(biāo)定的FWT-60 劑量片進(jìn)行劑量跟蹤。

試驗(yàn)輻照劑量分別為0、2.5、5.0、7.5、10.0 kGy，60Co-γ 射線吸收劑量實(shí)測值分別為0、2.8、5.7、8.3、10.6 kGy，電子束吸收劑量實(shí)測值分別為0、2.4、5.1、7.7、10.3 kGy，以上每個(gè)劑量設(shè)3 個(gè)平行。 樣品輻照完成后立即進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測，所有樣品均重復(fù)檢測3 次。

1.3.2 微生物限度檢測 參照《中國藥典》(2015版)非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查(通則1105):微生物計(jì)數(shù)法；非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查(通則1106):控制菌檢查法。 其中，需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)采用平皿法中的傾注法[5]。

1.3.3 抗氧化活性測定 稱取2.0 g 葛根提取物，加入80 mL 70%乙醇溶液，于80℃恒溫水浴鍋中避光浸提30 min，提取液于3 000 r·min-1離心10 min，取上清液作為葛根提取物中抗氧化成分提取液，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆肹21]。

1.3.3.1 DPPH 自由量(DPPH·)清除率測定 用無水乙醇配制0.2 mmol·L-1DPPH 溶液，避光保存?zhèn)溆?。?.0 mL 提取液與3.0 mL DPPH 溶液混合搖勻，避光放置30 min，于517 nm 波長處測定吸光度值A(chǔ)X。同時(shí)，取3.0 mL 乙醇與3.0 mL DPPH 溶液混勻，避光放置30 min，于517 nm 波長處測定吸光度值A(chǔ)0，以乙醇作為空白Ai。 按照公式計(jì)算DPPH·清除率[22]:

1.3.3.2 羥基自由基(·OH)清除率測定 取1.0 mL 0.15 mo1·L-1磷酸緩沖液(pH 值7.4)、0.2 mL 520 μg·mL-1番紅O 溶液、1.0 mL 6 mmo1·L-1EDTA Na2-Fe2+溶液混合，再加入7.0 mL 提取液，最后加入0.8 mL 6% H2O2，置于40℃水浴30 min，在520 nm 波長處測定吸光度值A(chǔ)。 以去離子水做空白調(diào)零(Ai)，以等體積的去離子水和EDTA Na2-Fe2+溶液作為對照(A0)。 以0.02 mg·mL-1特丁基對苯二酚(tertiary butylhydroquinone，TBHQ) 無水乙醇溶液為陽性對照[23]。 按照公式計(jì)算·OH 清除率:

1.3.3.3 總還原力測定 取1 mL 提取液，依次加入磷酸緩沖液(pH 值6. 6)和1%鐵氰化鉀溶液各2. 5 mL，混勻后置于50℃水浴20 min，加入2. 5 mL 10%三氯乙酸溶液，混勻，800 r·min-1離心10 min；取2. 5 mL 上清液，再次加入蒸餾水和0. 1%氯化鐵溶液各2. 5 mL，混勻后靜置10 min，于700 nm 波長處測定吸光度值[23]。 以0. 01 mg·mL-1TBHQ 無水乙醇溶液為陽性對照。 吸光度值越高，表明樣品還原力越強(qiáng)。

1.3.4 HLPC 指紋圖譜測定

1.3.4.1 對照品溶液制備 準(zhǔn)確稱取5.47 mg 葛根素標(biāo)準(zhǔn)對照品，置于25 mL 容量瓶中，加入30%乙醇溶液制成每1 mL 含0.206 93 mg 葛根素的溶液，即得對照品溶液。

1.3.4.2 供試品溶液制備 準(zhǔn)確稱取0.2 g 葛根提取物，置于100 mL 具塞錐形瓶中，加入50 mL 30%乙醇溶液溶解，超聲提取30 min，殘?jiān)c提取液一起轉(zhuǎn)入100 mL 容量瓶中，并用30%乙醇溶液少量多次清洗錐形瓶，清洗液倒入容量瓶中，加30%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，過濾，續(xù)濾液過0.25 μm 微孔濾膜，即得供試品溶液。

1.3.4.3 色譜分析 Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相，按照表1 的程序進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0 mL·min-1，柱溫25℃，進(jìn)樣量5 μL，檢測波長250 nm[5]。

1.3.4.4 指紋圖譜采集 按前述方法分別制備對照品和供試品溶液，以30%乙醇溶液作為溶劑空白。 精密吸取溶劑空白、對照品、供試品溶液分別進(jìn)樣，記錄70 min 指紋圖譜。

表1 流動(dòng)相時(shí)間程序Table 1 The time program of mobile phase

2 結(jié)果與分析

2.1 60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物中微生物存活數(shù)的影響

《中國藥典》2015 版明確規(guī)定了中藥提取物的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，需氧菌總數(shù)不超過103CFU·g-1，霉菌和酵母菌總數(shù)不超過102CFU·g-1[5]。 由表2 可知，未輻照樣品(0 kGy)中需氧菌總數(shù)為3.0×103CFU·g-1，霉菌和酵母菌總數(shù)為7.5×102CFU·g-1，不符合《中國藥典》關(guān)于中藥提取物微生物限度標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。 2 種輻照方式均能有效抑制葛根提取物中微生物的生長，隨著吸收劑量增大，抑制效果逐漸增強(qiáng)。60Co-γ 射線和電子束輻照吸收劑量分別為5.7 kGy 和5.1 kGy時(shí)，樣品的微生物總數(shù)滿足《中國藥典》所規(guī)定的限度標(biāo)準(zhǔn)，吸收劑量分別為5.7 kGy 和7.7 kGy 時(shí)，樣品的微生物總數(shù)均降至10 CFU·g-1以下。 此外，吸收劑量相近時(shí)，經(jīng)60Co-γ 射線輻照后樣品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)均低于電子束輻照樣品，表明60Co-γ射線輻照對葛根提取物的滅菌能力優(yōu)于電子束輻照。

2.2 60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物抗氧化活性的影響

由表3 可知，未輻照樣品的DPPH·和·OH 清除率分別達(dá)到87.41%和72.80%，經(jīng)2 種不同方式輻照處理的葛根提取物均對2 種自由基有較強(qiáng)的清除效果，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化能力和還原能力。60Co-γ 射線和電子束輻照均不會(huì)對葛根提取物的DPPH·和·OH 清除率產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)。 抗氧化劑的抗氧化活性與還原能力直接相關(guān)，抗氧化劑通過發(fā)生還原作用給出電子，從而達(dá)到清除自由基的作用，還原能力越強(qiáng)，抗氧化活性越高。 2 種輻照方式也均不會(huì)對葛根提取物的總還原能力產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)。 因此，60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物的DPPH·清除能力、·OH 清除能力和總還原能力的影響均不顯著(P＞0.05)，2 種輻照方式之間也無顯著差異(P＞0.05)，表明60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物的抗氧化活性不會(huì)產(chǎn)生顯著影響。

表2 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照處理對葛根提取物微生物存活數(shù)的影響Table 2 Effect of 60Co-γ ray and electron beam irradiation at different doses on the microbial survival of pueraria extract

表3 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照處理對葛根提取物抗氧化活性的影響Table 3 Effect of 60Co-γ ray and electron beam irradiation at different doses on the antioxidant activity of pueraria extract

2.3 60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物指紋圖譜的影響

中藥指紋圖譜技術(shù)是研究中藥有效成分、控制中藥質(zhì)量以及鑒別真?zhèn)蔚挠行Х椒ǎ言趪H上得到廣泛認(rèn)可。 葛根素對照品指紋圖譜如圖1 所示，其中4號峰為葛根素。 在葛根提取物指紋圖譜上共選擇標(biāo)定了11 個(gè)共有特征峰，并以4 號峰作為參比峰，結(jié)果見圖2。 采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2.0[24]軟件對不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照葛根提取物的HPLC 圖譜進(jìn)行多點(diǎn)校正、自動(dòng)匹配(時(shí)間窗寬度0.10)，用中位數(shù)法生成對照圖譜R，即共有模式圖(圖2)，并計(jì)算相似度，5 種葛根提取物特征峰的相似度達(dá)到1.0，結(jié)果見表4。 以4 號峰(葛根素)為參比峰，計(jì)算各處理葛根提取物的相對保留時(shí)間及相對峰面積，其中5 種處理11 個(gè)共有峰的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation，RSD)均小于0.5%，相對峰面積的RSD 均小于1.5%(除11 號峰的RSD 為9.98%)，結(jié)果如表5 ～6 所示。 依據(jù)上述指紋圖譜檢測結(jié)果可知，5 種處理樣品的相似度達(dá)到1.00，相對保留時(shí)間的RSD 均小于0.5%，說明5 個(gè)處理樣品的指紋圖譜無顯著性差異。 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照不會(huì)對葛根提取物的指紋圖譜產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)，說明60Co-γ 射線和電子束輻照均不會(huì)對葛根提取物中葛根素含量及整體化學(xué)成分一致性產(chǎn)生顯著影響，且2 種輻照方式之間也無明顯差異。

圖1 葛根素對照品指紋圖譜Fig.1 Fingerprint of reference substance of puerarin

圖2 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照處理葛根提取物指紋圖譜的共有特征峰與共有模式圖Fig.2 The mutual characteristic peaks and mode of fingerprint of pueraria extract treated by 60Co-γ ray and electron beam irradiation with different doses

表4 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照處理對葛根提取物相似度評價(jià)結(jié)果的影響Table 4 Effect of 60Co-γ ray and electron beam irradiation at different doses on the similarity evaluation results of pueraria extract

表5 不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照處理對葛根提取物指紋圖譜相對保留時(shí)間的影響Table 5 Effect of 60Co-γ ray and electron beam irradiation at different doses on the fingerprint relative retention time of pueraria extract

3 討論

3.1 60Co-γ 射線與電子束輻照對葛根提取物微生物的影響

滅菌作為影響中藥及其制劑質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接影響著藥品的安全性、有效性及質(zhì)量穩(wěn)定性[18]。 已有關(guān)于60Co-γ 射線輻照葛根的滅菌研究[25-27]。 1997年，衛(wèi)生部發(fā)布了《60Co 輻照中藥殺菌劑量標(biāo)準(zhǔn)》(內(nèi)部試行)的通知(衛(wèi)藥發(fā)[1997]第38 號)，允許輻照中藥材品種共198 種，葛根位列其中[15]。 而采用電子束輻照滅菌葛根中藥材飲片、提取物及其制劑尚鮮見報(bào)道。 本研究結(jié)果表明，60Co-γ 射線和電子束輻照均能有效降低葛根提取物中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)，隨著吸收劑量增大，對微生物的抑制作用逐漸增強(qiáng)，且60Co-γ 射線輻照對葛根提取物的滅菌能力優(yōu)于電子束輻照。 袁忠誼[19]利用電子束和60Co-γ 射線輻照對左歸丸粉進(jìn)行殺菌處理，發(fā)現(xiàn)二者的殺菌效果無差異，與本研究結(jié)論不一致，究其原因，輻照滅菌效果主要取決于輻照裝置加工能力(放射源源強(qiáng)、電子束束能與功率)、被輻照物品的屬性、輻射劑量率、污染微生物種類等因素。60Co-γ 射線輻照滅菌中藥的工藝已成熟，基本實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化應(yīng)用。 但電子束輻照中藥滅菌技術(shù)起步較晚，基礎(chǔ)較薄弱，僅有利用電子束輻照左歸丸[19]、西洋參[20]、黨參[28]、黃連[29]及山銀花[30]等中藥材料及中成藥的報(bào)道。

3.2 60Co-γ 射線與電子束輻照滅菌對葛根提取物抗氧化活性的影響

葛根中的主要活性成分是以葛根素為主的異黃酮類化合物，其在維持心血管系統(tǒng)穩(wěn)定性、保護(hù)腦神經(jīng)、防止肝腎損傷、改善代謝與免疫功能等方面具有一定的藥理作用[4，31]。 而上述疾病的發(fā)生均不同程度地與機(jī)體內(nèi)自由基的參與有著密切的相關(guān)性，自由基是誘發(fā)相關(guān)疾病的分子基礎(chǔ)之一。 DPPH·是一種穩(wěn)定的自由基，被廣泛應(yīng)用于評價(jià)樣品的體外抗氧化能力?！H 是一種毒性較強(qiáng)的活性氧自由基，是造成生物有機(jī)體過氧化損傷的主要因素之一。 抗氧自由基作用是生物有機(jī)體中較為普遍的自我保護(hù)機(jī)制之一，中藥中的相關(guān)生物活性成分為加強(qiáng)這種保護(hù)機(jī)制提供了重要的物質(zhì)基礎(chǔ)[32]。 近年來，國內(nèi)外學(xué)者對葛根活性成分的提取分離及抗氧化活性開展了大量研究，發(fā)現(xiàn)葛根中的活性成分表現(xiàn)出較強(qiáng)的還原作用，對體外等自由基均具有明顯的清除能力，且隨著活性成分濃度的增加而升高[33-35]。 本研究從DPPH·清除率、·OH 清除率和總還原能力3個(gè)方面評價(jià)了不同劑量60Co-γ 射線和電子束輻照對葛根提取物的抗氧化活性的影響，結(jié)果表明，2 種輻照方式均不會(huì)對葛根提取物抗氧化活性產(chǎn)生顯著影響，2 種輻照方式之間也無明顯差異。 葛根提取物抗氧化活性取決于主要活性物質(zhì)葛根素的含量，王芳等[25]、阮健等[26]和張強(qiáng)等[27]研究表明，60Co-γ 射線輻照對中藥主要有效成分葛根素的含量無影響，因而，60Co-γ 射線輻照對葛根提取物的抗氧化活性無顯著影響。 而電子束輻照對葛根素含量及抗氧化活性的影響研究鮮有報(bào)道。

3.3 60Co-γ 射線與電子束輻照滅菌對葛根提取物指紋圖譜的影響

中藥質(zhì)量控制一直是中藥研究與生產(chǎn)中的難點(diǎn)和熱點(diǎn)，也是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的重要基礎(chǔ)和關(guān)鍵。 中藥指紋圖譜技術(shù)是當(dāng)今國際公認(rèn)的中藥質(zhì)量控制模式，已用于中藥的質(zhì)量評價(jià)與控制和新藥研究[36-37]。 中藥成分具有復(fù)雜性和多樣性，輻照滅菌可能會(huì)引起中藥化學(xué)成分的變化，對中藥的質(zhì)量產(chǎn)生不確定的影響。近年來，利用指紋圖譜分析技術(shù)評價(jià)輻照滅菌對中藥質(zhì)量的影響研究已有報(bào)道[38-40]，但采用指紋圖譜技術(shù)研究輻照滅菌葛根中藥材及飲片、提取物尚鮮見。 本研究采用HPLC 指紋圖譜技術(shù)考察不同劑量60Co-γ射線和電子束輻照葛根提取物指紋圖譜的差異，結(jié)果顯示，2 種輻照處理樣品的指紋圖譜均無顯著差異，表明60Co-γ 射線和電子束輻照均不會(huì)對葛根提取物中葛根素含量及整體化學(xué)成分一致性產(chǎn)生明顯影響。 王芳等[25]研究發(fā)現(xiàn)10 kGy 劑量60Co-γ 射線輻照對保濟(jì)丸主要成分葛根素質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著影響。 阮健等[26]研究60Co-γ 射線輻照對中成藥通脈顆粒成分的影響，發(fā)現(xiàn)輻照劑量為10 kGy 時(shí)，其有效成分葛根素含量未發(fā)生顯著變化。 張強(qiáng)等[27]報(bào)道了3 kGy 劑量60Co-γ射線輻照不影響柴葛退熱散中葛根素的含量。 上述研究結(jié)果均顯示，低于10 kGy 劑量60Co-γ 射線輻照不會(huì)對中成藥中主要有效成分葛根素的含量產(chǎn)生明顯影響，與本研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本研究采用不同劑量60Co-γ 射線與電子束輻照葛根提取物，并以需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、DPPH·清除率、·OH 清除率和總還原能力以及指紋圖譜為評價(jià)指標(biāo)，考察2 種輻照方式對葛根提取物藥材質(zhì)量的影響及其差異性。 結(jié)果顯示，2 種輻照方式對需氧菌、霉菌和酵母菌均有較強(qiáng)的抑制作用，二者效果一致，隨著吸收劑量增大抑制作用增強(qiáng)。 輻照吸收劑量低于10 kGy 時(shí)，2 種輻照方式均不會(huì)對葛根提取物的抗氧化活性及指紋圖譜產(chǎn)生顯著影響，二者之間也無明顯差異。 由此可見，10 kGy 以內(nèi)劑量的60Co-γ 射線與電子束輻照能有效提高葛根提取物衛(wèi)生指標(biāo)，對其主要有效成分及功能活性未產(chǎn)生明顯的破壞，不會(huì)影響葛根提取物的有效性及質(zhì)量穩(wěn)定性。 本研究為葛根提取物及其中成藥制劑的輻照滅菌，特別是電子束輻照滅菌的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。